| 【発明の名称】 |
抗微生物組成物 |
| 【発明者】 |
【氏名】角田 衣理加
【氏名】大島 朋子
【氏名】前田 伸子
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| 【要約】 |
【課題】高濃度のティートリー油やアルコールを含有せずとも一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を発揮することができる抗微生物組成物を提供する。
【解決手段】抗微生物組成物は、抗微生物効果を持つ精油であるティートリー油にペパーミント油、レモン油、ラバンサラ油、レモングラス油、レモンユーカリ油、ゼラニウム油、ラベンダー油、グレープフルーツ油、ベルガモット油、ローズウッド油、クローブ油のうち１種又はそれを超える精油を混合したものである。ティートリー油単独の場合よりも更に一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を高め、アルコールを含有せずとも精油の可溶化が可能であり、従って、口内炎やドライマウス、カンジダ症の人が使用しても、刺激や痛み等の苦痛を感じることがなく使用することができ、更に一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を高めることができる。 |
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗微生物効果を持つ精油であるティートリー油にペパーミント油、レモン油、ラバンサラ油、レモングラス油、レモンユーカリ油、ゼラニウム油、ラベンダー油、グレープフルーツ油、ベルガモット油、ローズウッド油、クローブ油のうち１種又はそれを超える精油を混合したことを特徴とする抗微生物組成物。
【請求項２】
ヒマシ油及び水添ヒマシ油の誘導体等の溶剤、又はそれと同等の溶解化を行うことのできる十分な量の溶剤を含有する請求項１に記載の抗微生物組成物。
【請求項３】
甘草成分とその誘導体を含有する請求項１又は２に記載の抗微生物組成物。
【請求項４】
精油がティートリー油、ペパーミント油、レモン油を混合したものである請求項１、２又は３に記載の抗微生物組成物。
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【発明の詳細な説明】【技術分野】
【０００１】
本発明は抗微生物組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
微生物に対して抗微生物効果等を含有する抗微生物組成物は従来から種々あるが、いずれの抗微生物組成物においても高濃度のティートリー油か３０ｖ／ｖ％程度のアルコールが使用されている。
【０００３】
又、精油を含有するうがい薬の先行技術文献としては、例えば、特許文献１がある。特許文献１には、抗微生物活性を効果的に高める３〜６の炭素原子を有するアルコールを含有する抗微生物組成物、特に抗微生物有効量の１個又はそれを超える精油；約０．０１〜約３０．０ｖ／ｖ％の３〜６の炭素原子を有するアルコール；場合によりエタノール；少なくとも１種の界面活性剤；及び水を有する、不快な息、歯垢及び関連する歯肉の疾患の予防及び軽減に有用なうがい組成物が開示されている。
【特許文献１】特表平１１−５１４３５５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ティートリー油単独で抗微生物効果を発揮させる場合、高濃度になるため使用に適さず、又、ティートリー油が低濃度の場合には高濃度のアルコールが使用されており使用に適さない。
【０００５】
一方、ティートリー油に１種又はそれを超える精油を混合することにより、ティートリー油単独の場合よりも更に一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を高めることができ、ヒマシ油及び水添ヒマシ油の誘導体（ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンヒマシ油）を含有することにより、より高い抗微生物効果を発揮することができる。
【０００６】
本発明者等は、上記実情に鑑み、高濃度のティートリー油やアルコールを含有せずとも一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を発揮することができる抗微生物組成物を提供することを目的としてなしたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
請求項１の抗微生物組成物は、抗微生物効果を持つ精油であるティートリー油にペパーミント油、レモン油、ラバンサラ油、レモングラス油、レモンユーカリ油、ゼラニウム油、ラベンダー油、グレープフルーツ油、ベルガモット油、ローズウッド油、クローブ油のうち１種又はそれを超える精油を混合したものである。
【０００８】
請求項２の抗微生物組成物は、ヒマシ油及び水添ヒマシ油の誘導体等の溶剤、又はそれと同等の溶解化を行うことのできる十分な量の溶剤を含有するものであり、請求項３の抗微生物組成物は、甘草成分とその誘導体を含有するものであり、請求項４の抗微生物組成物は、精油がティートリー油、ペパーミント油、レモン油を混合したものである。なお、ヒマシ油及び水添ヒマシ油の誘導体としては、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンヒマシ油等があり、甘草成分とその誘導体としては、例えばグリチルリチン、グリチルリチン酸二ナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、グリチルレチン酸等がある。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の請求項１及び２に記載の抗微生物組成物によれば、ティートリー油単独の場合よりも更に一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を高め、アルコールを含有せずとも精油の可溶化が可能であり、従って、口内炎やドライマウス、カンジダ症の人が使用しても、刺激や痛み等の苦痛を感じることがなく使用することができ、更に一般微生物及び口腔微生物に対する抗微生物効果を高めることができ、又、本発明の請求項３に記載の抗微生物組成物によれば、甘草成分及びその誘導体を含むことにより更に抗炎症効果も期待でき、請求項４の抗微生物組成物においては、口腔に使用した場合、口臭が抑制できる、等種々の優れた効果を奏し得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明の実施の形態を説明する。なお、図も含めて以下の説明において、％はｖ／ｖが記入していないものも、全てｖ／ｖ％である。
アロマセラピーで用いられるある種の精油は近年、さまざまな細菌に対する精油の抗菌作用が注目され始めているが、歯周病原性細菌や齲蝕病原性細菌及び粘膜感染症原因菌等、口腔病原性微生物に対する抗菌効果はいまだに確定していない。そこで、本願発明者は歯周病原性細菌や齲蝕性細菌及び粘膜感染症原因菌等、口腔病原性微生物に対する抗菌効果を確定するために、複数種類の被検菌に対する精油の抗菌効果を検討すると共に、ノンアルコールの溶剤でブレンドした精油が洗口剤として口臭に対し有効であるかどうかを調べた。この際に使用した材料は以下の通りである。
【００１１】
Ｉ．材料
ｉ）被検菌
被検菌としては、口臭の原因とされるＦｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅｔｕｍ ＡＴＣＣ２５５８６（以下、Ｆ．ｎと略称する）、代表的な歯周病原菌であるＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ ＡＴＣＣ３３２７７（以下、Ｐ．ｇと略称する）、齲蝕の原因菌であるＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ ＡＴＣＣ２５１７５（以下Ｓ．ｍと略称する）、カンジダ症の原因真菌であるＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ＡＴＣＣ１８８０４（以下、Ｃ．ａと略称する）、口臭との関連が示唆されるＶｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ ｐａｒｖｕｌａ ＡＴＣＣ１０７９０（以下、Ｖ．ｐと略称する）を用いた。なお、ＡＴＣＣはＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎの略である。
【００１２】
ｉｉ）精油
精油としては、レモン油、ペパーミント油、ティートリー油、クローブ油、ラベンダー油、グレープフルーツ油、ベルガモット油、レモングラス油、レモンユーカリ油、ゼラニウム油、ラバンサラ油、ローズウッド油を用いた。なお、以下の説明では、精油の名称の末尾に付く「油」は省略する場合もある。
【００１３】
ｉｉｉ）溶剤
溶剤とは、本来、「工業の分野で、物質を溶かすのに用いる液体。アルコール、ガソリン等。」に対して用いられる用語だが、本明細書では「精油を溶解化させるために用いた物質」に対して用いる。精油の溶剤としては、３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）水、５ｖ／ｖ％エタノール水（以下単にアルコールと称することもある）を夫々単独で用いた。更に、ヒマシ油及びその誘導体としてポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンヒマシ油等がある。本発明の実施例においては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油）（以下、２％ヒマシ油、若しくは、単にヒマシ油と称する。）を上記溶剤と同様に単独で用いた。
【００１４】
ｉｖ）培地
培地は、保存されている菌を活性化させる前培養、前培養した菌を新たな培地に移して更に活性化させると共に菌数を増やす本培養、ある物質が細菌に対して抗菌性を有するか否かを調べる実験である抗菌試験により使い分けている。
【００１５】
ａ）前培養に使用した培地
被検菌がＦ．ｎ、Ｓ．ｍの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＰ．ｇの場合は、１ｖ／ｖ％ビタミンＫ・ヘミン添加ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ） 液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＣ．ａの場合は、ＴＳＢ＋Ｄ（Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ−デキストロース）液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＶ．ｐの場合は、ＧＡＭ糖分解用半流動培地を用いた。
【００１６】
ｂ）本培養に使用した培地
被検菌がＦ．ｎの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）又はＢＨＩＹ(Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ−Ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ) 液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＰ．ｇの場合は、１ｖ／ｖ％ビタミンＫ・ヘミン添加ＢＨＩ(Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ） 液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＳ．ｍ及びＶ．ｐの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）を用い、被検菌がＣ．ａの場合は、ＴＳＢ＋Ｄ（Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ−デキストロース液体培地（ＢＤ社製）を用いた。
【００１７】
ｃ）抗菌試験時に使用する培地
ｃ）−１ 菌の希釈液を調整する際に使用する培地
各被検菌に対し本培養に使用する液体培地と同じ培地を使用した。
【００１８】
ｃ）−２ コロニーを形成させる際に使用する培地
被検菌がＦ．ｎの場合は、ＢＨＩＹ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ−Ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ) 寒天培地（ＢＤ社製）及びＭｏｄｉｆｉｅｄ ＦＭ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍｅｄｉａ) 寒天培地（日水製薬社製）並びにＧＡＭ寒天培地（日水製薬社製）を用い、被検菌がＰ．ｇの場合は、５ｖ／ｖ％血液添加ＢＨＫ寒天培地及び５％血液添加ＧＡＭ寒天培地を用い、被検菌がＳ．ｍの場合は、Ｔｒｉｐｔｉｃ Ｓｏｙ寒天培地（ＢＤ社製）及びＭｉｔｉｓ Ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ 寒天培地（ＢＤ社製）並びにＧＡＭ寒天培地（日水製薬社製）を用い、被検菌がＣ．ａの場合は、サブロー寒天培地（日水製薬社製）を用い、被検菌がＶ．ｐの場合は、Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ 寒天培地（ＢＤ社製）及びＧＡＭ寒天培地（日水製薬社製）を用いた。
【００１９】
ＩＩ．実験方法
上記材料を用いて行なう実験の流れは次のようになる。
ｉ）被検菌液の調整
ａ）前培養
被検菌がＦ．ｎの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）２ｍｌに冷凍保存されていた菌液を０．５ｍｌ入れ、２日間、３７℃の温度下で、嫌気ボックスにより培養を行なった。
【００２０】
被検菌がＰ．ｇの場合は、１ｖ／ｖ％ビタミンＫ・ヘミン添加ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ） 液体培地（ＢＤ社製）２ｍｌに冷凍保存されていた菌液を０．５ｍｌ入れ、２日間３７℃の温度下で、嫌気ボックスにおいて培養を行なった。
【００２１】
被検菌がＳ．ｍの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）４ｍｌに冷凍保存されていた菌液を０．５ｍｌ入れ、２日間、３７℃の温度下で、嫌気ボックスにより培養を行なった。
【００２２】
被検菌がＣ．ａの場合は、ＴＳＢ＋Ｄ（Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ−デキストロース）液体培地（ＢＤ社製）２ｍｌに冷凍保存されていた菌液０．５ｍｌを入れ、２日間、３０℃好気培養器により培養した。
【００２３】
被検菌がＶ．ｐの場合は、ＧＡＭ糖分解用半流動培地４ｍｌに冷凍保存されていた菌液０．５ｍｌを入れ、２日間、３７℃の温度下で、嫌気ボックスにおいて培養した。
【００２４】
ｂ）本培養
被検菌がＦ．ｎの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）又はＢＨＩＹ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ−Ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ) 液体培地（ＢＤ社製）に前培養した菌液１ｍｌを加え、２日間、３７℃の温度下で嫌気ボックスにおいて培養した。
【００２５】
被検菌がＰ．ｇの場合は、１ｖ／ｖ％ビタミンＫ・ヘミン添加ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ） 液体培地（ＢＤ社製）３０ｍｌに前培養した菌液１ｍｌを加え、２日間、３７℃の温度下で、嫌気ボックスにおいて培養した。
【００２６】
被検菌がＳ．ｍの場合は、ＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）１０ｍｌに前培養した菌液１００μｌを加え、３時間、３７℃の温度下で好気振盪培養（スピード:９０ｍｉｎ−１）した。好気振盪培養の３時間後、新たに用意したＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ−Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地（ＢＤ社製）１５ｍｌに、好気振盪培養したものから１０μｌ取った菌液を加え、１２時間、３７℃の温度下で、好気振盪培養（スピード:９０ｍｉｎ−１）した。
【００２７】
被検菌がＣ．ａの場合は、ＴＳＢ＋Ｄ（Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ−デキストロース）液体培地（ＢＤ社製）２ｍｌに前培養した菌液１ｍｌを加え、２日間、３０℃の温度下で、好気培養器により培養した。
【００２８】
ｉｉ）抗菌試験
抗菌試験はある物質が細菌に対して抗菌性を有するか否かの実験であり、以下の順序で行なう。
ａ）被検菌の調整
本培養した被検菌Ｆ．ｎ、Ｐ．ｇ、Ｓ．ｍ、Ｃ．ａ、Ｖ．ｐをＯ．Ｄ．５（分光光度計により波長６２０ｎｍの光の波長を当てたときに示す値が５の濃度を示す）に調整した。これは、毎回の抗菌試験で被検菌の量を同じ条件に揃えるために行なうものである。
【００２９】
ｂ）精油の調整
溶剤〔３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ(Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水、５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２％ヒマシ油）〕に各精油〔レモン油、ペパーミント油（ミント油）、ティートリー油、クローブ油、ラベンダー油、グレープフルーツ油、ベルガモット油、レモングラス油、レモンユーカリ油、ゼラニウム油、ラバンサラ油、ローズウッド油の他に、ペパーミント油、ティートリー油、レモン油を１：１：１の体積比でブレンドしたブレンド油〕及び水を加えて５〜０ｖ／ｖ％に調整した。
【００３０】
具体的には、各溶剤に各精油及び水を加えて、精油の濃度が５．００ｖ／ｖ％、２．５０ｖ／ｖ％、１．２５ｖ／ｖ％、０．６３ｖ／ｖ％、０．３１ｖ／ｖ％、０．１６ｖ／ｖ％、０．０８ｖ／ｖ％、０．０４ｖ／ｖ％、０．００ｖ／ｖ％の９種類の濃度の試験液を作成した。
【００３１】
ｃ）希釈液の作成、培養
試験管内に、溶剤により精油の濃度調整した試験液２００μｌ及び前述のようにして培養した被検菌液８００μlを入れて希釈液を作成し、十分に攪拌し、培養した。この場合、各被検菌の培地は本培養に使用するものと同一であり、培養の期間及び温度条件も本培養の場合と同一である。但し、Ｓ．ｍはＦ．ｎと同様の条件で培養した。
【００３２】
ｄ）最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定
培養した希釈液により被検菌が発育したか否かの判定は、液体希釈法を用いて行なった。ここで、液体希釈法とは、濃度調整した精油に本培養した一定量の細菌と培地を入れて培養した希釈液が混濁か透明かで細菌の発育抑制効果を見る手法をいい、その際に被検菌液が混濁せずに透明状態を保持する希釈液中の精油の最大希釈濃度を最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）(Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）とした。
【００３３】
而して、溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ） 水の場合の被検菌の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）における精油含有量の平均値は[表１]、[表２]のＭＩＣの欄に示され、溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）の場合の被検菌の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）における精油含有量の平均値は[表３]〜[表６]のＭＩＣの欄に示され、溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）の場合の被検菌の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）における精油含有量の平均値は[表７]〜[表１１]のＭＩＣの欄に示されている。
【００３４】
[表１]は溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１]のＭＩＣの欄は、一つの精油について複数回（平均３回・・・以下同じ）行なった抗菌試験において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。[表１]に示すように、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がティートリーの場合は、１．５６ｖ／ｖ％、ペパーミントの場合は０．２８ｖ／ｖ％、レモンの場合は、１．５６ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、クローブの場合は０．６３ｖ／ｖ％である。[表１]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００３５】
【表１】
【００３６】
[表２]は溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表２]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回の抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表２]に示す通りである。[表２]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００３７】
【表２】
【００３８】
溶剤として３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ） 水を使用した、[表１]、[表２]に示す抗菌試験は、本来の試験の前段階の試験であり、溶剤は洗口剤に使用することはできない。そこで、次に、洗口剤として使用でき且つ最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）が低い溶剤として５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）を使用し、抗菌試験を行ったが、その結果は[表３]〜[表６]に示されている。
【００３９】
[表３]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表３]のＭＩＣの欄は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しており、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は２．５０ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ティートリーの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、ミントの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモンの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ベルガモットの場合は、４．１７ｖ／ｖ％、ローズウッドの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、グレープフルーツの場合は、４．１７ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、１．９４ｖ／ｖ％である。[表３]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００４０】
なお、[表３]においては、精油中、ティートリー、ミント、レモンには頭にＳが付いたものと付いていないものがあるが、これは、同じ名称の精油でもメーカが異なり、Ｓが付いているものはメーカＡ、Ｓが付いていないものは異なるメーカＢである。又、以下の[表４]〜[表１９]においても、精油の頭にＳが付いているものはメーカＡ、付いていないものはメーカＢであることを示す。
【００４１】
【表３】
【００４２】
[表４]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表４]のＭＩＣの欄の数値は、[表３]の場合と同様、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表４]に記載されている通りである。[表４]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００４３】
【表４】
【００４４】
[表５]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＳ．ｍの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表５]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表５]に記載されている通りである。[表５]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００４５】
【表５】
【００４６】
[表６]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＣ．ａの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表６]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表６]に示す通りである。[表６]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００４７】
【表６】
【００４８】
[表３]〜[表６]においては溶剤は５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）であるが、アルコールを溶剤とする洗口剤は、前述のように、口内炎やドライマウス、カンジタ症の人が使用した場合、刺激や痛み等の苦痛を感じる。このため、アルコールを含有せずとも精油の溶解が可能で、しかも、精油の含有量が少なくても抗菌効果のある溶剤について研究を行なった結果、溶剤として例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油、若しくは、単にヒマシ油と称することもある。）やポリオキシエチレンヒマシ油を用いると良いことが判明した。
【００４９】
そこで、次に、溶剤としてポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）を用い、この溶剤に各精油を溶解させた試験液を基に調整した希釈液により抗菌試験を行ったが、その結果は[表７]〜[表１１]に示されている。
【００５０】
[表７]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表７]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００５１】
すなわち、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、０．４２．ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．２６ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、０．８４ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、０．６３ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、０．７９ｖ／ｖ％である。[表７]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００５２】
【表７】
【００５３】
[表８]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表８]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００５４】
すなわち、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．３１ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、２．０８ｖ／ｖ％である。[表８]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００５５】
【表８】
【００５６】
[表９]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＳ．ｍの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表９]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００５７】
すなわち、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、５．００ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、５．００ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．６３ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、２．５０ｖ／ｖ％である。[表９]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００５８】
【表９】
【００５９】
[表１０]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＣ．ａの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１０]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００６０】
すなわち、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．８４ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、１．８８ｖ／ｖ％である。[表１０]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００６１】
【表１０】
【００６２】
[表１１]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＶ．ｐの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１１]のＭＩＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示している。
【００６３】
すなわち、この表から最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、０．３１ｖ／ｖ％以下、Ｓミントの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、０．８４ｖ／ｖ％、ティートリーの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、レモンの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、１．４６ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、０．８４ｖ／ｖ％、ベルガモットの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ローズウッドの場合は、２．０８ｖ／ｖ％、グレープフルーツの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、クローブの場合は、１．２５ｖ／ｖ％である。[表１１]のＭＩＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の標準偏差を示している。
【００６４】
【表１１】
【００６５】
[表７]〜[表１１]のＭＩＣの欄は、被検菌が発育しなかった精油の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を示しているが、平均値を求める前の個々のデータにおける最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の最小値は、全精油において、被検菌がＦ．ｎで精油がレモングラスの場合の０．１６ｖ／ｖ％、最大値は、全精油において、被検菌がＳ．ｍ、精油がＳレモン、ラバンサラの場合の５．００ｖ／ｖ％であることから、好ましい精油の濃度は約０．１６ｖ／ｖ％〜５ｖ／ｖ％である。しかし、精油は約０．０１〜１０ｖ／ｖ％の範囲で最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）に対し有効であると考えられる。
【００６６】
ｅ）最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の測定
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定の結果、被検菌が発育せず透明を保持していた希釈液について、その希釈液の一部（１００μｌ）をシャーレ内の前記した寒天培地に塗抹し、２日間培養して、培地に混濁したコロニーが形成されたか否かで精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）を測定した（コロニー形成法）。コロニーが全く観察されなかった精油の最大希釈値を最小殺菌濃度（ＭＢＣ）（Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）とした。
【００６７】
而して、溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水の場合の被検菌の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）における精油含有量の平均値は[表１]、[表２]のＭＢＣの欄に示され、溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）の場合の被検菌の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）における精油含有量の平均値は[表３]〜[表６]のＭＢＣの欄に示され、溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）の場合の被検菌の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）における精油含有量の平均値は[表７]〜[表１１]のＭＢＣの欄に示されている。
【００６８】
[表１]は、前述したように溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１]のＭＢＣの欄は、一つの精油について複数回行なった抗菌試験において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。[表１]に示すように、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がティートリーの場合は、５．００ｖ／ｖ％、ペパーミントの場合は２．５８ｖ／ｖ％、レモンの場合は、３．７５ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、５．００ｖ／ｖ％、クローブの場合は２．５０ｖ／ｖ％である。[表１]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００６９】
[表２]は溶剤が３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ) 水、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表２]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しているが、具体的数値は[表２]に示す通りである。[表２]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７０】
[表３]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示しており、[表３]のＭＢＣの欄は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーにが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しており、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、１．８８ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は２．５０ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ティートリーの場合は、１．８８ｖ／ｖ％、ミントの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモンの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ベルガモットの場合は、４．１７ｖ／ｖ％、ローズウッドの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、グレープフルーツの場合は、５．００ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、３．３３ｖ／ｖ％である。[表３]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７１】
[表４]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表４]のＭＢＣの欄の数値は、[表３]の場合と同様、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表４]に記載されている通りである。[表４]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７２】
[表５]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＳ．ｍの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表５]のＭＢＣの欄の数値は、[表３]等の場合と同様、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表５]に記載されている通りである。[表５]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７３】
[表６]は溶剤が５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、被検菌がＣ．ａの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表６]のＭＢＣの欄の数値は、[表３]等の場合と同様、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しているが、具体的な数値は[表６]に記載されている通りである。[表６]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７４】
[表７]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＦ．ｎの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表７]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。
【００７５】
すなわち、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、０．５２．ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．３１ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、０．９４ｖ／ｖ％である。[表７]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００７６】
[表８]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＰ．ｇの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表８]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。
【００７７】
すなわち、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、０．３１ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、２．０８ｖ／ｖ％である。[表８]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）標準偏差を示している。
【００７８】
[表９]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＳ．ｍの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表９]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。
【００７９】
すなわち、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、５．００ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、５．００ｖ／ｖ％より高、Ｓレモンの場合は、５．００ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、５．００ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、５．００ｖ／ｖ％より高、ゼラニウムの場合は、５．００ｖ／ｖ％より高、Ｓブレンドの場合は、３．７５ｖ／ｖ％である。[表９]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００８０】
[表１０]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＣ．ａの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１０]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。
【００８１】
すなわち、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓミントの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、５．００ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、２．２９ｖ／ｖ％である。[表１０]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００８２】
[表１１]は溶剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）、被検菌がＶ．ｐの場合の抗菌試験の結果を示している。而して、[表１１]のＭＢＣの欄の数値は、一つの精油について複数回抗菌試験を行なった場合において、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示している。
【００８３】
すなわち、この表から最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は、精油がＳティートリーの場合は、０．３１ｖ／ｖ％以下、Ｓミントの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、Ｓレモンの場合は、０．８４ｖ／ｖ％、ティートリーの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、レモンの場合は、３．３３ｖ／ｖ％、ラバンサラの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、レモングラスの場合は、１．２５ｖ／ｖ％、レモンユーカリの場合は、１．４６ｖ／ｖ％、ゼラニウムの場合は、１．６７ｖ／ｖ％、Ｓブレンドの場合は、１．０４ｖ／ｖ％、ベルガモットの場合は、４．１７ｖ／ｖ％、ローズウッドの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、グレープフルーツの場合は４．１７ｖ／ｖ％、ラベンダーの場合は、２．５０ｖ／ｖ％、クローブの場合は、２．０８ｖ／ｖ％である。[表１１]のＭＢＣ（Ｓ．Ｄ）の欄の数値は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差を示している。
【００８４】
[表７]〜[表１１]のＭＢＣの欄は、培地にコロニーが形成されなかった精油の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を示しているが、平均値を求める前の個々のデータにおける最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の最小値は、全精油において、被検菌がＦ．ｎで精油がティートリーの場合の０．３１ｖ／ｖ％最大値は、全精油において、被検菌がＳ．ｍ、精油がＳレモン、ラバンサラの場合の５．００ｖ／ｖ％であることから、好ましい精油の濃度は約０．３１ｖ／ｖ％〜５ｖ／ｖ％である。しかし、精油は、約０．０１〜１０ｖ／ｖ％の範囲において最小殺菌濃度（ＭＢＣ）に対し有効であると考えられる。
【００８５】
被検菌Ｆ．ｎに対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの３種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１２]が得られる。
【００８６】
【表１２】
【００８７】
[表１２]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表３]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表７]から抽出される。
【００８８】
被検菌Ｐ．ｇに対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの４種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１３]が得られる。
【００８９】
【表１３】
【００９０】
[表１３]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表４]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表８]から抽出される。
【００９１】
被検菌Ｓ．ｍに対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの３種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１４]が得られる。
【００９２】
【表１４】
【００９３】
[表１４]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表５]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表９]から抽出される。
【００９４】
被検菌Ｃ．ａに対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの３種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１５]が得られる。
【００９５】
【表１５】
【００９６】
[表１５]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表６]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値は[表１０]から抽出される。
【００９７】
被検菌Ｆ．ｎに対する最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの３種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１６]が得られる。
【００９８】
【表１６】
【００９９】
[表１６]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表３]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表７]から抽出される。
【０１００】
被検菌Ｐ．ｇに対する最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの４種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１７]が得られる。
【０１０１】
【表１７】
【０１０２】
[表１７]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表４]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表８]から抽出される。
【０１０３】
被検菌Ｓ．ｍに対する最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓレモンの２種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１８]が得られる。
【０１０４】
【表１８】
【０１０５】
[表１８]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表５]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表９]から抽出される。
【０１０６】
被検菌Ｃ．ａに対する最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値を、Ｓティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの３種類の精油について、溶剤〔５ｖ／ｖ％エタノール水（アルコール）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（（２ｖ／ｖ％ＰＥＧ６０−水添ヒマシ油水）（２％ヒマシ油））〕に対応してまとめると、[表１９]が得られる。
【０１０７】
【表１９】
【０１０８】
[表１９]のアルコールの欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表６]から抽出され、２％ヒマシ油の欄におけるＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値は[表１０]から抽出される。
【０１０９】
[表１２]〜[表１９]において、Ｓ．Ｄの欄に記載されている数値は、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）或は最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の標準偏差である。
【０１１０】
[表１２]をグラフに表示すると図１が得られ、[表１３]をグラフに表示すると図２が得られ、[表１４]をグラフに表示すると図３が得られ、[表１５]をグラフに表示すると図４が得られ、[表１６]をグラフに表示すると図５が得られ、[表１７]をグラフに表示すると図６が得られ、[表１８]をグラフに表示すると図７が得られ、[表１９]をグラフに表示すると図８が得られる。
【０１１１】
図１〜図４のグラフから、溶剤が２％ヒマシ油の場合は、溶剤がアルコールの場合よりも、各被検菌に対して最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均値が低い値でも、大体の被検菌の発育制御が行なわれることが明らかであり、同様に、図５〜図８のグラフから、溶剤が２％ヒマシ油の場合は、溶剤がアルコールの場合よりも、各被検菌に対して最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均値が低くても大体の被検菌が殺菌されることが明らかである。
【０１１２】
ｆ）口臭測定
インフォームド・コンセントを得た１５名の歯周病患者に依頼して、水によるうがいの前（術前）、水によるうがい後、及び精油を含有する洗口剤（基材を１００％精製水とした場合は、０．１ｖ／ｖ％ペパーミント、０．１ｖ／ｖ％ティートリー、０．１ｖ／ｖ％レモンの混合精油水、又、基材を５ｖ／ｖ％ポリエチレン硬化ヒマシ油水溶液とした場合は、０．２ｖ／ｖ％ペパーミント、０．１ｖ／ｖ％ティートリー、０．１ｖ／ｖ％レモンの混合精油水）によるうがいの後に、約１０分間経過後、シリンジにより被検者の口内からガスを採集し、しかる後、シリンジ内から注入針により採集したガスをアビリット社製の口臭測定器を使用してガス濃度（ｐｐｂ）を測定した。
【０１１３】
測定した物質は、主な口臭原因物質とされる三つのタイプの揮発性硫黄化合物〔硫化水素（Ｈ２Ｓ）、メチルメルカプタン（ＣＨ３ＳＨ）、ジメチルサルファイド（（ＣＨ３）２Ｓ）〕である。結果は[表２０]、[表２１]、[表２２]、[表２３]に示されている。
【０１１４】
なお、洗口剤は、被検菌が[表２０]の硫化水素（Ｈ２Ｓ）、[表２１]のメチルメルカプタン（ＣＨ３ＳＨ）、[表２２]のジメチルサルファイド（（ＣＨ３）２Ｓ）の場合は、基材を１００ｖ／ｖ％精製水とした、０．１ｖ／ｖ％ペパーミント、０．１ｖ／ｖ％ティートリー、０．１ｖ／ｖ％レモンの混合精油水を使用し、[表２３]の場合は、各被検菌とも基材を５ｖ／ｖ％ポリエチレン硬化ヒマシ油水溶液とした、０．２ｖ／ｖ％ペパーミント、０．１ｖ／ｖ％ティートリー、０．１ｖ／ｖ％レモンの混合精油水を使用した。
【０１１５】
【表２０】
【０１１６】
【表２１】
【０１１７】
【表２２】
【０１１８】
【表２３】
【０１１９】
個々の被検者によりばらつきはあるが、硫化化合物の平均濃度ＡＶＥは、硫化化合物が硫化水素（Ｈ２Ｓ）の場合（[表２０]参照）は、術前よりも水によるうがい後の方がガス濃度は低く、混合精油水によるうがい後のガス濃度は水によるうがい後よりも低い値である。メチルメルカプタン（ＣＨ３ＳＨ）の場合（[表２１]参照）も同様である。しかし、ジメチルサルファイド（（ＣＨ３）２Ｓ）の場合（[表２２]参照）は、平均濃度ＡＶＥは混合精油水によるうがい後のガス濃度が最も高くなっているが、これは５番の被検者のデータが原因であり、他の被検者では、混合精油水によるうがい後にガス濃度が最も低くなっている。
【０１２０】
又、[表２３]から、混合精油水によるうがいの後１時間は、口臭抑制効果が持続するものと考えられる。
【０１２１】
ｖｉ）結果
上述したように、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）、及び最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の測定の結果、精油の濃度は０．１６〜５ｖ／ｖ％の濃度で、被検菌Ｆ．ｎ、Ｐ．ｇ、Ｓ．ｍ、Ｃ．ａ、Ｖ．ｐの発育を抑制し、又、０．３１〜５ｖ／ｖ％の濃度で被検菌Ｆ．ｎ、Ｐ．ｇ、Ｓ．ｍ、Ｃ．ａ、Ｖ．ｐを殺菌することが判明した。
【０１２２】
又、溶剤としてポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を用いた群では、他の溶剤３０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯ（Ｄｉ−Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ） 水又は５ｖ／ｖ％エタノール水を用いた群よりも低い濃度で菌の発育抑制及び殺菌を行なうことができることが分かった。
【０１２３】
更に、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油やポリオキシエチレンヒマシ油のようなヒマシ油及びその誘導体は、口臭、齲蝕、歯周病、カンジタ症等の口腔感染症に対する予防及び軽減に対する精油の高い効果を助けるうえ、この溶剤は、精油を完全に溶解するので見た目もきれいな審美的なものとなる。
【０１２４】
更に又、甘草成分及びその誘導体であるグリチルリチン、グリチルリチン酸二ナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、グリチルレチン酸等は、抗炎症作用を持つ物質であり、歯周病、カンジダ症等の炎症を伴う疾患に対し、精油の高い効果を助けるものである。
【０１２５】
口臭測定では水のみによるうがいの前後では、硫化化合物に変化は見られなかったが、基材を５ｖ／ｖ％ポリエチレン硬化ヒマシ油水溶液とした０．２ｖ／ｖ％ペパーミント、０．１ｖ／ｖ％ティートリー、０．１ｖ／ｖ％レモンの精油混合水によるうがい後は、硫化化合物の低下が見られた。又、うがい後、約１時間口臭を抑制できた（[表２３]参照）。
【０１２６】
なお、本発明は、上述の実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々変更を加え得ることは勿論である。すなわち、上記実施例では、抗微生物組成物が洗口剤の場合について説明したが、洗口剤に限らず、クリーム、ローション、乳液、ジェル、エッセンス、パック、マスク、リップクリーム、シャンプー、リンス、リンス一体型シャンプー、石鹸、ボディソープ、練り歯磨き等の口腔ケア用品等にも適用することができる。又、抗微生物組成物が洗口剤の場合は、精油や、ヒマシ油及び水添ヒマシ油の誘導体等の溶剤、甘草成分とその誘導体等が混合される基材として水を用いるが、抗微生物組成物を洗口剤以外に適用する場合は、基材としては、流動パラフィン、炭酸カルシウム等が挙げられる。
【図面の簡単な説明】
【０１２７】
【図１】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＦ．ｎの際の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図２】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの何れかの場合において、被検菌がＰ．ｇの際の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図３】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＳ．ｍの際の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図４】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＣ．ａの際の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図５】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＦ．ｎの際の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図６】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモン、Ｓブレンドの何れかの場合において、被検菌がＰ．ｇの際の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図７】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＳ．ｍの際の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均を示す棒グラフである。
【図８】溶剤がアルコール又は２％ヒマシ油で、且つ、精油がＳティートリー、Ｓミント、Ｓレモンの何れかの場合において、被検菌がＣ．ａの際の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の平均を示す棒グラフである。
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| 【出願人】 |
【識別番号】５０６２６２１８４
【氏名又は名称】角田 衣理加
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| 【出願日】 |
平成１７年１２月２６日（２００５．１２．２６） |
| 【代理人】 |
【識別番号】１０００６２２３６
【弁理士】
【氏名又は名称】山田 恒光
【識別番号】１０００８３０５７
【弁理士】
【氏名又は名称】大塚 誠一
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| 【公開番号】 |
特開２００７−１６９２５０（Ｐ２００７−１６９２５０Ａ） |
| 【公開日】 |
平成１９年７月５日（２００７．７．５） |
| 【出願番号】 |
特願２００５−３７２７６９（Ｐ２００５−３７２７６９） |
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