メイラード反応阻害剤

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【発明の名称】	メイラード反応阻害剤
【発明者】	【氏名】八木雅之【氏名】大原光晴【氏名】松浦信康
【要約】	【課題】メイラード反応における中間生成物または最終生成物の生成を抑制し、最終的には、メイラード反応が進行することにより人体に与える悪影響を抑制する。【解決手段】メイラード反応阻害剤において、メイラード反応における中間生成物および最終生成物からなる生成物群のうちから選択される１以上の第１の生成物の生成反応を阻害させるための第１阻害剤と、上記生成物群のうちから選択される１以上の第２の生成物の生成反応を阻害させるための第２阻害剤と、を含めた。第１阻害剤および第２阻害剤のうちの少なくとも一方は、ガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる植物群より選択される１種以上の植物の抽出物を含んでいるのが好ましい。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
メイラード反応における中間生成物および最終生成物からなる生成物群のうちから選択される１以上の第１の生成物の生成反応を阻害させるための第１阻害剤と、上記生成物群のうちから選択される１以上の第２の生成物の生成反応を阻害させるための第２阻害剤と、を含むことを特徴とする、メイラード反応阻害剤。
【請求項２】
上記第１阻害剤および上記第２阻害剤のうちの少なくとも一方は、ガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる植物群より選択される１種以上の植物の抽出物を含んでいる、請求項１に記載のメイラード反応阻害剤。
【請求項３】
上記第１および第２阻害剤の組み合わせは、上記植物群より選択される２種以上の植物の抽出物を含んでいる、請求項２に記載のメイラード反応阻害剤。
【請求項４】
上記生成物群は、上記中間生成物として、糖化タンパクおよび３－デオキシグルコソンのうちの少なくとも一方を含んでいる、請求項１ないし３のいずれかに記載のメイラード反応阻害剤。
【請求項５】
上記生成物群は、上記最終生成物として、蛍光物質（励起波長が約３７０ｎｍ、蛍光波長が約４４０ｎｍ）およびペントシジンのうちの少なくとも一方を含んでいる、請求項１ないし４のいずれかに記載のメイラード反応阻害剤。

【発明の詳細な説明】【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、複数の阻害剤を組み合わせたメイラード反応阻害剤に関する。本発明のメイラード反応阻害剤は、たとえば外用組成物や飲食品に適用できるものである。
【０００２】
【従来の技術】
生体組織においては、組織中のタンパク質やアミノ酸が糖化するメイラード反応が生じている。メイラード反応の進行は、皮膚組織においては皮膚の老化（弾性低下）を招き、血管壁組織においては動脈硬化を招くといわれている。また、メイラード反応における反応生成物は、糖尿病の合併症の発症・進展に対して大きな影響を与えるものでもある。
【０００３】
このため、メイラード反応を阻害することを目的に、種々の研究がなされている。たとえば、皮膚の老化を予防する目的で、植物の抽出物を利用することが検討され（たとえば特許文献１～３）、糖尿病の合併症阻害剤として、アミノグアニジンやカテキンを使用することが検討されている。
【０００４】
一方、メイラード反応における最終生成物が生成されるまでの反応経路については、現在では不明な点が多い。しかしながら、メイラード反応の研究が進むにつれ、タンパク質やアミノ酸が酸化を受けて最終生成物が生成される反応経路（糖酸化）、およびタンパク質やアミノ酸が糖化することにより、中間生成物を経た後に最終生成物が生成される反応経路があることが判明してきた。前者の反応経路の例としては、タンパク質（主にアルギニン残基）が糖（主にペントース）により酸化され、最終生成物としてペントシジンが生成される反応経路がある。一方、後者の反応経路の例としては、タンパク質（主にリジン残基）が糖（主にヘキソース）と非酵素的に反応し、糖化タンパク、３－デオキシグルコソンを経て、最終生成物が生成される反応経路がある。後者の反応経路における最終生成物は、主として蛍光物質（励起波長が約３７０ｎｍ、蛍光波長が約４４０ｎｍ）であり、低率ではあるがペントシジンが副生する。
【０００５】
このように、メイラード反応の反応経路としては、中間生成物を経て最終生成物が生成される反応経路が確認されている。その一方、メイラード反応の中間生成物が増加・蓄積することにより副反応が生じ、この副反応によって生体機能が低下することも知られている。たとえば、中間生成物がヘモグロビンと反応した場合には血液中における酸素吸着能（酸素搬送能）が低下することが知られている。
【０００６】
しかしながら、メイラード反応を阻害するための研究においては、最終生成物に着目し、最終生成物の生成量によってメイラード反応の阻害効果を判定しているのが現状である。すなわち、中間生成物の影響を十分に考慮せずに、メイラード反応を阻害する物質の模索・研究がなされており、既存のメイラード反応阻害剤では、中間生成物の影響を効果的に排除することができない。
【０００７】
【特許文献１】
特開平１１－１０６３３６号公報
【特許文献２】
特開２００２－２４１２９３号公報
【特許文献３】
特開２００２－２４１２９９号公報
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上述のような事情の下に考え出されたものであり、メイラード反応における中間生成物または最終生成物の生成を抑制し、最終的には、メイラード反応が進行することにより人体に与える悪影響を抑制することを課題としている。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
上述した課題を解決すべく、本発明者らが鋭意検討した結果、特定の成分（たとえば植物抽出物）がメイラードの反応における特定の中間生成物または最終生成物の生成を抑制することができることを知見し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明おいては、メイラード反応における中間生成物および最終生成物からなる生成物群のうちから選択される１以上の第１の生成物の生成反応を阻害させるための第１阻害剤と、上記生成物群のうちから選択される１以上の第２の生成物の生成反応を阻害させるための第２阻害剤と、を含むことを特徴とする、メイラード反応阻害剤が提供される。
【００１１】
１以上の第１および第２の生成物は、互いに異なった生成物を含んでおり、たとえば同一または異なるメイラード反応における中間生成物どうしの組み合わせ、同一または異なるメイラード反応における中間生成物および最終生成物の組み合わせ、または異なるメイラード反応において生じる最終生成物どうしの組み合わせである。
【００１２】
第１または第２阻害剤としては、たとえば植物の抽出物を挙げることができる。もちろん、第１または第２阻害剤として、植物の抽出物以外のものを使用することもできる。
【００１３】
第１または第２阻害剤として使用することができる植物の抽出物としては、たとえばアケビ、アメリカマンサク、アロエ、アンズ、イチャクソウ、ウワウルシ、オウレン、オオバナサルスベリ、カバ、カルカデ、ガンビールノキ、キキョウ、ケイシ、ゲンノショウコ、コウホネ、ゴミシ、ザクロ、サンシチニンジン、シコン、シラカバ、シャクヤク、シャゼンシ、セイヨウサンザシ、セイヨウナツユキソウ、センナ、ダイオウ、タウコギ、チャノキ、チョウジノキ、チンネベリーセンナ、テンチャ、トウニン、ドクダミ、トシン、トックリイチゴ、トルメンチラ、ナルコユリ、ハイビスカス、ハコベ、ハマヂシャ、バラ、ビャッキョウ、ブクリュウ、ブドウ、ボタン、ヤクヨウサルビア、ヤシャブシ、ヤマモモ、ユーカリノキ、ユズ、マロニエ、ロッグウッド、ローマカミツレ、およびワレモコウに由来するものを挙げることができる。本発明では、例示した植物の抽出物のうち、ガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる植物群より選択される１種以上の植物の抽出物を使用するのが好ましい。
【００１４】
生成物群は、中間生成物として、たとえば糖化タンパクおよび３－デオキシグルコソンのうちの少なくとも一方を含んでいる。糖化タンパクの生成を阻害するための阻害剤としては、たとえばガンビールノキ、チャノキ、ドクダミ、およびローマカミツレからなる群より選択される１種以上の植物の抽出物を使用することができる。一方、３－デオキシグルコソンの生成を阻害するための阻害剤としては、たとえばガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる群より選択される１種以上の植物の抽出物を使用することができる。
【００１５】
生成物群は、最終生成物として、たとえば蛍光物質（励起波長が約３７０ｎｍ、蛍光波長が約４４０ｎｍ）およびペントシジンのうちの少なくとも一方を含んでいる。蛍光物質の生成を阻害するための阻害剤としては、たとえばガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる群より選択される１種以上の植物の抽出物を使用することができる。一方、ペントシジンの生成を阻害するための阻害剤としては、たとえばシラカバ、セイヨウサンザシ、チョウジノキ、ドクダミ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレからなる群より選択される１種以上の植物の抽出物を使用することができる。
【００１６】
本発明において使用することができる「ガンビールノキ」としては、アカネ科カギカズラ属（ＲｕｂｉａｃｅａｅＵｎｃａｒｉａ）の植物であるガンビールノキ（ＵｎｃａｒｉａｇａｍｂｉｒＲｏｘｂｕｒｇｈ）、トウカギカズラ（Ｕ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、カギカズラ（Ｕ．ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｌａ）を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。ガンビールノキの葉および枝の水製乾燥エキスは、「アセンヤク」と呼ばれるが、ガンビールノキの抽出物としては、「アセンヤク」を用いるのが好ましい。
【００１７】
本発明において使用することができる「シラカバ」としては、カバノキ科カバノキ属（ＢｅｔｕｌａｃｅａｅＢｅｔｕｌａ）の植物であるシラカバ（ＢｅｔｕｌａｐｅｎｄｕｌａＬ．）、ヨーロッパシラカバ（ＢｅｔｕｌａａｌｂａＬ．）を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００１８】
本発明において使用することができる「セイヨウサンザシ」としては、バラ科サンザシ属（ＲｏｓａｃｅａｅＣｒａｔａｅｇｕｓ）の植物であるセイヨウサンザシ（ＣｒａｔａｅｇｕｓｏｘｙａｃａｎｔｈａＬ．）、サンザシ（Ｃ．ｃｕｎｅａｔａＳｉｅｂ．ｅｔＺｕｃｃ．）を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００１９】
本発明において使用することができる「チャノキ」としては、ツバキ科ツバキ属（Ｃａｍｅｌｌｉａｓｉｎｅｓｉｓ）の植物、それらの雑種や交配種を使用することができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子又は全草を用いることができる。チャノキの抽出物は、典型的には、チャノキの葉から製茶されたもの、たとえば緑茶類（煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜入り茶）、半発酵茶（鳥龍茶（鉄観音）、色種、黄金桂、武夷岩茶）、発酵茶（紅茶）から得ることができる。チャノキの葉から製茶されたものからの抽出物は、「カテキン類」を含んでいる。ここでいう「カテキン類」とは、エピ体カテキン類および非エピ体カテキン類の双方を含んでいる。エピ体カテキン類としては、たとえばエピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、およびエピガロカテキンガレートを例示することができる。非エピ体カテキン類としては、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、およびガロカテキンガレートを例示することができる。
【００２０】
本発明において使用することができる「チョウジノキ」としては、フトモモ科フトモモ属（ＭｙｒｔａｃｅａｅＳｙｚｙｇｉｕｍ）の植物であるチョウジノキ（別名：クローブ）「Ｓｙｚｙｇｉｕｍａｒｏｍａｔｉｃｕｍ（＝Ｅｕｇｅｎｉａｃａｒｙｏｐｈｙｌｌａｔａ）、（＝Ｅ．ａｒｏｍａｔｉｃａ）」を挙げることができる。この植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２１】
本発明において使用することができる「ドクダミ」としては、ドクダミ科ドクダミ属（ＳａｕｒｕｒａｃｅａｅＨｏｕｔｔｕｙｎｉａ）の植物であるドクダミ（ＨｏｕｔｔｕｙｎｉａｃｏｒｄａｔａＴｈｕｎｂｅｒｇ）を挙げることができる。この植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２２】
本発明において使用することができる「トルメンチラ」としては、バラ科キジムシロ属（ＲｏｓａｃｅａｅＰｏｔｅｎｔｉｌｌａ）の植物であるトルメンチラ（Ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａｔｏｒｍｅｎｔｉｌｌａ（＝Ｐ．ｓｉｌｖｅｓｔｒｉｓ））、エゾツルキンバイ（Ｐ．ｔｏｒｍｅｎｔｉｌｌａｖａｒ．ｇｒａｎｄｉｓ）、ポテンティラアンセリナ（Ｐ．ａｎｓｅｒｉｎａ）、カワラサイコ（Ｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、ツチグリ（Ｐ．ｄｉｓｃｏｌｏｒ）、キジムシロ（Ｐ．ｆｒａｇａｒｉｏｉｄｅｓｖａｒ．ｓｐｒｅｎｇｅｌｉａｎａ）、オヘビイチゴ（Ｐ．ｗａｌｌｉｃｈｉａｎａ）、ブラッドルート（Ｐ．ｅｒｅｃｔａ）、シルヴァーウィード（Ｐ．ａｎｓｅｒｉｎａ）、クリーピングシンクフォイル（Ｐ．ｒｅｐｔａｎｓ）、ミツバツチグリ（Ｐ．ｆｒｅｙｎｉａｎａ）、オトコヘビイチゴ（Ｐ．ｓｕｎｄａｉｃａｖａｒ．ｒｏｂｕｓｔａ）、ヒメヘビイチゴ（Ｐ．ｃｅｓｔｉｇｒａｎａ）、イワキンバイ（Ｐ．ｄｉｃｋｎｓｉｉ）、キンロバイ（Ｐ．ｆｒｕｔｉｃｏｓａ）、ハクロバイ（Ｐ．ｄａｖｕｒｉｃａ）、ミヤマキンバイ（Ｐ．ｍａｔｓｕｍｕｒａｅ）、チシマキンバイ（Ｐ．ｍｅｇａｌａｎｔｈａ）を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２３】
本発明において使用することができる「バラ」としては、バラ科バラ属（ＲｏｓａｃｅａｅＲｏｓａ）の植物であるバラ（ＲｏｓａｃｅｔｉｆｏｌｉａＬｉｎｎｅ）、ノイバラ「Ｒ．ｍｕｌｔｉｆｌｏｒａＴｈｕｎｂｅｒｇ（＝Ｒ．ｐｏｌｙａｎｔｈａ）」、イザヨイバラ（Ｒ．ｒｏｘｂｕｒｇｈｉｉ）、ハマナシ（Ｒ．ｒｕｇｏｓａｔｈｕｍｂ．）、ノバラ（Ｒ．ｃａｎｉｎａＬｉｎｎｅ）、ローサ・ガリア（Ｒ．ｇａｌｉｃａｖａｒ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、ダマスク・ローズ（Ｒ．ｄａｍａｓｃｅｎａ）、ローズ・ド・メイ（Ｒ．ｇａｌｉｃａ）、Ｒ．ａｌｂａ、「Ｒ．ｅｇｌａｎｔｅｒｉａ（＝Ｒ．ｒｕｂｉｇｉｎｏｓａ）」、Ｒ．ｌａｅｖｉｇａｔａ、テリハノイバラ（Ｒ．ｗｉｃｈｕｒａｉａｎａ）、マイカイ「Ｒ．ｍａｉｋａｉ（＝Ｒ．ｒｕｇｏｓａｖａｒ．ｐｌｅｎａ）」を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２４】
本発明において使用することができる「ブドウ」としては、ブドウ科ブドウ属（ＶｉｔａｃｅａｅＶｉｔｉｓ）の植物であるブドウ（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）、アメリカブドウ（ＶｉｔｉｓｌａｂｒｕｓｃａＬ．）、アマヅル（Ｖ．ｓａｃｃｈａｒｉｆｅｒａＭａｋｉｎｏ）、エビヅル（Ｖ．ｆｉｃｉｆｏｌｉａＢｕｎｇｅｖａｒ．ｌｏｂａｔａ（Ｒｅｇｅｌ）Ｎａｋａｉ）、サンカクヅル（Ｖ．ｆｌｅｘｕｏｓａＴｈｕｎｂ．）、ヤマブドウ（Ｖ．ｃｏｉｇｕｅｔｉａｅＰｕｌｌｉａｔ）、欧・米雑種ブドウ（Ｖ．ｌａｂｒｕｓｃａｎａＢａｉｌｅｙ）を挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２５】
本発明において使用することができる「マロニエ」としては、トチノキ科トチノキ属（ＨｉｐｐｏｃａｓｔａｎａｃｅａｅＡｅｓｃｕｌｕｓ）の植物であるセイヨウトチノキ（Ａｅｓｃｕｌｕｓｈｉｐｐｏｃａｓｔａｎｎｍ）、トチノキ（Ａ．ｔｕｒｂｉｎａｔａＢｌ．）、Ａ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢｕｎｇｅを挙げることができる。これらの植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２６】
本発明において使用することができる「ローマカミツレ」としては、キク科アンテミス属（ＣｏｍｐｏｓｉｔａｅＡｎｔｈｅｍｉｓ（Ｃｈａｍａｅｍｅｌｕｍ））の植物であるローマカミツレ（ＡｎｔｈｅｍｉｓｎｏｂｉｌｉｓＬ．（＝Ｃｈａｍａｅｍｅｌｕｍｎｏｂｉｌｅ））を挙げることができる。この植物においては、その花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子または全草を用いることができる。
【００２７】
本発明において植物抽出物を使用する場合、その抽出物は、各々の植物体の各種部位（全草、花、種子、果実、葉、枝、樹皮、根皮、根茎、根等）から直接、あるいはそれらの部位の粉砕物から得ることができる。植物抽出物の抽出方法としては、圧搾あるいは溶媒抽出を例示することができる。
【００２８】
溶媒抽出に用いることができる溶媒としては、たとえば水、アルコール類（たとえばメタノール、無水エタノール、低級アルコール（たとえばエタノール）、多価アルコール（たとえばプロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール））、ケトン類（たとえばアセトン）、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、エステル類（たとえば酢酸エチルエステル）、キシレン、ベンゼン、クロロホルムを例示することができる。例示した溶媒は、単独で用いてもよく、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２９】
植物抽出物は、溶媒に抽出された状態で使用することもできるが、溶媒を含んだ抽出物を精製した後に使用してもよい。抽出物の精製は、たとえば蒸留、濾過、クロマトグラフィ、乾燥などの手法を利用して行うことができ、精製後の抽出物の形態は、溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とされる。
【００３０】
本発明のメイラード反応阻害剤は、たとえば外用組成物や飲食品に含有させて使用することができる。
【００３１】
外用組成物としては、医薬品類、医薬部外品類、局所用又は全身用の皮膚化粧品類、頭皮・頭髪に適用する薬用または化粧用の製剤類（例えば、シャンプー剤、リンス剤、トリートメント剤、パーマネント液、染毛料、整髪料、ヘアートニック剤、育毛・養毛料等）、浴湯に投じて使用する浴用剤、防臭剤、衛生用品、衛生綿類、およびウエットティシュを挙げることができる。本発明のメイラード反応阻害剤は、動物用に使用する外用組成物に対しても使用することができる。本発明のメイラード反応阻害剤は、外用組成物の性状に関係なく使用することができ、たとえばアンプル状、カプセル状、丸剤、錠剤状、粉末状、顆粒状、固形状、液状、ゲル状または気泡状の外用組成物に対して使用することができる。
【００３２】
一方、飲食品としては、たとえば口腔用組成物（たとえばガム、キャンデー、タブレット）、加工水産ねり製品（たとえばかまぼこ、ちくわ）、畜産製品（たとえばソーセージ、ハム）、洋菓子類、和菓子類、めん類（たとえば生めん、中華めん、ゆでめん、ソバ）、調味料（たとえばソース、醤油、タレ、砂糖、ハチミツ、粉末あめ、水あめ）、香辛料（たとえばカレー粉、からし粉、コショウ粉）、ジャム、マーマレード、チョコレートスプレッド、漬物、そう菜、ふりかけ、野菜や果実などの缶詰あるいは瓶詰加工食品、乳製品（たとえばチーズ、バター、ヨーグルト）、および飲料（たとえばみそ汁、スープ、果実ジュース、野菜ジュース、乳清飲料、清涼飲料、酒類）を挙げることができる。
【００３３】
外用組成物および飲食品におけるメイラード反応阻害剤の含有量は、たとえば生成阻害の対象となる中間生成物または最終生成物の種類、使用するメイラード反応阻害剤の種類、外用組成物および飲食品の具体的種類によって決定される。たとえば、メイラード反応阻害剤として上述の植物抽出物を用いる場合には、含有量は、製品の全量において、固形分に換算して、０．０００１重量％以上、より好ましくは０．０１～５０．０重量％とされる。製品におけるメイラード反応阻害剤の濃度を薄めて使用する製品、たとえば浴用剤の場合では、使用時（２００～３００Ｌの浴湯に投じた場合）に先の濃度になるように製品を製造してもよい。
【００３４】
【実施例】
以下においては、植物エキスの阻害能評価試験とともに、メイラード反応阻害剤を構成しうる抽出物の製造例について説明する。ただし、後述する製造例はあくまでも代表例であり、抽出物の製造方法は、後述の製造例には限定されない。
【００３５】
［阻害能評価試験］
本試験においては、下記表１に示した植物エキスのそれぞれについて、メイラード反応における中間生成物および最終生成物の生成を阻害する能力について評価した。本試験の対象となる中間生成物は糖化タンパクおよび３－デオキシグルコソンとし、本試験の対象となる最終生成物は蛍光物質（励起波長が約３７０ｎｍ、蛍光波長が約４４０ｎｍ）およびペントシジンとした。
【００３６】
【表１】

【００３７】
メイラード反応阻害能の測定
メイラード反応阻害能については、中間生成物や最終生成物の反応率に基づいて評価した。反応率は、下記表２に示した４種類の反応液Ａ～Ｄについて、糖化タンパク、３－デオキシグルコソン（３ＤＧ）、蛍光物質、およびペントシジンを後述する手法によりそれぞれ定量し、各反応液Ａ～Ｄに対する定量結果から、数式１にしたがって計算した。
【００３８】
【表２】

【００３９】
【数１】

【００４０】
糖化タンパクの定量
糖化タンパクの定量は、反応液Ａ～Ｄ中の糖化タンパクを加水分解してフロシン溶液を調製した後、フロシン溶液中のフロシン量を特定することにより行った。フロシン溶液は、各反応液Ａ～Ｄを６０℃で４０時間インキュベーションした後のものに基づいて調製した。フロシン量の特定は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を利用するとともに、絶対検量線法によりフロシン量を計算することにより行った。ＨＰＬＣにおいては、検出光として波長２８０ｎｍのＵＶ光を、ガードカラムとしてＴＳＫＧＵＡＲＤＧＥＬＯＤＳ－８０ＴＭを、カラムとしてＴＳＫ－ＧＥＬＯＤＳ－８０ＴＭ４．６×２５０を、移動相としては７ｍＭのリン酸緩衝液を使用した。
【００４１】
３－デオキシグルコソン（３ＤＧ）の定量
３ＤＧの定量は、３ＤＧを誘導体化したサンプルを調製した後、サンプル中の誘導体量を特定することにより行った。誘導体を含むサンプルは、各反応液Ａ～Ｄを６０℃で４０時間インキュベーションした後のものに基づいて調製した。誘導体量の特定は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を利用するとともに、内部標準法により誘導体量を計算することにより行った。ＨＰＬＣにおいては、内部標準として２，３－Ｐｅｎｔａｎｅｄｉｏｎｅを、検出光として波長２６８ｎｍのＵＶ光を、ガードカラムとしてＴＳＫＧＵＡＲＤＧＥＬＯＤＳ－８０ＴＭを、カラムとしてＴＳＫ－ＧＥＬＯＤＳ－８０ＴＭ４．６×２５０を使用した。溶離液としては、ｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒ（５０ｍｍｏｌ）（＝Ａ）、ｍｅｔｈａｎｏｌ（＝Ｂ）およびａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（＝Ｃ）を混合した液を使用した。ただし、３ＤＧの誘導体を溶出させる場合には、溶離液としてＡ：Ｂ：Ｃの混合比を２１：６：７とした混合液を使用し、２，３－Ｐｅｎｔａｎｅｄｉｏｎｅを溶出させる場合には、溶離液としてＡ：Ｂ：Ｃの混合比を１：２：２とした混合液を使用した。
【００４２】
蛍光物質の定量
蛍光物質の定量は、希釈試料における蛍光物質からの蛍光の強度を測定することにより行った。希釈試料は、各反応液Ａ～Ｄを６０℃で４０時間インキュベーションした後に、４００μＬの反応液Ａ～Ｄを２４００μＬの蒸留水により希釈することにより作成した。蛍光の強度の測定は、希釈試料に対して波長が３７０ｎｍの光を照射して蛍光物質を励起させる一方で、蛍光物質から発せられる波長が４４０ｎｍの蛍光の強度を測定することにより行った。ただし、蛍光物質の量は、０．１μｇ／ｍＬの硫酸キニーネ溶液に対して同様な条件で蛍光の強度を測定したときの測定値を１００とした相対値として評価した。
【００４３】
ペントシジンの定量
ペントシジンの定量は、ペントシジンに特異的に反応するポリクローナル抗体（ウサギ由来）を用いた競合ＥＬＩＳＡ法を利用して行った。競合ＥＬＩＳＡ法においては、測定波長を４５０ｎｍとして最終生成物の吸光度を測定し、その測定結果と検量線からペントシジン量を決定した。
【００４４】
結果の考察
メイラード反応阻害能の測定結果は、下記表３に示した通りであった。
【００４５】
【表３】

【００４６】
表３からは、次のことが分かる。第１に、糖化タンパクの生成阻害には、ドクダミ、ローマカミツレ、ガンビールノキ、およびチャノキの抽出物が有効である。第２に、３ＤＧの生成阻害には、トルメンチラ、マロニエ、ドクダミ、ローマカミツレ、シラカバ、ガンビールノキ、ブドウ、セイヨウサンザシ、バラ、チョウジノキおよびチャノキの抽出物が有効である。第３に、蛍光物質の生成阻害には、トルメンチラ、マロニエ、ドクダミ、ローマカミツレ、シラカバ、ガンビールノキ、ブドウ、セイヨウサンザシ、バラ、およびチャノキの抽出物が有効である。第４に、ペントシジンの生成阻害には、マロニエ、ドクダミ、ローマカミツレ、シラカバ、ブドウ、セイヨウサンザシ、およびチョウジノキの抽出物が有効である。
【００４７】
今回メイラード反応の阻害能を調べた植物抽出液においては、全ての抽出液が中間生成物や最終生成物の生成を同程度阻害するものではないため、それぞれの抽出液の特性を考慮し、複数の抽出液を使用することもできる。たとえば、特定の生成物（中間生成物および最終生成物の双方を含む）に対する阻害能の低いものに対して、相補的に、当該特定の生成物に対する阻害能の高いものを併用することが考えられる。
【００４８】
併用例としては、たとえばペントシジンに対する生成阻害効果が高い反面に中間生成物に対する生成阻害効果の比較的に低いマロニエまたはシラカバの抽出物と、中間生成物に対する生成阻害効果の高いもの（たとえばトルメンチラ、ドクダミ、ローマカミツレ、ガンビールノキ、ブドウ、セイヨウサンザシ、バラ、チョウジノキ、およびチャノキからなる群から選択される少なくとも１種の植物の抽出物）と、の組み合わせが挙げられる。また、中間生成物および最終生成物の双方に対する生成阻害能の比較的に高いもの（たとえばマロニエ、ドクダミ、ローマカミツレ、シラカバ、ブドウ、およびセイヨウサンザシからなる群から選択される少なくとも１種の植物の抽出物）に対して、中間生成物の生成阻害能を強化するために、トルメンチラ、ガンビールノキ、バラ、チョウジノキおよびチャノキから選択される少なくとも１種の抽出物を併用してもよい。
【００４９】
［製造例］
以下においては、上述のスクリーニング試験により選択された植物の抽出物の製造例、すなわちメイラード反応阻害剤または中間生成物阻害剤を構成しうる植物の抽出物の製造例について説明する。ただし、以下の製造例１～４において用いる植物（以下、「対象植物」という）は、ガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、またはローマカミツレであり、単一種の対象植物から抽出物を製造する場合を例にとって説明するものとする。
【００５０】
（製造例１）
まず、対象植物１００ｇを、室温にて５０％エタノール溶液１Ｌにおいて３昼夜浸漬し、エタノール溶液中に植物エキスを抽出させる。次いで、植物エキスを含んだエタノール溶液を吸引ろ過して残渣を除去し、抽出液を約１．０ｋｇ得た。また、抽出液から溶媒を乾燥・除去することにより、乾燥抽出物を、０．１～２．０ｇ得ることができた。
【００５１】
（製造例２）
まず、対象植物１００ｇを、室温にて５０％エタノール溶液において１昼夜浸漬し、エタノール溶液中に植物エキスを抽出させる。次いで、植物エキスを含んだエタノール溶液から溶媒を留去し、ペースト状物質を得た。続いて、ペースト状物質を３０％１，３－ブチレングリコール溶液１Ｌに再溶解させた後に吸引ろ過し、抽出液を約１．０ｋｇ得た。
【００５２】
（製造例３）
まず、対象植物１００ｇを、室温にて５０％１，３－ブチレングリコール溶液１Ｌにおいて３昼夜浸漬し、１，３－ブチレングリコール溶液中に植物エキスを抽出させる。次いで、植物エキスを含んだ１，３－ブチレングリコール溶液を吸引ろ過して残渣を除去し、抽出液を約１．０ｋｇ得た。
【００５３】
（製造例４）
まず、対象植物１００ｇを、約８０℃の精製水において約５時間浸漬させ、精製水中に植物エキスを抽出させる。次いで、植物エキスを含んだ精製水をろ過して残渣を除去し、抽出液を約１．０ｋｇ得た。また、抽出液から溶媒を乾燥・除去することにより、乾燥抽出物を、０．１～２．０ｇ得ることができた。
【００５４】
【発明の効果】
本発明によれば、特定の阻害剤（たとえばガンビールノキ、シラカバ、セイヨウサンザシ、チャノキ、チョウジノキ、ドクダミ、トルメンチラ、バラ、ブドウ、マロニエ、およびローマカミツレの抽出物）を組み合わせることにより、メイラード反応における中間生成物または最終生成物の生成を抑制することができるようになる。これにより、メイラード反応が進行することにより人体に与える悪影響を抑制することができるようになる。また、例示した植物の抽出物は、人体に対する悪影響がないため、それらを外用組成物や飲食品に含有させて使用することができる。

【出願人】	【識別番号】０００１４１８９７【氏名又は名称】アークレイ株式会社【識別番号】０００１１９４７２【氏名又は名称】一丸ファルコス株式会社
【出願日】	平成１５年７月１８日（２００３．７．１８）
【代理人】	【識別番号】１０００８６３８０【弁理士】【氏名又は名称】吉田稔【識別番号】１００１０３０７８【弁理士】【氏名又は名称】田中達也【識別番号】１００１１７１６７【弁理士】【氏名又は名称】塩谷隆嗣【識別番号】１００１１７１７８【弁理士】【氏名又は名称】古澤寛
【公開番号】	特開２００５－３５９１１（Ｐ２００５－３５９１１Ａ）
【公開日】	平成１７年２月１０日（２００５．２．１０）
【出願番号】	特願２００３－１９８８５４（Ｐ２００３－１９８８５４）