| 【発明の名称】 |
細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品 |
| 【発明者】 |
【氏名】菊池 宏子
【氏名】荒島 雅樹
【氏名】荒巻 沙也香
【氏名】吉田 浩子
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| 【要約】 |
【課題】天然由来で安全性が高く、効果のより優れた細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品を提供する。
【構成】細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品において、サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有させる。 |
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする細胞賦活剤。
【請求項２】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする美白剤。
【請求項４】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤。
【請求項５】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする抗炎症剤。
【請求項６】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とするアロマターゼ活性促進剤。
【請求項７】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とするプロテアーゼ活性促進剤。
【請求項８】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項９】
サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有することを特徴とする食品。
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【発明の詳細な説明】【技術分野】
【０００１】
本発明は、サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有する細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
加齢に伴う皮膚の弾性低下及びシワ、シミといった老化症状の要因として、細胞機能低下、コラーゲン等の細胞外マトリックス成分の減少や変性、紫外線によるメラニン産生や色素沈着及び細胞の酸化傷害等が挙げられる。このような老化症状を防止・改善するために、従来、様々な有効成分の検索及び配合検討がなされてきた。細胞賦活剤としては、ポンカンのエッセンス（特許文献１参照）、コラーゲン産生促進剤としては、ブナ科ブナ属植物の木の芽からの抽出物（特許文献２参照）、美白剤としては、白鶴霊芝の水及び／又は有機溶媒抽出物（特許文献３参照）、抗酸化剤としては、サルオガセ科サルオガセ属植物の抽出物（特許文献４参照）、抗炎症剤としては、茶ポリフェノール類（特許文献５）、アロマターゼ活性促進剤としては、クロレラの抽出物（特許文献６）、プロテアーゼ活性促進剤としては、カミツレ、コボタンヅル、セイヨウキヅタから選ばれる１種以上の植物抽出物（特許文献７）が知られている。
【０００３】
なお、サキシマフヨウの抽出物を有効成分とする細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品に関する先行技術は認められない。
【特許文献１】特開２００１−１３１０４５号公報
【特許文献２】特開平１０−２０３９５２号公報
【特許文献３】特開２００３−８９６３０号公報
【特許文献４】特開平１０−１８２４１３号公報
【特許文献５】特開平６−９３９１号公報
【特許文献６】特開２００４−１８９６０９号公報
【特許文献７】特開２００３−２２６６１３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来用いられている細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品は、本質的な効果としては不十分な場合もあり、より優れた有効成分の開発が期待されていた。本発明は、このような従来の問題点に鑑みてなされたものであり、天然由来で安全性が高く、効果のより優れた細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記の課題を解決するため、種々の天然物について検討を行った結果、サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物に優れた細胞賦活作用、コラーゲン産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、抗炎症作用、アロマターゼ活性促進作用及びプロテアーゼ活性促進作用を見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、サキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）の抽出物を含有する細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品を提供するものである。
【０００６】
サキシマフヨウの抽出物としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝液、極性有機溶媒、超臨界流体及び亜臨界流体からなる群より選ばれる少なくとも１種でサキシマフヨウを抽出した抽出物が適用できる。
【０００７】
なかでも、（１）常温常圧下、低級アルコール水溶液で抽出した抽出物、（２）高温高圧下、水で抽出した抽出物が好適である。低級アルコール水溶液や水で抽出した後、凍結乾燥等を行って水分を除去してもよい。
【０００８】
細胞賦活、コラーゲン産生促進、美白、抗酸化、抗炎症、アロマターゼ活性促進及びプロテアーゼ活性促進の効果がより優れることから、サキシマフヨウとしてサキシマフヨウ乾燥粉砕物を用いることが好ましい。
【０００９】
サキシマフヨウの抽出物は、グルタチオン産生促進剤及びチロシナーゼ活性阻害剤として機能することにより、美白効果を生じるものと考えられる。また、サキシマフヨウの抽出物は、ＤＰＰＨラジカル消去剤及びＳＯＤ様活性剤（スーパーオキサイド消去剤）として機能することにより、抗酸化効果を生じるものと考えられる。更に、サキシマフヨウの抽出物は、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤として機能することにより、抗炎症効果を生じるものと考えられる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、優れた効果を有する細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤及びプロテアーゼ活性促進剤を提供することができる。また、サキシマフヨウの抽出物を皮膚外用剤に配合することにより、シワ、タルミ、肌のハリ、シミ、クスミといった皮膚老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する老化防止改善用皮膚外用剤やメラニン産生抑制に優れた効果を発揮する美白用皮膚外用剤や抗炎症性に優れた効果を発揮する抗炎症用皮膚外用剤を提供することができる。更に、サキシマフヨウの抽出物を食品に配合することにより、美容、健康維持や栄養補給に優れた効果を発揮する食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明において用いられるサキシマフヨウ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｍａｋｉｎｏｉ）は、アオイ科フヨウ属の植物である。サキシマフヨウ（先島芙蓉）は、石垣島等の南西諸島に成育しており、これらの地域で入手可能である。
【００１２】
サキシマフヨウの抽出物は、サキシマフヨウ原料（抽出の対象であるサキシマフヨウをいう。）を抽出して得られるものである。抽出には、サキシマフヨウのいずれの組織も利用できるが、抽出が容易且つ効率的になることから、サキシマフヨウの樹皮、葉又は実を用いるとよい。サキシマフヨウは、生のままで抽出してもよいが、抽出効率を考えると、細切、乾燥、粉砕等の処理を施してから抽出することが好ましい。
【００１３】
抽出方法としては、抽出溶媒に浸漬する方法か、超臨界流体又は亜臨界流体を用いる方法が適用できる。抽出効率を上げるため、撹拌しながら抽出するか、抽出溶媒中においてサキシマフヨウ原料をホモジナイザーやミキサー等によって均一化しながら抽出してもよい。
【００１４】
抽出溶媒としては、水；メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級アルコール（炭素数６以下のアルコールをいう。）；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；エチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル；酢酸ブチル、酢酸エチル等のエステル；アセトン、エチルメチルケトン等のケトン等の溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。なお、水を除く上記抽出溶媒は極性有機溶媒に該当する。
【００１５】
抽出溶媒としてはまた、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。更に、水や二酸化炭素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、アンモニア等の１種又は２種以上の超臨界流体又は亜臨界流体を用いてもよい。すなわち、水、二酸化炭素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、アンモニア等を用いて、サキシマフヨウの超臨界抽出又は亜臨界抽出を行ってもよい。
【００１６】
抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【００１７】
また、抽出は常温（室温、例えば１０〜４０℃）、常圧（１気圧＝約１００ｋＰａ）で行うことも、オートクレーブ等を用いて高温（例えば、５０℃〜２００℃、好ましくは５０〜１５０℃）高圧（例えば、１００ｋＰａ超５００ｋＰａ以下、好ましくは１００ｋＰａ超３００ｋＰａ以下）で行うこともできる。
【００１８】
超臨界抽出、亜臨界抽出を行う際は、用いる流体の臨界温度以上且つ臨界圧力以上にて抽出することが好ましい。例えば、超臨界流体として二酸化炭素を用いる場合は、３１℃以上且つ７．３ＭＰａ以上にて、メタノールを用いる場合は、２３９℃以上且つ８．１ＭＰａ以上にて、水を用いる場合は、３７４℃以上且つ２２．１ＭＰａ以上にて抽出することが好ましい。
【００１９】
サキシマフヨウの抽出として特に好ましいのは、常温常圧下における低級アルコール水溶液（例えば、メタノール水溶液又はエタノール水溶液、特には、エタノール水溶液）による抽出、高温（例えば、５０〜２００℃、好ましくは、５０〜１５０℃、特には、１２０℃）高圧下における水による抽出である。このような抽出を行うことで、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤又はプロテアーゼ活性促進剤としての機能に優れた抽出物を効果的且つ確実に得ることができる。
【００２０】
サキシマフヨウの抽出物としては、（１）サキシマフヨウの抽出液、（２）サキシマフヨウの抽出液を濃縮及び／又は乾固した後に水又は極性有機溶媒に再度溶解したもの、（３）サキシマフヨウの抽出液に生理作用を損なわない範囲で脱色、脱臭、脱塩等の精製処理又はカラムクロマトグラフィー等による分画処理を施したもの、（４）サキシマフヨウの抽出液及び上記処理を施したサキシマフヨウの抽出液を凍結乾燥し、使用時に水又は極性有機溶媒に再度溶解して用いられる状態にしたもの等が挙げられる。
【００２１】
ここで、サキシマフヨウの抽出液とは、サキシマフヨウ原料から抽出された成分が抽出溶媒中に分散又は溶解した状態のものをいう。また、上記極性有機溶媒としては、上述した低級アルコール、多価アルコール、エーテル、エステル、ケトン等が挙げられる。
【００２２】
サキシマフヨウの抽出物は、優れた細胞賦活作用、コラーゲン産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、抗炎症作用、アロマターゼ活性促進作用及びプロテアーゼ活性促進作用を有し、細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤、皮膚外用剤及び食品として利用することができる。
【００２３】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とする細胞賦活剤は、種々の細胞に対する細胞賦活作用を有し、特に真皮線維芽細胞に対して優れた細胞賦活効果を発揮する。細胞賦活剤中におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、細胞賦活剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２４】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とするコラーゲン産生促進剤は、コラーゲン産生促進作用を有し、特に真皮線維芽細胞におけるコラーゲンI産生及び表皮角化細胞におけるコラーゲンIV産生に対して優れたコラーゲン産生促進効果を発揮する。コラーゲン産生促進剤中におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、コラーゲン産生促進剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２５】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とする美白剤は、美白作用を有し、特にグルタチオン産生促進作用、チロシナーゼ活性阻害作用及びメラニン産生抑制作用に基づく美白作用によって、シミ・ソバカスといった色素沈着症状の改善に優れた効果を発揮する。美白剤中におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、美白剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２６】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とする抗酸化剤は、抗酸化作用を有し、特にＤＰＰＨラジカル消去作用及びＳＯＤ様活性作用（スーパーオキサイド消去作用）に基づく抗酸化作用によって優れた効果を発揮する。抗酸化剤中におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、抗酸化剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２７】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とする抗炎症剤は、抗炎症作用を有し、特にヒアルロニダーゼ活性阻害作用に基づく抗炎症作用によって優れた効果を発揮する。抗炎症剤中におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、抗炎症剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２８】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とするアロマターゼ活性促進剤は、アロマターゼ活性促進作用に基づくエストロゲン産生促進作用によって、優れた美肌効果や抗老化効果を発揮する。アロマターゼ活性促進剤におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、アロマターゼ活性促進剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００２９】
サキシマフヨウの抽出物を有効成分とするプロテアーゼ活性促進剤は、皮膚内部のプロテアーゼを活性化することにより、自らの肌の生まれ変わりであるセルフピーリングを促し、優れた美肌効果や抗老化効果を発揮する。プロテアーゼ活性促進剤におけるサキシマフヨウの抽出物の含有量は、プロテアーゼ活性促進剤全量基準で、０．０００１〜１００質量％が好ましく、０．００１〜５０質量％がより好ましい。
【００３０】
また、サキシマフヨウの抽出物を皮膚外用剤に配合することにより、皮膚老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する老化防止改善用の皮膚外用剤やメラニン産生抑制に優れた効果を発揮する美白用皮膚外用剤や抗炎症性に優れた効果を発揮する抗炎症用皮膚外用剤を得ることができる。皮膚外用剤に配合する際のサキシマフヨウの抽出物の配合量は、皮膚外用剤の種類や使用目的等によって調整することができるが、効果や安定性等の点から、皮膚外用剤全量基準で、０．０００１〜５０．０質量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜１０．０質量％である。
【００３１】
サキシマフヨウの抽出物を配合する皮膚外用剤（細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤等として適用できる皮膚外用剤）の剤形は任意であり、例えば、ローション等の可溶化系、クリームや乳液等の乳化系、カラミンローション等の分散系として提供することができる。更に、噴射剤と共に充填したエアゾール、軟膏剤、粉末、顆粒等の種々の剤形で提供することもできる。
【００３２】
なお、サキシマフヨウの抽出物を配合する皮膚外用剤には、サキシマフヨウの抽出物の他に、必要に応じて、通常医薬品、医薬部外品、皮膚化粧料、毛髪用化粧料及び洗浄料に配合される、油性成分、保湿剤、粉体、色素、乳化剤、可溶化剤、洗浄剤、紫外線吸収剤、増粘剤、薬剤、香料、樹脂、防菌防黴剤、アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤又はプロテアーゼ活性促進剤との併用も可能である。
【００３３】
更に、サキシマフヨウの抽出物は、美容、健康維持や栄養補給を目的とする食品、飲料及び医薬品にも用いることができる。サキシマフヨウの抽出物を配合する食品、飲料及び医薬品の剤形は任意であり、例えば、ドリンク剤や点滴剤などの液剤、ガムや飴などの固形剤、又はカプセル、粉末、顆粒、錠剤などの一般的な剤形で提供することができる。
【００３４】
なお、サキシマフヨウの抽出物を配合する食品、飲料及び医薬品には、サキシマフヨウの抽出物の他に、必要に応じて、通常食品、飲料、医薬品及び医薬部外品に配合される、糖類、塩類、アルコール類、アミノ酸、着色料、香料、甘味料、酸味料、防腐剤、増粘剤、薬剤等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤又はプロテアーゼ活性促進剤との併用も可能である。
【実施例】
【００３５】
以下に、サキシマフヨウの抽出物の製造例、各作用を評価するための実験について更に詳細に説明するが、本発明はこれによって何ら限定されるものではない。
【００３６】
［製造例１］
サキシマフヨウの樹皮又は葉の乾燥粉砕物に２０倍量の５０質量％エタノールを加えて室温にて攪拌しながら２時間抽出した後、濾過により不溶物を取り除いた。減圧濃縮後、凍結乾燥を行って、サキシマフヨウの抽出物を得た。
【００３７】
［製造例２］
サキシマフヨウの樹皮、葉又は実の乾燥粉砕物に２０倍量の精製水を加え、オートクレーブを用いて１２０℃にて２０分間加温して抽出した。高温を維持しながら吸引濾過により不溶物を取り除いた後、凍結乾燥を行って、サキシマフヨウの抽出物を得た。
【００３８】
上記製造例によって得られたサキシマフヨウの抽出物を用いて、各作用を評価するための実験を行った。
【００３９】
［実施例１］ 真皮線維芽細胞に対する細胞賦活作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当り２．０×１０４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に１質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したものを用いた。２４時間培養後、培地を、１質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて各試料濃度に調製したサンプル培養液に交換し、更に４８時間培養した。
【００４０】
次に３−（４,５−ジメチル−２−チアゾリル）−２,５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を４００μｇ／ｍＬ含有する培地に交換して２時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを２−プロパノールにて抽出した。マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度を測定し、同時に濁度として６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両測定値の差を用いて細胞賦活作用を評価した。
【００４１】
真皮線維芽細胞に対する細胞賦活作用は、試料無添加のコントロールにおける細胞賦活作用を１００としたときの相対値として評価した。表１は、その評価結果を示すものである。なお、表中の＊＊は、ｔ検定における有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を表している。
【００４２】
【表１】
【００４３】
表１より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物を添加した培地では、有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。特に、試料を０．１３〜０．２５ｍｇ／ｍＬ添加した場合には、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意な真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れた真皮線維芽細胞賦活作用を有することが明らかとなった。
【００４４】
［実施例２］ 真皮線維芽細胞に対するI型コラーゲン産生促進作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したものを用いた。２４時間培養後、培地を、０．５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて各試料濃度に調製したサンプル培養液に交換し、更に２４時間培養した。
【００４５】
培養上清中に分泌されたI型コラーゲンの量は酵素免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて測定した。まず、培養上清中のI型コラーゲンをウサギ抗ヒトI型コラーゲンポリクローナル抗体（ＣＨＥＭＩＣＯＮ）と反応させた後、二次抗体としてペルオキシダーゼ標識抗ウサギＩｇＧポリクローナル抗体（ＨＩＳＴＯＦＩＮＥ；ニチレイ）を用いて標識した。次に、標識したペルオキシダーゼに対し２，２’−アジノビス（３−エチルベンゾチアゾリンー６−スルホン酸）ジアンモニア塩（ＡＢＴＳ）及び過酸化水素を添加し反応させた後、マイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍの吸光度を測定した。
【００４６】
更に、ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａｓｓａｙ ｋｉｔにて各ウェルのタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのI型コラーゲン産生量を求めた。
【００４７】
真皮線維芽細胞に対するI型コラーゲン産生促進作用は、試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りI型コラーゲン産生量を１００としたときの相対値として評価した。表２は、その評価結果を示すものである。なお、表中、ｔ検定における有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を＊＊で表している。
【００４８】
【表２】
【００４９】
表２より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物を添加した培地では、有意な真皮線維芽細胞に対するI型コラーゲン産生促進作用が認められた。特に、試料を０．２５ｍｇ／ｍＬ添加した場合には、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なI型コラーゲン産生促進作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたI型コラーゲン産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００５０】
［実施例３］ 表皮角化細胞に対するIV型コラーゲン産生促進作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの葉の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。ヒト表皮未全角化細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したものを用いた。２４時間培養後、培地を、５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて各試料濃度に調製したサンプル培養液に交換し、更に５日間培養した。
【００５１】
培養上清中に分泌されたIV型コラーゲンの量は、サンドイッチＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。まず、培養上清中のIV型コラーゲンをIV型コラーゲンに対するモノクローナル抗体（認識部位：α２鎖）と反応させた後、ビオチン化ポリクローナル抗体と反応させた。
【００５２】
次に、アビジン化ホースラディッシュペルオキシダーゼを添加し、ビオチン化ポリクローナル抗体のビオチン部と結合させた。ペルオキシダーゼの基質となる３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジンを添加し発色させ、マイクロプレートリーダーにて６５０ｎｍの吸光度を測定した。
【００５３】
更に、ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａｓｓａｙ ｋｉｔにて各ウェルのタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのIV型コラーゲン産生量を求めた。
【００５４】
表皮角化細胞に対するIV型コラーゲン産生促進作用は、試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りIV型コラーゲン産生量を１００としたときの相対値として評価した。表３は、その評価結果を示すものである。なお、表中の＊＊は、ｔ検定における有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を表している。
【００５５】
【表３】
【００５６】
表３より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物を添加した培地では、有意な表皮未全角化細胞に対するIV型コラーゲン産生促進作用が認められた。特に、試料を０．５〜１．０ｍｇ／ｍｌ添加した場合には、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なIV型コラーゲン産生促進作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたIV型コラーゲン産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００５７】
［実施例４］ Ｂ１６マウスメラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。Ｂ１６マウスメラノーマ（Ｂ１６Ｆ０）細胞を９０ｍｍディッシュに１ディッシュ当たり１８０００個となるように播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したものを用いた。２４時間培養後、培地を、５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて各試料濃度に調製したサンプル培養液に交換し、更に５日間培養した。
【００５８】
このとき、試料無添加の５質量％ＦＢＳ添加ＤＥＭＥ培地をネガティブコントロールとし、乳酸ナトリウムを５０ｍＭの濃度で含有する５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地をポジディブコントロールとして用いた。
【００５９】
培養終了後、０．２５％トリプシンを用いたトリプシン処理にて細胞を回収し、１．５ｍＬマイクロチューブに移して遠心操作して細胞沈殿物を得た。得られた沈殿物の黒化状況を肉眼にて目視判定した。表４は、目視判定の基準を示すものである。なお、ネガディブコントロールを判定５、ポジディブコントロールを判定１とし、目視判定の基準とした。
【００６０】
また、上記得られた沈殿物に組織溶解剤（商品名：Ｓｏｌｖａｂｌｅ）を添加して煮沸した後、室温まで冷却し、分光光度計（ＨＩＴＡＣＨＩ製分光光度計Ｕ−３０１０）により５００ｎｍの吸光度を測定した。上記判定及び５００ｎｍ吸光度によって、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用を評価した。表５は、その評価結果を示すものである。
【００６１】
【表４】
【００６２】
【表５】
【００６３】
表５より明らかなように、試料を１００μｇ／ｍＬ添加した培地を用いた場合には、ポジティブコントロールと比べて僅かな黒化しか認められなかった。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたメラニン産生抑制作用及びそれに基づく美白作用を有することが明らかとなった。
【００６４】
［実施例５］ 表皮メラニン細胞に対するグルタチオン産生促進作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。正常ヒト表皮メラニン細胞を１ウェル当たり３．０×１０４個となるように、コラーゲンコートした９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には、ＭＧＭ培地に２％ＦＣＳ、線維芽細胞増殖因子（以下ＦＧＦ）（３ｎｇ／ｍＬ）、インシュリン（５μｇ／ｍＬ）及びハイドロコルチゾン（０．１８μｇ／ｍＬ）を加えたものを用いた。５％ＣＯ２下、３７℃で２４時間培養後、各試料濃度に調製した培地を１００μＬ添加し、４８時間培養した。
【００６５】
培養後、フェニルメチルスルフォニルフロリド（（ＰＭＳＦ）０．１ｍＭ）を含むリン酸緩衝化生理食塩水（以下ＰＢＳ）（ｐＨ７．５）で洗浄後、ＰＭＳＦ（０．１ｍＭ）を含むＰＢＳ１００ｍＬを加えて５秒間超音波破砕処理を行った後、処理液を他のプレートに移した。
【００６６】
次に、処理液に、２ｍＭのＮＡＤＰＨを含む５％炭酸水素ナトリウム水溶液２５μＬを加え、更に、エチレンジアミン四酢酸（０．５ｍＭ）、ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）及びグルタチオンリダクターゼ（１２．５／ｍＬ）を含む０．１Ｍリン酸緩衝液２５μＬを添加した０．５ｍＭのエチレンジアミン四酢酸を含むリン酸緩衝液１２５μＬを加えた。３７℃で１０分間放置後、０．５ｍＭのエチレンジアミン四酢酸と１０ｍＭの５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）を含む０．１Ｍリン酸緩衝液２５μＬをそれぞれのウェルに加えて、４５０ｎｍの吸光度からグルタチオン濃度を測定した。
【００６７】
また、ＰＩＥＲＣＥ社製のＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａｓｓａｙ ｋｉｔにてタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのグルタチオン産生量を求めた。
【００６８】
表皮メラニン細胞に対するグルタチオン産生促進作用は、試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りグルタチオン産生量を１００としたときの相対値として評価した。表６は、その評価結果を示すものである。なお、表中の＊＊は、ｔ検定における有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を表している。
【００６９】
【表６】
【００７０】
表６より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物を添加した培地では、有意なグルタチオン産生促進作用が認められた。特に、試料を０．２５〜１．０ｍｇ／ｍｌ添加した場合には、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なグルタチオン産生促進作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたグルタチオン産生促進作用及びそれに基づく美白作用を有することが明らかとなった。
【００７１】
［実施例６］ 表皮メラニン細胞に対するチロシナーゼ活性阻害作用の評価実験
この評価実験には、製造例２に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。正常ヒト表皮メラニン細胞を１ウェル当り３．０×１０４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはクラボウ社製Ｍｅｄｉｕｍ１５４Ｓを用いた。２４時間培養後、培地を、Ｍｅｄｉｕｍ１５４Ｓにて各試料濃度に調製したサンプル培養液に交換し、更に４８時間培養した。
【００７２】
次に、培養液を、１質量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ含有リン酸緩衝液７５μLに交換し、細胞を完全に溶解させた。そのうち５０μＬを粗酵素液とし、これに基質となる５０μＬの０．０５質量％Ｌ−ドーパ含有リン酸緩衝液を加え、３７℃で２時間静置した。
【００７３】
基質添加直後と反応終了時の４０５ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダーにて測定し、両測定値の差を下式に導入して求めた値をドーパメラニン生成量とした。
｛（反応後４０５ｎｍ値−反応前４０５ｎｍ値）−２．１６６｝／５．２３８
【００７４】
また、ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅａｇｅｎｔ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔにてタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのドーパメラニン生成量を求めた。
【００７５】
表皮メラニン細胞に対するチロシナーゼ活性阻害作用は、試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りドーパメラニン生成量を１００としたときの相対値として評価した。表７は、その評価結果を示すものである。なお、表中の＊＊は、ｔ検定における有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を表している。
【００７６】
【表７】
【００７７】
表７より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物を添加した培地では、有意なチロシナーゼ活性阻害作用が認められた。特に、試料を０．２５〜１．０ｍｇ／ｍＬ添加した場合には、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なチロシナーゼ活性阻害作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたチロシナーゼ活性阻害作用及びそれに基づく美白作用を有することが明らかとなった。
【００７８】
［実施例７］ ＤＰＰＨラジカル消去作用の評価実験
この評価実験には、製造例２に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの葉の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。５０質量％エタノールにて各試料濃度に調製したサンプル溶液を、９６ウェルマイクロプレートに１００μＬずつ添加した。更にそこへ、０．２ｍＭの１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）エタノール溶液を１００μＬずつ添加した。
【００７９】
十分に混合後、室温にて暗所に２４時間静置した後、ＤＰＰＨラジカルに由来する５１６ｎｍの吸光度を測定した。試料を添加しなかった場合の吸光度を（Ａ）、試料を添加した場合の吸光度を（Ｂ）としたとき、下式によって求めた値をＤＰＰＨラジカル消去率とした。ＤＰＰＨラジカル消去率によってＤＰＰＨラジカル消去作用を評価した。表８は、その評価結果を示すものである。
｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
【００８０】
【表８】
【００８１】
表８より、サキシマフヨウの抽出物はＤＰＰＨラジカル消去作用に基づく抗酸化作用を有することが明らかとなった。
【００８２】
［実施例８］ ＳＯＤ様活性作用の評価実験
この評価実験には、製造例２に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの葉の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。０．２５ｍＭ ＷＳＴ−１及び１ｍＭ Ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅを含むＨＡＮＫ’Ｓ（十）溶液７５ｍＬに、ＨＡＮＫ’Ｓ（十）溶液にて各試料濃度に調製したサンプル溶液２５ｍＬを添加した。更に、Ｘａｎｔｈｉｎｅ Ｏｘｉｄａｓｅ２５ｍＬ（０．００７５Ｕｎｉｔｓ）を添加し、３７℃にて１５分間反応させた後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。
【００８３】
サンプル溶液にかえてＨＡＮＫ’Ｓ（十）溶液のみを添加した場合の吸光度を（Ａ）、サンプル溶液を添加した場合の吸光度を（B）としたとき、下式によって求めた値をスーパーオキサイドアニオン消去率とした。スーパーオキサイドアニオン消去率によってＳＯＤ様活性作用を評価した。表９は、その評価結果を示すものである。
｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
【００８４】
【表９】
【００８５】
表９より、サキシマフヨウの抽出物はＳＯＤ様活性作用に基づく抗酸化作用を有することが明らかとなった。
【００８６】
［実施例９］ ヒアルロニダーゼ活性阻害作用の評価実験
この評価実験には、製造例２に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの葉の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。市販のヒアルロン酸カリウム塩（ヒト臍の緒由来）を０．９ｍｇ／ｍＬになるように、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、基質溶液とした。市販のヒアルロニダーゼ（ウシ精巣由来）を５，３００ｕｎｉｔ／ｍＬとなるように、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、酵素溶液とした。なお、酵素溶液は用時調製とした。
【００８７】
試験管に、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）にて各試料濃度に調製したサンプル溶液０．１ｍＬと酵素溶液０．０３ｍＬを入れ、３７℃で２０分間反応させた。次に活性化剤を０．０６ｍＬ加え、３７℃で２０分間反応させた。更に基質溶液を０．１５ｍＬ加え、３７℃で１時間反応させた。０．４Ｎ ＮａＯＨ ０．０６ｍＬを加え反応を停止させた後すぐに氷冷し、ホウ酵緩衝液（ｐＨ９．１）を０．０６ｍＬ添加し、３分間煮沸した後更に氷冷した。
【００８８】
ｐ−ＤＡＢＡ溶液（エールリッヒ試薬）を２．０ｍＬ添加し、３７℃で２０分間反応させた後、各試験管から９６ウェルマイクロプレートに移しかえ、マイクロプレートリーダーを用いて５８５ｎｍにおける吸光度を測定した。ヒアルロニダーゼの活性が阻害されると、ヒアルロン酸の分解産物であるＮ−Ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎ（ＧｌｃＮＡｃ）が減少し、Ｍｏｒｇａｎ−Ｅｌｓｏｎ反応による吸光度が低くなる。
【００８９】
試料無添加の０．１Ｍリン酸緩衝液を用いた場合の吸光度をコントロール吸光度、サンプル溶液を用いた場合の吸光度をサンプル吸光度としたとき、下式によって求めた値をヒアルロニダーゼ活性阻害率とした。ヒアルロニダーゼ活性阻害率によってヒアルロニダーゼ活性阻害作用を評価した。表１０は、その評価結果を示すものである。なお、表中、ｔ検定における有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を＊＊で表している。
（コントロール吸光度−サンプル吸光度）／コントロール吸光度×１００（％）
【００９０】
【表１０】
【００９１】
表１０より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物には、有意なヒアルロニダーゼ活性阻害作用が認められた。特に、試料濃度５．０ｍｇ／ｍＬのサンプル溶液を用いた場合は、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なヒアルロニダーゼ活性阻害作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたヒアルロニダーゼ活性阻害作用及びそれに基づく抗炎症作用を有することが明らかとなった。
【００９２】
［実施例１０］ アロマターゼ活性促進作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの葉の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。各試料濃度に調製したサンプル溶液４μＬに、ＮＡＤＰ＋、ＭｇＣｌ２、グルコース−６−リン酸、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ及び昆虫細胞膜タンパクを含む混合溶液（コントロール）９６μＬを添加し、反応液を調製した。続いて反応液を３７℃にて１０分間加温した。
【００９３】
次に、反応液に、１５ｎＭのＣＹＰ１９（アロマターゼ）及び５０μＭの７−メトキシ−４−トリフルオロメチルクマリン（基質）を含む溶液１００μＬを添加した。続いて反応液を３７℃にて３０分間加温した後、１００μＭトリス塩基７５μＬを添加し、反応を停止した。
【００９４】
この反応により、アロマターゼは、基質である７−メトキシ−４−トリフルオロメチルクマリンを分解し、蛍光物質である７−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチルクマリンを生成させる。そこで、励起波長４０９ｎｍ、発光波長５３０ｎｍにて蛍光測定を行った。
【００９５】
アロマターゼ活性促進作用は、試料無添加のコントロールにおける蛍光測定量を１００としたときの相対値として評価した。表１１は、その評価結果を示すものである。なお、表中、ｔ検定における有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を＊＊で表している。
【００９６】
【表１１】
【００９７】
表１１より明らかなように、サキシマフヨウの抽出物には、有意なアロマターゼ活性促進作用が認められた。特に、試料濃度０．１３ｍｇ／ｍＬのサンプル溶液を用いた場合は、コントロールと比較して、危険率１％未満で有意なアロマターゼ活性促進作用が認められた。このことから、サキシマフヨウの抽出物は、優れたアロマターゼ活性促進作用を有することが明らかとなった。
【００９８】
［実施例１１］ プロテアーゼ活性促進作用の評価実験
この評価実験には、製造例１に記載の製造方法によって得られたサキシマフヨウの樹皮の抽出物を試料として用いた。評価は、以下の手順で行った。各試料濃度に調製したサンプル溶液に、トリプシノーゲンを８３ｍｇ／ｍＬとなるように添加した。そこへ、フルオレセイン修飾カゼインを０．２５質量％となるように添加し、反応液を調製した。続いて反応液を３７℃にて２４時間加温した。この反応で、トリプシノーゲンは活性化されてトリプシンとなり、基質であるフルオレセイン修飾カゼインは、トリプシンにより分解された。次に、反応液に、トリクロロ酢酸を３．３質量％となるように添加し、３７℃にて２０分間加温した。これにより、未反応のフルオレセイン修飾カゼインを沈殿させた。
【００９９】
フルオレセイン修飾カゼインの分解により生じた蛍光を測定するため、上清について、励起波長４８５ｎｍ、発光波長５３８ｎｍにて蛍光測定を行った。プロテアーゼ活性促進作用は、試料無添加のコントロールにおける蛍光測定量を１００としたときの相対値として評価した。表１２は、その評価結果を示すものである。
【０１００】
【表１２】
【０１０１】
表１２より、サキシマフヨウの抽出物はプロテアーゼ活性促進作用を有することが明らかとなった。
【０１０２】
続いて、本発明に係るサキシマフヨウの抽出物を配合した皮膚外用剤（細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤、プロテアーゼ活性促進剤等として適用できる皮膚外用剤）及び飲料の処方例を示す。なお、以下、特に明記しない限り、それぞれの成分の配合量は質量％を意味する。
【０１０３】
［処方例１］乳液
【表１３】
【０１０４】
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。
【０１０５】
［処方例２］化粧水
【表１４】
【０１０６】
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【０１０７】
［処方例３］クリーム
【表１５】
【０１０８】
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（１１）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【０１０９】
［処方例４］美容液
【表１６】
【０１１０】
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（１５）を加える。更に４０℃まで冷却し、（１６）を加え、均一に混合する。
【０１１１】
［処方例５］水性ジェル
【表１７】
【０１１２】
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後，（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加え、均一に攪拌混合する。
【０１１３】
［処方例６］クレンジング料
【表１８】
【０１１４】
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）と（４）を順次加え、均一に混合する。
【０１１５】
［処方例７］洗顔フォーム
【表１９】
【０１１６】
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）を加え、均一に混合する。
【０１１７】
［処方例８］メイクアップベースクリーム
【表２０】
【０１１８】
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）と（１２）の成分を加え、均一に混合する。
【０１１９】
［処方例９］乳液状ファンデーション
【表２１】
【０１２０】
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１６）と（１７）の成分を順次加え、均一に混合する。
【０１２１】
［処方例１０］油中水型エモリエントクリーム
【表２２】
【０１２２】
製法：（５）と（６）を（１１）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に撹拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（１０）を（１１）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。
【０１２３】
［処方例１１］パック
【表２３】
【０１２４】
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）と（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）と（７）を加え、均一に混合する。
【０１２５】
［処方例１２］入浴剤
【表２４】
【０１２６】
製法：（１）〜（４）を均一に混合する。
【０１２７】
［処方例１３］ヘアーワックス
【表２５】
【０１２８】
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解後する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を７５℃にて加熱溶解し、前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（１１）と（１２）の成分を加え、均一に混合する。
【０１２９】
［処方例１４］ヘアートニック
【表２６】
【０１３０】
製法：（１）〜（４）の成分を混合，均一化する。
【０１３１】
［処方例１５］飲料
【表２７】
【０１３２】
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【０１３３】
以上に示したとおり、本発明によれば、優れた効果を有する細胞賦活剤、コラーゲン産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤、アロマターゼ活性促進剤及びプロテアーゼ活性促進剤を提供することができる。また、サキシマフヨウの抽出物を皮膚外用剤に配合することにより、シワ、タルミ、肌のハリ、シミ、クスミといった皮膚老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する老化防止改善用皮膚外用剤やメラニン産生抑制に優れた効果を発揮する美白用皮膚外用剤や抗炎症性に優れた効果を発揮する抗炎症用皮膚外用剤を提供することができる。更に、サキシマフヨウの抽出物を食品、飲料及び医薬品に配合することにより、美容、健康維持や栄養補給に優れた効果を発揮する食品、飲料及び医薬品を提供することができる。
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| 【出願人】 |
【識別番号】０００１３５３２４
【氏名又は名称】株式会社ノエビア
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| 【出願日】 |
平成１８年９月６日（２００６．９．６） |
| 【代理人】 |
【識別番号】１０００８８１５５
【弁理士】
【氏名又は名称】長谷川 芳樹
【識別番号】１００１２８３８１
【弁理士】
【氏名又は名称】清水 義憲
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| 【公開番号】 |
特開２００８−６３２７０（Ｐ２００８−６３２７０Ａ） |
| 【公開日】 |
平成２０年３月２１日（２００８．３．２１） |
| 【出願番号】 |
特願２００６−２４２０６７（Ｐ２００６−２４２０６７） |
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