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【発明の名称】 アレルギー性疾患の予防法
【発明者】 【氏名】ホルト，パトリック ジー．
【要約】 【課題】アレルギー性疾患に対して感受性の個体においてかかる疾患の防御方法を提供する。

【解決手段】予め脱感作した個体に、アレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球の安定な母集団の確立を誘発するために有効なアレルゲンの投与量または形態を投与し、前記リンパ球が、前記アレルゲンに対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、アレルギー性疾患に感受性であるが前記アレルゲンに対して先行して感作されていない個体におけるアレルギー性疾患の防止に際して使用される、滅菌予防用組成物。
【請求項２】
アレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球の安定な母集団の確立を誘発するために有効な投与量または形態でアレルゲンを使用する方法であって、アレルギー性疾患に感受性であるが前記アレルゲンに対して先行して感作されていない個体におけるアレルギー性疾患の防止に有用な医薬の製造にアレルゲンを使用する方法。
【請求項３】
少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、該アレルゲンがエアロゾルとして製剤化される滅菌予防用組成物。
【請求項４】
少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、該アジュバントが微生物由来のアジュバントである滅菌予防用組成物。
【発明の詳細な説明】【技術分野】
【０００１】
この発明は、アレルギー性疾患、及び特には環境の抗原またはアレルゲンにより誘発されるアレルギー性疾患の予防のための方法及び組成物に関するものである。
本発明者は、アレルゲンの非経口及び腸内的投与に対する液性及び細胞性免疫応答の誘発に関する文献を再調査し、生命初期のアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１（ＴＨ−１）リンパ球の選択的刺激を介した、アレルギー性疾患に対する保護的免疫の誘発のための新規かつ予期されない機構をここに提案する。
【０００２】
この明細書のために下記の定義が使用される：
アレルゲン：ＴＨ−２リンパ球の活性化、及び特異的ＩｇＥ抗体の産生により特徴づけられるアレルギー型免疫応答を刺激する外来抗原；
環境アレルゲン：環境に見い出される任意のアレルゲンであり、そのようなアレルゲンは必ずしもそうではないが、通常は天然に生じるものである；
感作：初回感作抗原またはアレルゲンによる次の対抗量に対する特異的応答のためのＴ−細胞母集団の初回感作であり；この明細書の内容においてはアレルゲン特異的ＴＨ−２細胞の初回感作である；
脱感作：アレルゲン特異的Ｔ−細胞、特にはＴＨ−２細胞、及び／またはアレルゲン特異的免疫もしくはアレルギー性応答に取り入れられた他の細胞型の活性を選択的に抑制するためのアレルゲンまたはその誘導体の治療的投与。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
今世紀のはじめに、実験動物へのそれらが以前に遭遇したことがない抗原の供給が、直接的過敏症の一時的症状を引き出し、これが継続的食物抗原への曝露と共に衰退し、抗原特異的非応答の状態に置き換わることが認識された。この現象は今日では経口耐性として知られ、またＩｇＥ−媒介過敏性応答及び遅延型過敏性応答に対して優先的に向けられることが示されている（１）。この型の耐性は、ＴＨ−１−様サイトカイン類を分泌するＴ−細胞により、動物から動物へと移すことができ（２、３）、またこのようなサイトカインを分泌するアレルゲン特異的Ｔ−細胞はアレルゲン供給の間に腸管膜のリンパ節にて急速に発育する（１０、１２）。
【０００４】
呼吸器官における同等な現象を認識したのは発明者が初めてであり、１９８０年代の初期から根本的な機構を調査してきた（４、５）。基本的な要素は同じであり：抗原エアロゾルの反復吸入が最初にＴＨ−２−依存性ＩｇＥ産生の成分を含む混成免疫応答を引き出すが、しかしながら後半には結局は特異的ＩｇＧ及びＩｇＡ産生の痕跡のみを残して、反復する抗原の対抗量をものともせずに衰退してゆく。このような様式で抗原エアロゾルに受動的に曝露される動物は、その余命において、対抗量の経路あるいは強度に関わらず同じ抗原に対する引き続くＩｇＥ応答を増すことはできない。抗原供給の場合と同様に、抗原吸入の結果生じる“耐性”は、ＩｇＥ及び遅延型過敏症に対して優先的に発現され、ＣＤ８を発現する母集団を含むＴＨ−１−様サイトカイン類を分泌するＴ−細胞により媒介される（６）。更に、この型の“耐性”誘発についての選択は、初期のアレルゲン曝露時またはその前後において免疫系に対して開放されているものと考えられ、安定した進行中のＩｇＥ応答を伴う予め感作された動物は、エアロゾルの曝露によっても“脱感作”されない（４、５）。
【０００５】
これらの過程は、実験動物において共通する更に二つの重要な特徴を示す。第一には、耐性誘発に対する感受性が遺伝子的に決定され、高い感受性が低−ＩｇＥ−応答個体−フェノタイプと共に相続される。操作上、このことは高−ＩｇＥ−応答個体のラット及びマウスを成功裡に耐性付与するために、それらの対応する低−応答個体に比較して１０３から１０４倍高い強度のアレルゲン曝露の必要性として明らかにされる。しかしながら、高及び低応答個体の両者ともに、いずれの経路によっても最終的に耐性付与されること、並びに高−ＩｇＥ−応答個体におけるこれらの機構の固有の不活発さが、より高い強度のアレルゲン刺激を与えることにより克服されうることは明らかである（４、５）。
【０００６】
第二には、保護的耐性を誘発することとは反対に、幼少の極めて早期の相においてアレルゲン曝露が引き続く病原的Ｔ−細胞反応性を引き出しうる程度に離乳前の時期において過程がほとんど機能しない（７）：これは、耐性誘発過程において律速的である粘膜性免疫機能の一種以上の重要要素の遅延出生後成熟に多分よるものであろうが、アレルギー性感作についての高いリスクの初期の“ウィンド”の存在に矛盾しない（７）。
【０００７】
消化管を介しての粘膜的アレルゲン曝露のどの程度のものが、ＩｇＥ−陽性の高−応答動物における進行するＴＨ−２応答を抑制しうるかは明らかではないが、経鼻的に投与されるアレルゲンペプチドを使用する最近の研究は、脱感作との関係におけるこの接近方法の更なる追求を促している。
【０００８】
至る所に存在する環境アレルゲンに対するヒトの初期の曝露は、幼年期または幼児期初期に起こり、成人におけるアレルギー性疾患のトリガーの多くは幼年期に設定されるという認識は、ますます注意を引きつつある。これに関連して、拡大する小児科血清疫学文献に基づいて、生命の最初の２、３カ月の間の高水準のアレルゲン曝露は、幼年後期においてＴＨ−２−様反応性として明らかになるアレルギー性感作の素因を作る（７）と言う統一見解が発展しつつある。このことは、実験動物の場合と同様に、粘膜表面に遭遇するアレルゲンに対するＴＨ−１反応性の効果的“選択”において重要な免疫機能について一時的な成熟欠陥があることを示唆している。
【０００９】
しかしながら、本発明者は、関連するヒトに関する文献の重要な要素が、幼児期初期に共通して起こる個々の食物及び吸入アレルゲンに対するＩｇＥ応答の特徴的な二相的性質であることを認識した。
【００１０】
従って、健常な幼児及びアトピー性応答の家系にあるものの両者が、生命の最初の１年間に通常の食物アレルゲンに対する血清ＩｇＥ抗体応答を典型的には発展させ、それらの強度及び持続期間はＩｇＥ−応答個体−フェノタイプに依存する。同種のパターンは、吸入アレルゲンに対するＩｇＥ応答についても明らかであり（図１）；しかしながら後者は、幼児期後期に始まり、非アトピー性では切る（“耐性付与する”）までにかなりの長期間を要する。さらに、潜在的アトピーのより多くの割合が、食物アレルゲンに対するよりも吸入アレルゲンに対しての血清ＩｇＥ反応性を、幼児期後期まで維持する（８）。
【００１１】
吸入と食物抗原とに対する“耐性”誘発の動力学及び全体の効率についてのこれらの差異は、２種類の器官における抗原曝露の異なった水準に直接に由来するであろう：Ｔ−細胞部分集合の選択は“抗原由来”であり、低水準の呼吸器管曝露を介して与えられる低強度の刺激は、より遅く、かつ最終的により低い効率の過程を生じるものと予想される。
【００１２】
実験動物における非経口的抗原投与量に対するＩｇＥ応答の強度及び持続期間は、ＣＤ４＋Ｔ−細胞部分集合加羅の競合する信号により制御されることが知られている。特に、インターロイキン−４及びインターロイキン−５を分泌するＴ−ヘルパー２（ＴＨ−２）細胞は、ＩｇＥ−Ｂ−細胞スイッチングを促進し、またインターロイキン−２及びインターフェロン−γを分泌するＴＨ−１細胞は、ＴＨ−２クローン性の展開を阻害し、而してＩｇＥ応答を制限する（９）。ヒト末梢血Ｔ−及びＢ−細胞を使用するインビトロ実験系を用いて得られた種々のデータの発明者による再調査は、同等な機構がヒトに存在することを示しており（１０）、この観点は、アトピー性及びＩｇＥ−陰性の健常人の両者が、末梢血中に主要な吸入アレルゲンに対して反応性のＴ−細胞を含み；アトピー性の個体においてはこれらの細胞がＴＨ−２型の主要部であるものと考えられ、その一方で非アトピー性個体ではそれらは主としてＴＨ−１であると考えられることにより補強される（１１）。それぞれのサイトカインパターンが二つの種において同等ではないことから、これらのヒトＴ−細胞部分集合の正確な分類を取り巻いてかなりの論争があり；従って、最近の意見ではヒトにおけるそれらの分類をそれぞれＴＨ１−“様”及びＴＨ−２−“様”とすることが好まれる。
【００１３】
而して我々は、非アトピー性の成人において、環境アレルゲンに対するそれぞれの曝露が、Ｔ−細胞系に対するアレルゲン提示部位におけるＴＨ−１−様サイトカイン放出の突発を引き出し、このことが可能性を持った病原的ＴＨ−２−様反応性の出現に対して“保護”し；各曝露事象は、宿主−保護的ＴＨ−１−様“記憶”を強化するために更に寄与するであろう。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
発明の要約
本発明者は、ヒトにおけるＴ−リンパ系が、生涯を通して環境“アレルゲン”に対する活性ある監視に関わり、それが個体において（単に存在することとは異なり）アレルギー性（アトピー性）または免疫的に正常な（非−応答個体）フェノタイプのいずれを発現するかを決定するアレルゲン特異的Ｔ−細胞応答の性質であることを提案する。発明者は、適切なＴ−細胞母集団の選択が、感受性（脱感作）の宿主における免疫応答の初期の段階にて起こる抗原誘導過程であることを認識した。選択が、Ｔ−ヘルパー−１−様（ＴＨ−１−様）のアレルゲン特異的Ｔ−細胞の成長に有利に働くのであれば、低−グレードの比病原的ＩｇＧ及びＩｇＡ応答が続いて起こり、一方でＴＨ−２−様細胞の出現は、ＩｇＥ産生及び好酸球増加症を、また最終的にアトピー性疾患を導き得る。加えて、ＴＨ−１−様サイトカインは、ＴＨ−２−様クローンの拡大を活発に抑制し、従って、アレルゲンに対する主要な安定したＴＨ−１−様応答が、ＴＨ−２−様依存性のアレルギー性疾患の進展に対抗して活発に保護的であることが提案される。遍在する環境アレルゲンに対するＴ−細胞応答に関しては、最近の小児科学文献の発明者による再調査は、幼児期初期がこの選択が通常に起こる生存中の時期であることを特定し、この過程が完成まで数年を要することを示した。一旦、選択の意味が認識されれば、この自然の選択過程が、宿主保護的ＴＨ−１−様免疫の発展を優先的に刺激するために適用される形態での、アレルゲンの計画的投与により、インビボにおいてそれを制御することを計画するべく、どの様に操作するかは既に十分に知られる。
【００１５】
我々のデータは、“傍観者”細胞母集団、特にＣＤ８＋及び／またはＴγ／δ細胞が、全体のＴＨ−１−様選択過程を活発に補助することを示唆しており、この明細書における“ＴＨ−１−様免疫”なる用語がこれらの細胞による寄与を含むものと理解される。
【００１６】
第一の側面によれば、本発明はアレルギー性疾患に対して感受性の個体においてかかる疾患の防御方法を提供し、該方法は、以前に脱感作した個体に、アレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球の安定な母集団の確立を誘発するために有効なアレルゲンの投与量または形態を投与し、前記リンパ球が、前記アレルゲンに対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害することを含む。
【００１７】
好ましくは、該アレルゲンは環境抗原であり、単一またはこのような２種類以上のアレルゲンの組合せのいずれにより投与されてもよい。アレルゲンは、その自然に生じうる形態であってよい。別法として、該アレルゲンは組換えＤＮＡ技術を使用して調製された蛋白質、または合成ペプチドであってよい。該アレルゲンは、精製された形態、または粗製もしくは部分精製の形態であってよい。該アレルゲンは、全アレルゲン分子を提示してもよく、またその一部、例えば１個以上のエピトープを含むものであってもよい。この発明において使用するために好適なものと解されるアレルゲンは、ハウスダストダニ、ねこ、イヌまたはトリのふけ等の動物のふけ、ゴキブリ、ライグラスまたはアルテルナリア等に由来する草本花粉、カバまたは杉等の木本花粉、羽毛及びかびに由来するものを含む。最も好適なアレルゲンは、地理的位置に依存するであろう。例えば、カバ及び杉花粉は、北ヨーロッパ及び日本においてはアレルギーの主要な原因であるが、オーストラリアにおいてはあまり重要ではない。
【００１８】
発明の両側面において、アレルゲンは経口的、経鼻的、口鼻的、直腸的、皮内的、筋内的または経皮的経路により投与されてよい。アジュバントは好ましくはリポゾームまたは微生物細胞壁生成物である。
【００１９】
アレルゲンは、場合によりアジュバントと共に投与されてもよい。好適なアジュバントは当業者に知られているであろう。Ｔ−ヘルパー−１−様リンパ球を選択的に刺激するアジュバントが好ましい。
【００２０】
アレルゲンの投与量は、該アレルゲン、投与経路、アジュバントを使用するか否かに依存して、一般的にはナノグラムからミリグラムまでの範囲であろう。当業者は、充分確立された原則を使用して、投与の回数及び頻度を容易に決定することができるであろう。非経口投与のためには投与量範囲はマイクログラムの程度であり、経鼻的投与のためには投与量範囲はマイクログラムからミリグラム領域であり、経口または直腸内的投与のためには投与量はミリグラムからグラムの範囲であろうことが予想される。投与量が、アジュバントを使用するか否かに依存し、またアジュバントの性質に依存することは認識されるであろう。
【００２１】
本発明の方法は、投与されるアレルゲンに対して既にアレルギー性、即ち過敏症となっていない個体の処置にのみ好適である。
【００２２】
一般的に該方法は、３カ月から７歳までの小児の治療に最も適当であるが、７歳を越える個体についても適用できる。好ましくは、免疫は６カ月未満ではない小児、更に好ましくは９カ月未満ではない小児に投与される。
【００２３】
幼児期初期においては、ほとんどの個体が環境アレルゲンによる感作に曝されていないため、この期間はアレルゲン特異的宿主保護的なＴＨ−１−様媒介免疫についての選択のために最適な機会を提供するものと考えられる。浮遊するアレルゲン、即ち個体が吸入により曝されるアレルゲンに対する免疫が、幼児期初期において成されることが特に好ましい。
【００２４】
発明の好ましい実施態様に従うと、アレルゲンが幼児期初期に経口的または経鼻的に投与される。
【００２５】
最小のＴＨ−２−様応答の刺激を持って、アレルゲンに対するＴＨ−１−様応答の選択的誘導を与えると考えられる特に好ましい実施態様に従うと、浮遊型のアレルゲンの２種類以上の混合物が、幼児期初期にＴＨ−１−様選択的アジュバントと共に非経口的に投与される。
【００２６】
第二の側面に従うと、本発明は環境アレルゲンを、Ｔ−ヘルパー−１−様リンパ球を選択的に刺激しうるアジュバント、及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有する滅菌組成物を提供する。
【００２７】
該アレルゲンは、粗製または精製品であってよく、天然由来、組換えＤＮＡ技術により製造されたもの、または合成品であってよい。
【００２８】
好ましくは、アレルゲンは、ハウスダストダニ、ねこ、イヌまたはトリのふけ等の動物のふけ、ゴキブリ、ライグラスまたはアルテルナリア等に由来する草本花粉、カバまたは杉等の木本花粉、羽毛及びかびからなる群から選択される。
【００２９】
好ましくは、該組成物は、経口的、経鼻的、口鼻的または直腸内的投与に適合するものであるが、皮内的、経皮的または筋内的投与も使用しうる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
発明の詳細な記述
本発明はここに、下記の非制限的例及び添付する図を参照して詳細に記述されるが、図は：
図１は、健常及びアトピー性幼児における環境アレルゲンに対する出生後血清ＩｇＥ応答を例示する。各曲線は、単一の幼児からの反復する血清試料の結果を表し；個々の健常またはアトピー性幼児についての曲線は示された領域内で減少した。データは参考文献８から導かれた。ＲＡＳＴは、ＩｇＥに対する放射アレルギー吸着試験を表し；ＰＲＵは、ＩｇＥに対するペーパ放射免疫吸着試験（単位／ｍｌ）を表す。
図２は、反復曝露によりＯＶＡに対して“耐性”を付与されたＣ５７ＢＩ／６ＪマウスからのＣＤ８＋リンパ球の養子的移転によるＩｇＥ抗−オボアルブミン（ＯＶＡ）応答の選択的抑制を示す。白抜きの棒、ＩｇＥ；ハッチングした棒、ＩｇＧ（アステリスク、＜対照；Ｐ＜０．０１）。
図３は、γδＴ細胞によるＩｇＥ応答の抑制を例示する。白抜きの棒、ＩｇＥ；ハッチングした棒、ＩｇＧ（アステリスク、＜対照；Ｐ＜０．０１）。
図４は、ＯＶＡ−耐性マウスからの積極的に選択されたγδＴ細胞によるＯＶＡ−特異的耐性の養子的移転の投与量−応答分析を示す。示されるデータは、各マウスからのＩｇＥ力価であり；陰を付した領域は健常動物における極大初期ＩｇＧ応答についての９５％の信頼性限界を表し、実験における全ての動物でのＩｇＧ力価がこの領域へ降下した。Ｃ＊、非処置対照または無垢の動物由来の脾臓細胞の受容動物により得られた比較結果。アステリスク、＜対照；Ｐ＜０．０１。
図５は、初期ＩｇＥ応答の抑制における抑制におけるγδＴ細胞の抗原特異性を例示する。アステリスク、＜対照；Ｐ＜０．０１。
【００３１】
観察される有益な効果についてのいかなる機構にも限定されることを望むことなく、我々は、ヒトにおけるアレルギー性感作防止の“生来”の機構が同起源の免疫学的過程であることを提案し、これは以下のように機能する：
（ｉ）幼児期初期の間、遭遇する主要な環境アレルゲンの活性な免疫学的認識があり、成熟しつつある免疫系が、交差的競合性のＴＨ−１−様及びＴＨ−２−様アレルゲン特異的クローンを含む低グレードの初期には異種的なＴ−細胞応答を始める；
（ｉｉ）通常の環境への曝露を介しての再刺激の反復するラウンドの間に、競合するＴ−細胞フェノタイプの一つが、ついには応答において優勢になり（典型的には非アトピー性の健常被験者におけるＴＨ−１−様）、後の生涯を通じてアレルゲンに対する免疫応答を“監視”し、同じアレルゲンに対して反応性のＴＨ−２−様クローンの出現を阻害するＴ−記憶細胞の安定なプールの確立を導く。
【００３２】
吸入アレルゲンに関しては、これらの初期アレルゲン特異的ＩｇＥ応答が、５−７歳ほどの後期まで非アトピー性においてしばしば終了しないことから（８）、共存する拮抗的ＴＨ−１−様及びＴＨ−２−様Ｔ−細胞母集団の間のこの競合は、幼児期の数年間継続するものと思われる（図１）。いかにしてＴ−細胞反応性が発展するかという最近の理解に基づいて、我々は吸入アレルゲンに対する応答は、この初期の間“可塑性”であり、外的因子によっていずれの方向にも向く様に影響を受けうるものと考える。特に、初期のアレルギー性感作についての既知の環境危険因子（７）は、最終的にＴＨ−２−様反応性の選択を促進しなければならない。更に、実験的文献は、免疫系の平衡を宿主保護的抗アレルゲン応答の選択に向けて潜在的に押し出す強力な一連の機構、特に、両者ともにＴＨ−２−様細胞の拡大を阻害することによりＴＨ−１−様細胞を強く選択する、ある種の微生物的刺激に応答するマクロファージにより産生されるインターロイキン−１２及びインターフェロン−α等のサイトカイン類（１２）及びアレルゲン特異的ＣＤ８＋Ｔ−細胞により産生されるインターフェロン−γの存在を示す。
【００３３】
発明者は、ここでこれらの初期アレルゲン特異的免疫応答の可塑性、及びインビボにおけるそれらの遅い動力学が、潜在的な干渉の機会を提供することを認識した。長い間、環境アレルゲンに対する“感作の窓”として称されてきた初期の幼児期は、未だ非感作である小児において正常な抗−アレルゲン免疫の発達を制御する“機会の窓”を提供するものとして同様に考慮されうる。幼児期初期に起こる進行中のアレルゲン特異的Ｔ−細胞選択過程において、活性の干渉は、アレルゲン特異的宿主保護ＴＨ−１−様免疫についての選択を至適化するであろう：吸入アレルゲンに対する生来の免疫応答の遅い全体的動力学（図１参照）は、このような道がかかるアレルゲンに対する感作の阻止に特に適用可能であることを示唆する。
【００３４】
第１には、幼児期初期において、アレルゲン（または関連ペプチド）の食事または経鼻的投与のいずれかを介して生来の選択過程の促進及び制御が提案される。この方法は、アトピーにおいてさえも小児期の食物アレルゲンに対して出現するＩｇＥ応答の生来の“耐性付与”の成功が、アレルゲン性刺激の全体的水準が通常はかなり低い吸入アレルゲンについて達成されるよりも想到の高いという知見から導かれる。而して、吸入アレルゲン刺激の全体の水準を、適切な経路及び適切な時期により増強することは、ＴＨ−１−様選択の全体の効率を増大させるであろう。
【００３５】
この方法は、外面的には最近多くの研究所で開発されている脱感作の戦術に類似する様に見えるであろうが、それは実際には当に逆であることが強調される；後者は予め確立されたＴＨ−２−様記憶により、感作宿主における病原的ＴＨ−２−様細胞を“沈静化すること”に基づくものであり、一方において本発明の方法は、最初に安定な記憶母集団としてのそれらの出現を阻止することに基づく。
【００３６】
より直接的な戦略は、最新のワクチン技術における最近の開発により示唆され、これは並行するＴＨ−２−様経路を刺激する最小の危険性のもとに、適切な非経口免疫を介して計画通りの抗原に対するＴＨ−１−様応答を選択的に誘発することができる見込みを維持する。従って、幼児期の適切な時期における適切なＴＨ−１−様選択アジュバント中の主要な吸入アレルゲンの混合物を用いる計画的な非経口予防接種は、生来の粘膜刺激の結果として生じる適切なＴＨ−１−様細胞の母集団を支えるための安全かつ信頼性ある方法を提供し、而してアレルゲン特異的Ｔ−記憶プールの最終的優勢を促進するであろう。吸入アレルゲンに関しては、ほとんどのアトピーにおける血清ＩｇＥの高い比率が、相対的の少数の主要環境アレルゲン特異性により説明されうるという知見（１３）は、関連アレルゲン（ワクチン）混合物がかなり複雑であることを要しないという視点を推奨する。
【００３７】
好ましい戦略は、アジュバントの使用に基づくもので、それは：
ａ）マクロファージによるインターロイキン−１２及びインターフェロン−αの分泌を促進し、而して参考文献１２に記述される機構によりＴＨ−１−様細胞の成長を選択するもので；これらのアジュバントは微生物的生成物から誘導されるであろう；および／または
ｂ）我々が最近報告した機構により（６）アレルゲン特異的ＴＨ−１−様細胞の引き続く成長について選択すべく、投与されるアレルゲンに対してクラス１ＭＨＣ−制限免疫の初期突発を選択的に促進するもので；この目的に適したアジュバント及び配送システムは、リポソームの種々の形態、またはイスコム等のアレルゲン−脂質接合体であるものと考えられる。
【００３８】
例１
クラス１ＭＨＣ−制限免疫の予めの誘導による初期アレルゲン特異的ＩｇＥ応答の選択的抑制
マウスは、ＣＤ８＋Ｔ−細胞を初回感作すべく設計されたプロトコールを使用し、最初のアレルゲンであるオボアルブミンに対してワクチン接種された。それ自体既知のこのプロトコールは、浸透圧ショックにより可溶性オボアルブミンが細胞質的に“付加”された脾臓細胞を用る初回感作による、ＣＤ８＋Ｔ−細胞の選択的活性化に基づく。我々の予備的結果は、ワクチン接種されたマウスは、オボアルブミンによる非経口感作に対する引き続く高力価の初期抗原−オボアルブミンＩｇＥ応答を増大することはできず、しかしながら、正常ＩｇＧ応答が可能であることを示している。このことは、初期ワクチン接種はこれらのマウスの抗−オボアルブミン応答のＴＨ−２−様成分を選択的に抑制し、その一方でＴＨ−１−様依存性ＩｇＧ産生が正常に進行したことを示す。この結果は、提案されるワクチン接種戦略の基礎を成す原理を明らかに支持し、また同じ最終結果を達成すべく設計される別のワクチン接種プロトコールに関する更なる実験が進行中である。
【００３９】
例２ アジュバントとしてのリポソームの使用
リポソームは、抗−ウイルス免疫、特に抗原特異的ＣＤ８＋及びＣＤ４＋ ＴＨ−１−様ウイルス性抗原特異的Ｔ−細胞母集団での混合“記憶”の生成に基づく免疫を生じさせるために、抗原配送用のベヒクルとして使用され得ることが示唆されている。この戦略は、マウスにおけるアレルゲン特異的ＣＤ８＋ＴＨ−１−様免疫の生成のために使用されており、これはこれらのアレルゲンに対するＴＨ−２−様依存性ＩｇＥ応答の引き続く発達に対して極めて保護的であることが期待される。リポソームの種々の剤型及びアレルゲンが試験されている。
【００４０】
例３
選択されたＴＨ−１−様アジュバントとしての微生物細胞壁生成物
我々及び他の研究者は、ある種の微生物細胞壁−誘導アジュバントを用いるマウスの非経口感作が、ＴＨ−２−様依存性ＩｇＥ応答を選択的に抑制し、その一方でＴＨ−１−様依存性ＩｇＧ応答を刺激することを例示した。フロイント完全アジュバント等のほとんどの一般的に入手可能なアジュバントは、それらが注射部位において組織壊死を起こすためにヒトへの使用には適当ではない。広範囲の種の細菌株からの細胞壁抽出物が、非毒性かつＴＨ−２−様抑制的である調製物を同定するために、抽出物とオボアルブミンとのマウスへの同時注射に基づくスクリーニングプロトコールを使用し、続いてオボアルブミン−特異的ＩｇＥ及びＩｇＧ応答を測定することにより試験されている。マイコバクテリウムツベルクロシス（Mycobacterium tuberculosis）由来の種々の細胞壁−誘導アジュバント、例えばムラミルジペプチドが、ヒトに使用するための可能性あるアジュバントとして集中的に評価されており、これらは本発明の目的に有用であろうと考えられる。
【００４１】
例４
ＩｇＥ“Ｔｏｌｅｒｏｇｅｎ”としての修飾アレルゲンの使用
幾つかの最近の文献は、接合する脂質“テイル”の付加により人為的に修飾された蛋白質抗原が、クラスＩＭＨＣ−制限免疫応答を引き出し、その一方で天然の蛋白質が排他的にクラスIIＭＨＣ−制限応答を刺激することを示している。先に議論したように、本発明の根本にある原理に従えば、そのような修飾抗原は、該抗原に対するＴＨ−１−様免疫のために選択されねばならず、而してＴＨ−２−様依存性ＩｇＥ応答の発展を阻害する。アレルゲンとしてのオボアルブミン（ＯＶＡ）に予め曝されていないマウスを、非経口的に免疫し、続いて天然オボアルブミン、または脂質ドデセン酸との接合により構造的に修飾されたオボアルブミンの何れかにより感作させた。マウスを、０日において対照としての天然オボアルブミン、または脂質接合物（Ｄｏｄｅｃ−ＯＶＡ）の何れかにより初回感作させ、１４及び２０日目に採血し、それぞれ２５日目に対抗免疫し、３９日目に再度採血した。抗オボアルブミンＩｇＥ抗体の血清力価を測定し、群中央値の受動皮膚アナフィラキシー単位として表される結果が、表１に示される。
【００４２】
【表１】



これらの結果は、ＴＨ−１−様免疫を選択する修飾抗原を用いた初回感作が、実際に引き続くＴＨ−２−様依存性ＩｇＥ応答の発達を阻害することを示している。
【００４３】
例５
γδＴ細胞は吸入アレルゲンに対するＩｇＥ応答を制御する
我々は、先に、アレルゲンに曝されていない動物に対するこのアレルゲンの経口または経鼻投与の何れかが、アレルゲンと遭遇する各時点でＴＨ−１−様サイトカイン応答を生じるアレルゲン特異的免疫状態の誘発により、アレルゲン特異的ＩｇＥ産生に対する活性な保護を引き出しうることを示した（６）。我々の以前の文献は、これらのサイトカインの細胞的供給源が、クラスＩＭＨＣ−制限ＣＤ８＋Ｔ細胞及びクラスIIＭＨＣ−制限ＣＤ４＋Ｔ細胞の両者であることを同定した。
【００４４】
我々はここで、アレルゲン特異的Ｔγδ細胞が、これらの応答におけるＴＨ−１−様サイトカインの更なる供給源を提供することを示す；類似する結果は、マウスとラットとの両者で得られている。
【００４５】
Ｃ５７ＢＩ／６Ｊマウスを、リン酸緩衝食塩水中にエアロゾル化されたＯＶＡに１０日間毎日曝露し、その後、我々の以前の研究（８）に記述したのと同様に使用されるまで、週１回曝露した。これらの動物の部分群への、４．０ｍｇ水酸化アルミニウム（ＡＨ）アジュバント中の１０μｇのＯＶＡを用いる腹腔内的（ｉｐ）対抗免疫は、正常な初期ＩｇＧ応答を明らかにしたが、我々の以前の研究に示したように（８）、並行するＩｇＥ応答の実際的に完全な抑制を示した。脾臓細胞を、他の（非対抗免疫）“耐性”動物から調製し、３個の試料に分けた。第１の試料は分画しないままであり、第２は、サイトメトリーによりＣＤ８＋を消極的に減少させ、また第３のものからはサイトメトリー（Epics Elite,Coulter Electronics ）による正の選択を使用してＣＤ８＋細胞を精製し；ここで使用したＣＤ８＋抗体は、５３−６．７２クローン（１４）由来であり、また使用したサイトメトリー方法は、以前に記述されている（７）。ＣＤ８＋母集団は、９９．５％以上の純度であり、ＣＤ８−母集団は、夾雑するＣＤ８＋細胞を０．４％未満含んでいた。これらの細胞母集団のｉｐ注射後直ちに、動物を、４．０ｍｇのＡＨアジュバント中の１０μｇのＯＶＡを用いてｉｐ免疫し、１４及び２１日目に採血した。
【００４６】
ＩｇＧサブクラスを、抗−ＩｇＧサブクラス抗体（Southern Biotechnology）を用いる酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）にて測定した。脾臓細胞は、以前に記述したように調製し、付着細胞を除去するためにナイロンウールを通し、〜８５％Ｔ細胞を得た。αβＴ細胞の賦の選択は、Ｈ５７−５９７．１９（抗−αβＴＣＲ）を用いてフローサイトメトリーにより行った（１５）。γδＴ細胞は、約３０％の残留細胞から成っており、それ故に１ｘ１０５個の脾臓細胞は３ｘ１０４個のγδＴ細胞を含むであろう。
【００４７】
耐性付与マウスからの１０６個の未分画脾臓細胞の養子的移転は、受容動物におけるオボアルブミンに対するＩｇＥ抗体応答を阻害したが、ＩｇＧについては阻害しなかった。これらの結果は図２に例示されている。
【００４８】
示されるデータは、２１日目（初期Ｉｇ応答のピーク）における平均±ＳＤ（群あたりｎ＝５〜１０）であり、標準方法（７）により決定されるｌｏｇ２（ＩｇＥ及びＩｇＧ）抗−ＯＶＡ力価の逆数で示される。１４日目からのデータは、これらの実験結果の解釈を変えることはなかった。
【００４９】
全体のＩｇＧ抗−ＯＶＡ応答の強度は、ＯＶＡエアロゾルにより予め処置したマウスにおいて有意に変化しなかった。しかしながら、サブクラス−特異的抗−ＩｇＧ抗体（Southern Biotechnology）を用いたＥＬＩＳＡによる個々のＩｇＧ分析は、ＩｇＥ応答の抑制がＩｇＧ１反応性の減少及びＩｇＧ２ａの補償的上昇を伴い、その一方ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３の応答性が本質的に変化しないことを示した。
【００５０】
例６
γδＴ細胞についての投与量−応答の関係
γδ＋Ｔ細胞の枯渇は、脾臓細胞のＩｇＧ応答を抑制する能力を廃止する。１０６個の脾臓細胞あたり、およそ３ｘ１０４個のγδＴ細胞が存在する。正の選択により＞９８．５％まで精製された個の個数のγδＴ細胞を、受容動物に移転させた場合に、ＩｇＥ応答の抑制の程度は、１０６個の未分画細胞を受けた動物のものに匹敵する。このことは図３に例示されている。耐性付与動物由来の脾臓細胞を、抗体ＧＬ３を用いてγδＴ細胞を否定的に枯渇させた（１６）。
ＧＬ３＋（γδ＋）細胞を、正の選択により調製した。養子的移転、ｉｐ抗原対抗免疫、及び初期ＩｇＥ及びＩｇＧ応答の測定は上述したように行った。これらの結果を図３に示す。
【００５１】
投与量−応答実験は、わずか５ｘ１０２個の正の選択を受けたγδＴ細胞が、抗−ＯＶＡ応答のＩｇＥ成分の抑制に充分であることを示した。γδＴ細胞は、ＯＶＡ−耐性供給者から負の選択により調製された。脾臓細胞は、上述のように調製され、付着細胞を除去するためにナイロンウールを通し、約８５％Ｔ細胞を得た。αβ細胞の負の選択は、Ｈ５７−５７．１９（抗−αβＴＣＲ）を用いるフローサイトメトリーにより行われた（１７）。γδＴ細胞は、残る細胞の約３０％から成り、而して１ｘ１０５個の脾臓細胞は３ｘ１０４個の細胞を含む。これらのγδ細胞は、図４に示されるように、正の選択を受けた細胞により達成される場合に匹敵するＩｇＥ応答の抑制を生じた。我々は、ＯＶＡ−耐性ラット由来のαβ＋Ｔ細胞を枯渇した脾臓細胞の養子的移転が、ＩｇＥアイソタイプにおける抗原特異的耐性を媒介しうることを示した（１７）。
【００５２】
例７
γδＴ細胞−媒介抑制の抗原特異性
γδＴ細胞−媒介抑制的応答の抗原特異性を試験するために、未分画脾臓細胞または精製したγδＴ細胞をＯＶＡ−耐性マウスから同遺伝子型の受容動物に移転し、次いでこれらにＯＶＡまたはハウスダストダニ由来のＤｅｒＰ１非関連抗原にて対抗免疫した。ＯＶＡ−耐性ラットからの未分画または正の選択γδＴ細胞を、移転させ、該受容動物にＯＶＡまたはＤｅｒＰ１にて対抗免疫した。結果を図５に示してある。抗原特異性は、５０倍ほど高い細胞投与量においてもこの系で観察された。
【００５３】
例８
ＯＶＡに対して耐性付与されたマウスにおけるサイトカイン産生
ＯＶＡに対して耐性付与されたマウス由来の脾臓細胞に、インビトロにて１００μｇ／ｍｌのＯＶＡを用いて対抗免疫し、これらの細胞の上清をサイトカイン産生の評価のために２４時間後に採集した。脾臓細胞は、フローサイトメトリーを使用した負の選択により＞９９．５％がＣＤ４＋、ＣＤ８＋、αβ＋またはγδ＋Ｔ細胞である。細胞を、１〜１０％のウシ胎児血清を補充し、抗生物質を添加した１０−５Ｍの２−メルカプトエタノールを含むＲＰＭＩ培地中でマイクロプレートウエルあたり２ｘ１０５にて培養し、１００μｇ／ｍｌのＯＶＡにて刺激した。上清を２４時間後に採集し、アッセイに先立って−２０℃にて冷凍した。ＩＬ−２分泌は、標準ＣＴＬＬアッセイにて測定され（６）、ＩＦＮ−γ及び変換成長因子β１も同様である。ＴＣＦ−β１は、ＥＬＩＳＡ（それぞれPharmingen及びGenzyme ）にて測定された。細胞は、無関係の対照抗原に対しては応答せず、また非免疫対照動物由来の細胞は、ＯＶＡに対する応答において検出可能な水準のサイトカインを分泌しなかった。
【００５４】
耐性動物由来の未分画脾臓細胞は、特定の抗原に対する応答において高水準のインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）を分泌し、またこの分泌応答は、ＣＤ８＋細胞の枯渇により顕著に減少したが、ＣＤ４＋細胞では減少しなかった。ＣＤ８＋細胞の枯渇は、ＯＶＡ−特異的インターロイキン−２（ＩＬ−２）応答を顕著に増強した。これらの結果は表２に要約され、これは２４時間培養上清の複製について平均±標準偏差（ＳＤ）を表している。
【００５５】
【表２】


【００５６】
ＴＧＦ−β１は、経口投与抗原に対するＣＤ８＋Ｔ細胞−媒介耐性において重要な役割を演じることが示唆されていることから（２０）、これも測定された。しかしながら、表１に示されるように、ＴＧＦ−β１は、実際には耐性の移転における部分群の勢力に関わらず、耐性動物の抗原的刺激の後に全てのＴ細胞部分群により同様な量をもって産生されることが見い出された。このことは、ＴＧＦ−β１が中心的役割を演じていないことを示唆している。
【００５７】
例９
エアロゾル−曝露マウス由来の脾臓性Ｔ細胞のＯＶＡに対する増殖性応答
我々は、ＯＶＡエアロゾルに対するマウスの先行する曝露の後の、脾臓性Ｔ細胞のＯＶＡに対する応答においてインビボにて増殖する能力をも試験した。αβＴ細胞の負の選択は、上述したように行われ、１００μｇ／ｍｌのＯＶＡによる刺激後の増殖が測定された。結果は、９６時間の［３Ｈ］−チミジン取り込みの後に複製培養物について測定された平均±ＳＤとして表され、表３に示されている。部分群は、０．５％を越えない夾雑細胞を含んだ。
【００５８】
【表３】


【００５９】
ＯＶＡ−曝露動物由来の細胞は、無関係の対照抗原に対する応答において増殖せず、また正常細胞は、ＯＶＡの存在下で増殖しなかった。抗原に対する中程度の増殖性応答は、未分画脾臓細胞においてみられ；これはαβＴ細胞の枯渇により失われ、また、γδ部分群の枯渇により増強された。表２に示されるように、後者の処理は、ＩＬ−２産生の大幅な増大をも伴った。このことは、γδ母集団によるαβＴ細胞増殖の阻害を示唆し、それはインビボγδＴ細胞枯渇についての報告された効果（２１）と矛盾しない。
【００６０】
我々は、マウスにおけるこのモデルでのＩｇＥ応答の選択的抑制を媒介するエフェクター細胞が、ＯＶＡに特異的なＣＤ４−ＣＤ８＋γδ＋Ｔ細胞であるものと結論づける。表１からは、これらの細胞がＯＶＡに対する応答においてインターフェロン−γを分泌するものと考えられ、これは微生物抗原による刺激に対するγδ細胞応答の報告（２２）と矛盾しない。それらは、共にインターフェロン−γの潜在的供給源であるＣＤ４−であるナチュラルキラー細胞等の他の母集団から、またはＣＤ８＋αβＴ細胞からのインターフェロン−γ放出の引き金をも引くであろう。而して、耐性付与マウスにおける吸入ＯＶＡに対するＴ細胞応答は、ＴＨ−１−様のプロフィールを示し、これは、これらの動物において観察される特異的ＩｇＥ及びＩｇＧ１産生の選択的抑制のパターン、及び付随する増強されたＩｇＧ２ａ分泌に矛盾しない。我々の結果は、特定ＩｇＧ抗体を産生する宿主の能力を維持するとともに潜在的に病原性のＴＨ−２−様依存性ＩｇＥ応答を選択的抑制することによる、肺及び気道における免疫学的なホメオスタシスの維持について、抗原特異的γδＴ細胞の重要な役割を示唆している。
【００６１】
例１０
トランスフェクションによるＯＶＡに対するクラスＩＭＨＣ−制限免疫の誘導
アレルゲンに対するＣＤ８−媒介応答の選択的上昇を生じる免疫が、ＴＨ−２−様反応性の発達に対する保護を付与しうることについて、より決定的な証拠を得るために、我々は、クラスＩを発現するがクラスIIＭＨＣ−応答を発現せず、かつＯＶＡをコードする遺伝子がトランスフェクトされた細胞系を、マウスに接種することにより抗−ＯＶＡ免疫について初回感作させた。これらの細胞は細胞内的にＯＶＡを産生し、一般には外因性蛋白質を受け付けない細胞質クラスＩ抗原−生成経路へのＯＶＡの導入を生じる。従って、トランスフェクトされた細胞は、“処理された”ＯＶＡ複合体またはクラスＩＭＨＣ抗原と連接してそれらの表面を提示する。これは、受容動物において抗−ＯＶＡ免疫についてのクラスＩＭＨＣ−制限ＣＤ８＋Ｔ細胞を初回感作する。初回感作された動物及び対照を、天然のＯＶＡを用いて非経口的に対抗免疫し、ＩｇＥ抗−ＯＶＡ力価を測定するために１４及び３０日後に採血した。群中央値の受動皮膚アナフィラキシー単位として表される結果が、表４に示される。
【００６２】
【表４】


【００６３】
ＯＶＡ−特異的反応性が、実際に示された。これらの結果は我々の全体に亘る仮定に一致する。
発明が、明確さ及び理解を目的としてある程度詳細に記述されたが、ここに記述された実施態様及び方法の種々の修飾及び変更が、この明細書に開示された発明の概念の範囲から離れることなく行われ得ることは、当業者には明らかであろう。
ここに引用される文献は、以下に列挙され、また参考として組み入れられる。
【００６４】
参考文献
１．Mowat, A.M.
“食物蛋白質抗原に対する免疫応答の制御”
Immunol Today 1987 8 93-96
２．Miller A., Lider O., Roberts A.B., Sporn, M.B.
“ミエリン塩基性蛋白質に対する経口耐性付与によるサプレッサーＴ細胞の生成は、抗原特異的トリガーに続くＴＧＦ−βの放出によるインビトロ及びインビボ免疫応答の両者を抑制する”
Proc Natl Acad Sci.,USA, 1992 89 421-5
３．Zhang Z., Michael J.G.
“経口的に誘導し得る免疫非応答性は、ＩＦＮ−γ治療により廃絶される”
J. Immunol., 1990 144 4163-5
４．Holt, P.G 及びSedgwick J.D.
“抗原吸入に続くＩｇＥ応答の抑制：浮遊アレルゲンに対する感作を制限する自然のホメオスタシス機構”
Immunol Today, 1987 8 14-5
５．Holt, P.G.及びMcMenamin C.
“健常肺におけるアレルギー性感作に対する防御：吸入耐性の役割”
Clin. Exp. Allergy, 1989 19 255-62
６．McMenamin, C. 及びHolt, P.G.
“吸入可溶性蛋白質抗原に対する自然の免疫応答は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩ−制限ＣＤ８＋Ｔ細胞−媒介に関連するが、ＭＨＣクラスＩＩ−制限ＣＤ４＋Ｔ細胞−依存性免疫逸脱に関連せずＩｇＥ産生の選択的抑制を生じる”
J. Exp. Med., 1993 178 889-99
７．Holt, P.G.,McMenamin, C.及びNelson, D.
“幼児期における吸入アレルゲンに対する初回感作”
Ped. Allergy Immunol., 1990 1 3-13
８．Hattevig, G., Kjellman, B.及びBjoerksten, B.
“アトピー性及び非アトピー性幼児における最初の１２歳までの間の摂取または吸入されるアレルゲンに対するＩｇＥ抗体の出現”
Ped. Allergy Immunol., 1993 4 182-6
９．Finkelman, F.D., Holmes, J., Katona, I.M.,
Urban, J.J., Beckmann, M.P., Park, L.S.,
Schooley, K.A., Coffman, R.L., Mosmann, T.R.及び
Paul, W.E.
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10. Pene, J., Rousset, F., Briere, F., Chretien,
I., Paliard, X., Banchereau, J., Spits, H.及び
De Vries, J.E.
“異質反応性Ｔ細胞クローンにより誘発される正常ヒトＢ細胞によるＩｇＥ産生はＩＬ−４に媒介され、ＩＦＮ−γにより抑制される”
J. Immunol., 1988 141 1218-24
11. Wierenga, E.A., Snoek, M., de Groot, C.,
Chretien, I., Bos, J.D., Jansen, H.M.,
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“アトピー性患者におけるＣＤ２＋Ｔリンパ球の機能的部分群の分画化の証拠”
J. Immunol., 1990 144 4651-6
12. Romagnani, S.
“ＴＨ１及びＴＨ２応答の誘導：“自然”免疫応答についての主要な役割？”
Immunol. Today, 1992 13 379-81
13. Chapman, M.D.及びPlatts-Mills, T.A.E.
“Dermatophagoides pteronyssinus- 抗原Ｐ１由来の主要アレルゲンの生成及び特徴付け”
J. Immunol., 1980 125 587-92
14. Fox, P.C.及びSiraganian, R.P.
Immunology, 1981 43 227
15. Stewart, G.A.及びHolts, P.G.
Int. Arch. Allergy Appl. Immunol.,1987 83 44
16. Goodman, T. 及びLefrancois, L.
Nature, 1988 333 855
17. Kubo,R., Born, W., Kappler, P.及びPigeon,M.
J. Immunol., 1989 142 2236
18. McMenamin, C. et al.
Immunology, 1991 74 234
19. Dialynas, D.P. et al.
J. Immunol., 1983 131 2445
20. Miller, A., Lider, O., Roberts, A.B. Sporn,
M.B.及びWeiner, H.L.
Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 1992 89 421
21.Kaufmann, S.H.E., Blum, C. 及びYamamoto., S.
Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 1993 90 9620
22.Yamamoto., S. Russ, F., Teixeira, H., Conradt, P.及びKaufmann, S.H.E.
Infect. Immun., 1993 61 2154
【００６５】
本発明の好ましい態様は下記の通りである。
1. アレルギー性疾患に感受性の個体におけるアレルギー性疾患の防止方法であって、予め脱感作された個体に、アレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球の安定な母集団の確立を誘発するために有効なアレルゲンの投与量または形態を投与し、前記リンパ球が、前記アレルゲンに対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害することを含むアレルギー性疾患の防止方法。
2. 個体がヒトである１に記載の方法。
3. 個体が３カ月〜７歳である１または２に記載の方法。
4. 個体が６カ月〜７歳である３に記載の方法。
5. 個体が９カ月〜７歳である４に記載の方法。
6. アレルゲンが、経口的、経鼻的、口鼻的、直腸内的、皮内的、筋内的または経皮的経路にて投与される先行する何れかに記載の方法。
7. アレルゲンが経口的または経鼻的に投与される６に記載の方法。
8. アレルゲンが、免疫学的アジュバントと共に投与される先行する何れかに記載の方法。
9. 該アジュバントがＴ−ヘルパー−１−様リンパ球を選択的に刺激するものである８に記載の方法。
10. 該アレルゲンが環境アレルゲンである先行する何れかに記載の方法。
11. 該アレルゲンが、昆虫アレルゲン、花粉、動物のふけ、鳥のふけ、羽毛及びかびからなる群から選択される１０に記載の方法。
12. 該アレルゲンが吸入アレルゲンである１０または１１に記載の方法。
13. ２種以上のアレルゲンが投与される先行する何れかに記載の方法。
14. 環境アレルゲンを、Ｔ−ヘルパー−１−様リンパ球を選択的に刺激し得るアジュバント、及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有する滅菌組成物。
15. 経口的、経鼻的、口鼻的または直腸内的投与に適合する１４に記載の組成物。
16. 該アレルゲンが、昆虫アレルゲン、花粉、動物のふけ、鳥のふけ、羽毛及びかびからなる群から選択される１４または１５に記載の組成物。
17. 該アレルゲンが、ハウスダストダニ、ねこのふけ、イヌのふけ、トリのふけ、ゴキブリ、草本花粉、木本花粉、羽毛及びかびからなる群から選択される１５に記載の組成物。
18. アジュバントが微生物的生成物である１４〜１７の何れかに記載の組成物。
19. アジュバントがリポソーム、またはアレルゲン−脂質接合物である１４〜１７の何れかに記載の組成物。
【００６６】
さらに本発明の好ましい態様は下記の通りである。
1. 少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、アレルギー性疾患に感受性であるが前記アレルゲンに対して先行して感作されていない個体におけるアレルギー性疾患の防止に際して使用される、滅菌予防用組成物。
2. 経口的、経鼻的、口鼻的または直腸内的投与に適合する１に記載の組成物。
3. 該アレルゲンが、昆虫アレルゲン、花粉、動物のふけ、鳥のふけ、羽毛及びかびからなる群から選択される１または２に記載の組成物。
4. 該アレルゲンが、ハウスダストダニ、ねこのふけ、イヌのふけ、トリのふけ、ゴキブリ、草本花粉、木本花粉、羽毛及びかびからなる群から選択される２に記載の組成物。
5. アジュバントが微生物由来のアジュバントである１〜４の何れかに記載の組成物。
6. アジュバントがリポソーム、またはアレルゲン−脂質接合物である１〜４の何れかに記載の組成物。
7. 該アレルゲンがエアロゾルとして製剤化される１〜６の何れかに記載の組成物。
8. アジュバントがムラミルジペプチドである、１〜７の何れかに記載の組成物。
9. アレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球の安定な母集団の確立を誘発するために有効な投与量または形態でアレルゲンを使用する方法であって、アレルギー性疾患に感受性であるが前記アレルゲンに対して先行して感作されていない個体におけるアレルギー性疾患の防止に有用な医薬の製造にアレルゲンを使用する方法。
10. 該アレルゲンが環境アレルゲンである９に記載の方法。
11. 該アレルゲンが、昆虫アレルゲン、花粉、動物のふけ、鳥のふけ、羽毛及びかびからなる群から選択される１０に記載の方法。
12. ２種以上のアレルゲンが投与される９〜１１の何れかに記載の方法。
13. 該アレルゲンが経口的または経鼻的に投与される９〜１２の何れかに記載の方法。
14. ヒト用の医薬である９に記載の方法。
15. ヒトが３カ月〜７歳である１４に記載の方法。
16. ヒトが６カ月〜７歳である１５に記載の方法。
17. ヒトが９カ月〜７歳である１６に記載の方法。
18. 該医薬が、経口的、経鼻的、口鼻的、直腸内的、皮内的、筋内的または経皮的経路にて投与されるものである９〜１７の何れかに記載の方法。
19. 該アレルゲンが吸入アレルゲンである１８に記載の方法。
20. 該医薬が、免疫学的アジュバントを含む９〜１９の何れかに記載の方法。
21. 該アジュバントがＴ−ヘルパー−１−様リンパ球を選択的に刺激するも
のである２０に記載の方法。
22. 該アジュバントがムラミルジペプチドである、２０または２１に記載の方法。
23. 少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、該アレルゲンがエアロゾルとして製剤化される滅菌予防用組成物。
24. 経口的、経鼻的、口鼻的または直腸内的投与に適合する２３に記載の組成物。
25. 該アレルゲンが、昆虫アレルゲン、花粉、動物のふけ、鳥のふけ、羽毛及びかびからなる群から選択される２３または２４に記載の組成物。
26. 該アレルゲンが、ハウスダストダニ、ねこのふけ、イヌのふけ、トリのふけ、ゴキブリ、草本花粉、木本花粉、羽毛及びかびからなる群から選択される２４に記載の組成物。
27. アジュバントが微生物由来のアジュバントである２３〜２６の何れかに記載の組成物。
28. アジュバントがリポソーム、またはアレルゲン−脂質接合物である２３〜２７の何れかに記載の組成物。
29. アジュバントがムラミルジペプチドである、２３〜２８の何れかに記載の組成物。
30. 少なくとも１種の環境アレルゲンを、アレルゲン−特異的Ｔ−ヘルパー−１−様記憶リンパ球を選択的に刺激し得る医薬的に許容されるアジュバント及び場合により医薬的に許容される担体と共に含有し、前記リンパ球が、前記アレルゲンの少なくとも１種に対して特異的なＩｇＥ抗体の産生を刺激する原因となるアレルゲン特異的Ｔ−ヘルパー−２−様リンパ球の活性または増殖を阻害し得るものであり、該アジュバントが微生物由来のアジュバントである滅菌予防用組成物。
31. アジュバントがムラミルジペプチドである、３０に記載の組成物。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】健常及びアトピー性幼児における環境アレルゲンに対する出席後血清ＩｇＥ応答を示す図である。
【図２】反復曝露によりＯＶＡに対して耐性を付与されたＩｇＥ抗−オボアルブミン（ＯＶＡ）応答の選択的抑制を示す図。
【図３】γδＴ細胞によるＩｇＥ応答の抑制を示す図である。
【図４】ＯＶＡ−耐性マウスのγδＴ細胞によるＯＶＡ−特異的耐性の投与量−応答分析を示す図である。
【図５】初期ＩｇＥ応答の抑制におけるγδＴ細胞の抗原特異性を示す図である。
【出願人】 【識別番号】５０６０２４７００
【氏名又は名称】テレソン インスチチュート フォア チャイルドヘルス リサーチ
【出願日】 平成１８年２月２２日（２００６．２．２２）
【代理人】 【識別番号】１０００６６６９２
【弁理士】
【氏名又は名称】浅村 皓

【識別番号】１０００７２０４０
【弁理士】
【氏名又は名称】浅村 肇

【識別番号】１０００８８９２６
【弁理士】
【氏名又は名称】長沼 暉夫

【識別番号】１０００９７８７０
【弁理士】
【氏名又は名称】梶原 斎子
【公開番号】 特開２００６−１８２７８７（Ｐ２００６−１８２７８７Ａ）
【公開日】 平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【出願番号】 特願２００６−４４６５８（Ｐ２００６−４４６５８）