| 【発明の名称】 |
機能性付加水と乳果オリゴ糖配合飲料水 |
| 【発明者】 |
【氏名】藤井 侃
【氏名】荒井 哲也
【氏名】沖村 謙一
【氏名】信田 幸雄
|
| 【要約】 |
【課題】海洋深層水と人体のミネラル成分が略同様であること、難消化性糖質がミネラル成分の人体への吸収効率を促進すること等に注目した機能性付加水と、乳果オリゴ糖配合飲料水とを開発するに至ったものである。
【解決手段】機能性付加水は、少なくとも難消化性糖質２とミネラル含有水１とを用い、ミネラル含有水として海洋深層水（日本海固有冷水５）を多段式電気透析法により分離した濃縮塩水９とミネラル濃縮水８の少なくとも一方を用い、難消化性糖質として単糖類のオリゴ糖３を、直接使用タイプで０・１〜１０％の範囲で硬度２０〜２０００に、濃縮タイプで２〜７０％の範囲で硬度１００〜２００００に調製してある。 |
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも難消化性糖質（２）とミネラル含有水（１）とを用いていることを特徴とする機能性付加水。
【請求項２】
ミネラル含有水（１）として天然水（４）を用いていることを特徴とする請求項１記載の機能性付加水。
【請求項３】
天然水（４）として地下から汲み上げたミネラルウォータ（４ａ）を用いていることを特徴とする請求項２記載の機能性付加水。
【請求項４】
ミネラル含有水（１）として海面下２００メートル以深の海洋深層水（５）より分離して得た脱塩深層水（５ａ）を用いていることを特徴とする請求項１記載の機能性付加水。
【請求項５】
海洋深層水（５）が富山湾で採集した日本海固有冷水であることを特徴とする請求項４記載の機能性付加水。
【請求項６】
脱塩深層水（５ａ）が多段式電気透析法により分離したミネラル濃縮水（８）と濃縮塩水（９）との少なくとも一方であることを特徴とする請求項４または５記載の機能性付加水。
【請求項７】
難消化性糖質（２）が単糖類を２〜２０結合したオリゴ糖（３）であることを特徴とする請求項１，２，３，４、５又は６記載の機能性付加水。
【請求項８】
オリゴ糖（３）を０・１〜１０％の範囲で用いている直接使用タイプであり、そのまま飲料や炊飯等に用いることを特徴とする請求項７記載の機能性付加水。
【請求項９】
オリゴ糖（３）を２〜７０％の範囲で用いている濃縮タイプであり、希釈して用いることを特徴とする請求項７記載の機能性付加水。
【請求項１０】
硬度を２０〜２０００に調製してある直接使用タイプであり、そのまま飲料や炊飯等に用いることを特徴とする請求項１〜９の内の１に記載の機能性付加水。
【請求項１１】
硬度を１００〜２００００に調製してある濃縮タイプであり、希釈して用いることを特徴とする請求項１〜９の内の１に記載の濃縮機能性付加水。
【請求項１２】
天然水（４）と脱塩深層水（５ａ）と乳果オリゴ糖（３ａ）とから成り、それらの含有割合が天然水（４）＞脱塩深層水（５ａ）＞乳果オリゴ糖（３ａ）の関係にあるることを特徴とする乳果オリゴ糖配合飲料水。
|
【発明の詳細な説明】【技術分野】
【０００１】
この発明は、日常生活に用いる機能性付加水に関するものであり、具体的には飲料水（乳果オリゴ糖配合飲料水）、調理用水、炊飯水等として使用するものである。
【背景技術】
【０００２】
水道水を直接飲んだり、これを用いて調理や炊飯をすると、水道水中に残留する殺菌剤によってカルキ臭がすることがある。そのため、日本各地の地下水や湧水の天然水（ミネラルウォータとも称する）をペットボトルに充填して販売されるに至っており、これらを飲料、炊飯、煮出し、鍋物、お茶、コーヒーへの利用を目的としている。
天然水は、ミネラル成分を適度に含有しているので口当たりが良く、料理やお茶等に適するが、含有ミネラル成分の種類が人体を構成しているミネラル成分に比較して少なく、含有量も少ないことから、ミネラル補給効果に関してはほとんど期待できない。
【０００３】
近年腸内細菌の中で特にビフィズス菌が健康と密接に関わり合っていることが明らかにされ、ビフィズス菌の選択的増殖糖類として難消化性オリゴ糖の利用が高まっている。
乳果オリゴ糖（別名：ラクトスクロース）は、化学的には
【０００４】
【化１】
または
【０００５】
【化２】
と示される。乳果オリゴ糖は唾液、膵液のα―アミラーゼでは全く分解されず、胃液で１．５％、小腸粘膜酵素で１．６％の僅かな水解が認められる難消化性で、大部分が大腸に到達し、腸内のビフィズス菌を選択的に増加させる。
依って乳果オリゴ糖の摂取は腸内環境を改善し、糞便中の有機酸の増加、アンモニア、インドール等の腐敗産物の減少をもたらし、排便回数などの便通改善作用が報告されている。そのため、乳果オリゴ糖は「お腹の調子を整える」機能性食品の素材として卓上甘味料、炭酸飲料、キャンディー、ヨーグルト、ゼリー等に配合され、広く用いられている。
【特許文献１】特開２００２−２７２４３０
【特許文献２】特開２００２−２１８９５５
【特許文献３】特開２００２−１７３１７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
天然水は程度にミネラル成分を含んでいるので美味しいが、含有ミネラルの種類が人体を構成しているミネラル成分に比較して少なく、腸管からの吸収効率も多くは期待できないので、ミネラル補給効果は乏しいものであった。
そこでこの発明は、従来技術の有するこのような問題点に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、人体の約８０％が水分であること、近年注目されている海洋深層水のミネラル成分が、人体を構成しているミネラル成分と略同様であること、難消化性糖質がミネラル成分の人体への吸収効率を促進すること等に注目し、これらを利用した新規機能性付加水と、乳果オリゴ糖配合飲料水とを開発するに至ったものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記目的を達成するために、本発明の機能性付加水は、請求項１として、少なくとも難消化性糖質とミネラル含有水とを備えている。
請求項２は、請求項１の機能性付加水において、ミネラル含有水として天然水を用いている。
請求項３は、請求項２の機能性付加水において、天然水として地下から汲み上げたミネラルウォータを用いている。
【０００８】
ここで機能性付加水とは、人体に有益なミネラル成分を天然水より多種類含有している水分の総てを言い、飲料水は勿論、食べ物の調理時に用いる調理水、及び御飯の炊き上げ時に使用する炊飯水等も含まれる。
ここで難消化性糖質とは、人体に及ぼす悪影響が皆無に等しく、しかも人体へのミネラル類の吸収効率を高めたり、便秘の改善効果等を有するもので、例えば難消化性デキストリン、オリゴ糖、多糖類を言う。
ここで天然水とは、陸上において湧き出す湧水、陸上において地下から汲み上げる地下水は勿論、現在市販されているミネラルウォータ等、水道水よりミネラル成分量の多いものを言う。
【０００９】
請求項４は、請求項１の機能性付加水において、ミネラル含有水として海面下２００メートル以深の海洋深層水より分離して得た脱塩深層水を用いている。
請求項５は、請求項４記載の機能性付加水において、海洋深層水が富山湾で採集した日本海固有冷水（富山湾固有冷水とも言える）である。
請求項６は、請求項４，５記載の機能性付加水において、脱塩深層水が多段式電気透析法により分離したミネラル濃縮水と濃縮塩水との少なくとも一方である。
【００１０】
ここで脱塩深層水とは、海洋深層水より逆浸透膜を用いて脱塩したもの、イオン交換膜を利用して脱塩したもの、電気分解により脱塩したもの、出願人が先に発明した多段式電気透析法に依って脱塩したミネラル濃縮水等を言う。
ここで日本海固有冷水とは、富山湾の容積の約６５％を占めており、特開２０００−２９０１６８号、特開２０００−２９０１６１号等に記載した通り、高知県の外洋深層水と若干異なり、その性状として、年間を通じて２℃以下の低温で水温変化がほとんどなく、塩分（３４．０〜３４．１ｐｓｕ）も安定しており、表層水と比較して栄養塩類が著しく豊富に含まれ、有機物や細菌類が非常に少ないという特徴が挙げられる。
ここで多段式電気透析法とは、第一処理装置にて日本海固有冷水を淡水と濃縮深層水とに分離し、第二処理装置にて濃縮深層水をミネラル濃縮水と濃縮塩水とに分離することを言い、ミネラル濃縮水には人体と略同様のミネラル成分をバランス良く、しかも豊富に含んでいる。また、濃縮塩水にもミネラル成分を含むので、これを所定の倍率で希釈して用いることもできる。
【００１１】
請求項７は、請求項１，２，３，４，５，６記載の機能性付加水において、難消化性糖質が単糖類を２〜２０結合したオリゴ糖である。
請求項８は、請求項７記載の機能性付加水において、オリゴ糖を０・１〜１０％の範囲で用いている直接使用タイプであり、そのまま飲料や炊飯等に用いる。
請求項９は、請求項７記載の機能性付加水において、オリゴ糖を２〜７０％の範囲で用いている濃縮タイプであり、希釈して用いる。
請求項１０は、請求項１〜９の内の１に記載の機能性付加水において、硬度を２０〜２０００に調製してある直接使用タイプであり、そのまま飲料や炊飯等に用いる。
請求項１１は、請求項１〜９の内の１に記載の機能性付加水において、硬度を１００〜２００００に調製してある濃縮タイプであり、希釈して用いる。
【００１２】
ここでオリゴ糖とは、消化管では吸収されずに大腸に到達し、腸内細菌によって醗酵を受け、酢酸、酪酸、プロピオン酸等の短鎖脂肪酸となって吸収され、エネルギーとなる難消化性オリゴ糖を指し、キシロオリゴ糖、ラクチュロース（ミルクオリゴ糖）、フラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、イソマルオリゴ糖、乳果オリゴ糖、フラクトオリゴ糖、ラフィノース等が挙げられる。
このオリゴ糖の配合量として採用し得る範囲は、５００ｍｌ当たり０．５〜５０ｇであり、配合量が０．５ｇ未満であると効果が希薄になる傾向にあり、５０ｇを超えると味覚を損ねる傾向にある。
直接飲料するものにあっては硬度を２０〜２０００とし、調理や炊飯に使用するものにあっては硬度を１００〜１０００とすることが望ましい。
【００１３】
本発明の乳果オリゴ糖配合飲料水は、請求項１２として、天然水と脱塩深層水と乳果オリゴ糖とから成り、それらの含有割合が天然水＞脱塩深層水＞乳果オリゴ糖の関係にあるることを特徴とする。
天然水に対する脱塩深層水の混合可能範囲は１／３０〜１／６０、効果的な範囲は１／４０〜１／５０、最適な範囲は１／５０前後であり、乳果オリゴ糖の採用可能範囲は５００ｍｌ中、０・５〜５０ｇ、効果的な範囲は２〜１０ｇ、最適な範囲は３〜５ｇである。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の機能性付加水は上記構造のとおりであるから、次に記載する効果を奏する。
請求項１の機能性付加水は、通常の水として料理やお茶、コーヒー等に利用できるは勿論、難消化性糖質とミネラル含有水とを用いているので、不足しがちな微量ミネラルの不足を補うという機能性が期待できる。
請求項２，３の機能性付加水は、請求項１の特徴に加えて、ミネラル含有水として天然水、特にミネラルウォータを用いているので、口当たりを柔らかくし、味覚を向上させることができる。
【００１５】
請求項４の機能性付加水は、請求項１の特徴に加えて、ミネラル含有水として人体を構成しているミネラル成分を略含有している脱塩深層水を用いているので、他から補給することの出来にくい微量ミネラルの補給に有益である。
請求項５の機能性付加水は、請求項４の特徴に加えて、海洋深層水として日本海固有冷水を用いているので、ミネラル成分のバランスが通年を通して一定し、しかも低温で清浄性が高い。その結果、安定な原料として有益である。
請求項６の機能性付加水は、請求項４，５の特徴に加えて、脱塩深層水として多段式電気透析法により分離したミネラル濃縮水を用いているので、即ち、機能性付加水に一定濃度の微量ミネラルが含まれていることになり、微量ミネラルの不足を補給する効果もあることが理解される。
【００１６】
請求項７の機能性付加水は、請求項１，２，３，４，５，６の特徴に加えて、難消化性糖質として単糖類を２〜２０結合したオリゴ糖を用いているので、腸内菌叢（腸内フローラ）の改善に資する。即ち、ビフィズス菌などのいわゆる善玉菌の増加、ウエルシュ菌等いわゆる悪玉菌の減少に役立つ。
請求項８の機能性付加水は、請求項７の特徴に加えて、オリゴ糖を０．１〜１０％の範囲で用いているので、直接飲料したり、そのまま炊飯や煮物等の調理にも使用し得る。
請求項９の機能性付加水は、請求項７の特徴に加えて、オリゴ糖を２〜７０％の範囲で用いているので、使用目的に応じて希釈使用することができる。
請求項１０の機能性付加水は、請求項１〜９の内の１の特徴に加えて、硬度を２０〜２０００に調製しているので、直接飲料しても物足りない感じや天然水のとげとげした感じが消え、全体として飲料時の口当たりがソフトになる。
請求項１１の機能性付加水は、請求項１〜９の内の１の特徴に加えて、硬度を１００〜２００００に調製しているので、これを使用目的に応じて希釈使用することができる。
【００１７】
請求項１２の乳果オリゴ糖配合飲料水は、天然水と脱塩深層水とから成る飲料に乳果オリゴ糖を一定量含有しているので、２週間の摂取において排便日数、排便回数及び排便量を有意に（ｐ＜０・０５〜ｐ＜０・００１）増加することが確認された。また、便性状の一部においても「便の色」、「便の形状」、「便の硬さ」及び「便のにおい」に有意（ｐ＜０・０５またはｐ＜０・０１）な改善が認められた。
更に、糞便中のビフィズス菌の菌数（ｐ＜０・００５）及び総嫌気性菌に対する占有率の有意（ｐ＜０・００５）な増加を示した。別途女子学生２０名を対象に、ＬＳ配合飲料水の摂取量を常用量から段階的に３倍量（飲料水１５００ｍｌ／日）まで増量して摂取した場合でも重大な副次症状を伴うことはなく、安全性が確認された。以上の結果から、ＬＳ配合飲料水の摂取は、ビフィズス菌等の有用菌を増殖させると共に排便状況を改善し、ヒトの腸内環境改善に有意義であることが確認された。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明による機能性付加水の第一実施形態を図１に基づき詳細に説明すれば、少なくとも難消化性糖質２とミネラル含有水１とを有するもので、ミネラル含有１として天然水４と海面下２００メートル以深の海洋深層水５とを用い、具体的には天然水４として、地下から汲み上げたミネラルウォータ４ａを用い、海洋深層水５として、日本海富山湾の沖合の海面下３２１メートルから汲み上げた海洋深層水（以下、日本海固有冷水５とする）より分離して得た脱塩深層水５ａを用いている。
【００１９】
脱塩深層水５ａとして、出願人が先に発明した図２の如く多段式電気透析法により分離して得たミネラル濃縮水８を配合するものであり、多段式電気透析法はイオン交換膜１１を用いた第一電気透析装置１０にて日本海固有冷水５を濃縮深層水７と淡水６とに分離し、一価イオン選択性に優れているイオン交換膜２１を用いた第二電気透析装置２０にて、第一電気透析装置１０で分離した濃縮深層水７を濃縮塩水９（一価の塩素イオンやナトリウムイオン等を濃縮した）とミネラル濃縮水８（一価イオンを取り除いて得た多価イオンのミネラルを主とする有用微量ミネラル）とに分離する。
【実施例１】
【００２０】
本発明による機能性付加水の第二実施形態を、第一実施形態と相違する点について説明すれば、第二実施形態の機能性付加水は、難消化性糖質２として単糖類を２〜２０結合したオリゴ糖３を、脱塩深層水５ａとしてミネラル濃縮水７を用い、直接使用し得るよう硬度を２０〜２０００、望ましくは１００〜５００に調製し、且つオリゴ糖３の濃度として０・１〜１０％、好ましい濃度として０・１〜５％、最適な濃度として０・２〜２％に調製するか、またオリゴ糖３の配合量として５００ｍｌ当たり０・５〜２５ｇ、好ましい配合量として５００ｍｌ当たり１〜１０ｇ、最適な配合量として５００ｍｌ当たり２〜４ｇに調製するものであり、配合量が５００ｍｌ当たり１ｇ未満であると効果が発揮されにくくなるし、配合量が５００ｍｌ当たり１０ｇを超えると味覚を損ねる傾向にある。
【実施例２】
【００２１】
本発明による機能性付加水の第三実施形態を、第二実施形態と相違する点について説明すれば、第三実施形態の機能性付加水は、希釈使用し得るよう濃縮状態にしておくもので、濃縮状態の硬度として１００〜２００００、望ましくは１０００〜１００００に調製し、濃縮状態のオリゴ糖３の濃度として２〜７０％、好ましい濃度として５〜５０％、最適な濃度として１０〜３０％に調製し、使用目的に応じて希釈して使用する。
【実施例３】
【００２２】
実験例
１・試料素材
（１）ミネラルウォータ４ａ；出願人が製造販売する「アルプス精水」
アルプス精水に含まれるミネラル成分は、以下の通りである。
（２）ミネラル濃縮水８；日本海固有冷水５を多段式電気透析法により分離して得たものであり、ミネラル成分は図３の通りである。
（３）オリゴ糖３；株式会社横浜国際バイオ研究所の乳果オリゴ糖（ＬＳ−９０）
【００２３】
２・試験試料
乳果オリゴ糖３ａを約０．７％の割合で配合し、硬度を２５０に調製した時の試料素材の成分。
【００２４】
オリゴ糖３の効果として、
Ａ，難消化性（低エネルギー性）
胃及び小腸では分解・吸収されず大腸に到達し、一部の腸内細菌によって醗酵を受け、酢酸、酪酸、プロピオン酸等の短鎖脂肪酸となって大腸粘膜より吸収され、エネルギー源となる。
Ｂ，整腸作用
胃及び小腸では吸収されず大腸に到達後、ビフィズス菌等の増殖因子となり腸内菌叢を改善し、腸内環境を整える。
Ｃ，ミネラル吸収促進
短鎖脂肪酸により腸内ｐＨが低下し、カルシウム、鉄、マグネシウム等の吸収を促進する。
【００２５】
本発明の機能性付加水に必要なミネラル成分としては、海洋深層水、特に日本海固有冷水５が好適である。その理由は、日本海固有冷水５に含有するミネラル成分と、人体を構叢成しているミネラル成分とが略一致し、しかもミネラル成分のバランスも近似している点になる。また、１年間を通して１〜２℃と低温であること、その低温により微生物の発生が少なく、清浄性が高い点である。
【実施例４】
【００２６】
実施例
ミネラル濃縮水８の代わりに濃縮塩水９を用いることも可能であるが、その際に天然水４を用いて希釈する。即ち、所定量の天然水４を加えることにより、本発明の機能性付加水を得ることができる。
濃縮タイプの機能性付加水を希釈する場合、水道水を用いることも可能であるが、天然水４をもちいることが好ましい。
天然水（ミネラルウォータ４ａ）を多くすると味覚的に軟らかくなる。
【実施例５】
【００２７】
本発明による乳果オリゴ糖配合飲料水（以下、ＬＳ配合飲料水とする）を説明すると、天然水４と脱塩深層水５ａと乳果オリゴ糖３ａとから成り、天然水４としてミネラルウォータ４ａを採用し、脱塩深層水５ａとしてミネラル濃縮水８を採用し、それらの含有割合がミネラルウォータ４ａ＞ミネラル濃縮水８＞乳果オリゴ糖３ａの関係にある。
具体的には、５００ｍｌ容ペットボトルタイプの本発明ＬＳ配合飲料水を開発し、１４日間の摂取時（乳果オリゴ糖３ａとして1日当たり３．０ｇ）の健常女子学生の便通に及ぼす影響を排便日数・回数・量、便性状（色、形状、硬さ、排便後の感覚、臭い）、腹部症状、腸内細菌叢への影響により検討した。
更に、ＬＳ配合飲料水の常用量の２倍及び３倍量摂取の安全性を泥状／水状便排泄頻度及び腹部症状に及ぼす影響を調査した。
【００２８】
試験方法
１．被験者
愛知県の医療大学に通う健常女子学生を対象に、事前に便通に関するアンケートを実施し、このうち本試験の主旨を理解して同意の得られた９２名を被験者とした。
試験は９２名の女子学生を無作為に６０名、１２名、２０名の被験者群に分け、次の３試験を行った。
試験１にあっては、ＬＳ配合飲料水の常用量摂取試験（ｎ＝６０、平均年齢２０．７±０．６歳）、
試験２にあっては、糞便菌叢検索試験（ｎ＝１２、２０．６±０．５歳）として行い、更に試験１，２とも2群（第１群及び第２群）に分けてシングルブラインド・クロスオーバー試験を行った。
試験３（ｎ＝２０、１９．８±０．５歳）は、ＬＳ配合飲料水の増量試験とし、ＬＳ配合飲料水の常用量の２倍及び３倍量を７日間与え、泥状／水状便排泄頻度及び腹部症状に及ぼす影響を観察した。
尚、本試験は「ヘルシンキ宣言」の精神を遵守して、被験者には事前に試験内容を十分に説明し、文書による本試験参加の同意を得た上で、学生が所属する大学倫理委員会の承認を得て、医師の監督下で行った。
【００２９】
２．試験飲料水
本試験には、ＬＳ配合飲料水とプラセボ飲料水の２種類を用いた。ＬＳ配合飲料水には７５％乳果オリゴ糖液（ＬＳ−９０Ｌ：固形成分中に乳果オリゴ糖３ａを９０％以上、塩水港精糖株式会社製）を1本（５００ｍｌ）中に４．４５gの割合で配合した。この配合量で甘味はほとんどないことから、プラセボ飲料水には一切の物質を配合しなかった。
尚、飲料水とは、日本海（富山湾）の水深３２１ｍより採水された海洋深層水５から１価の塩（ＮａＣｌ，ＫＣｌ）を除去後、精製したミネラル濃縮水８にミネラルウォーター４ａを配合した商品名「海のミネラル水」（出願人製品）を指す。
ＬＳ配合飲料水とプラセボ飲料水の配合組成を表１に示した。
【００３０】
【表１】
【００３１】
３．試験スケジュール
試験スケジュールを図５−１と図５−２に示した。
試験１＝試験飲料水の常用量摂取試験
シングルブラインド・クロスオーバー法により実施した。１週間の前観察期を設けた後、ＬＳ配合飲料水またはプラセボ飲料水の第１摂取期間２週間、休止期間２週間、ＬＳ配合飲料水またはプラセボ飲料水の第２摂取期間２週間の日程で実施した。
【００３２】
試験２＝糞便細菌叢検索試験
各々6名からなる第１群及び第２群の被験者に試験１と同じように行い、７週間の試験期間の内、前観察期の中頃、第１摂取期の後半及び休止期及び第２摂取期の後半の合計４回にわたり糞便サンプルの提供を受けた。
尚、試験１，２とも第１群、第２群の被験者には、摂取期にＬＳ配合飲料水とプラセボ飲料水を互いにクロスオーバーさせた。
尚、摂取に際して、1日の摂取量のみを規定し、摂取時間や1回に摂取する量については特に指定しなかった。
【００３３】
試験３＝ＬＳ配合飲料水の増量摂取試験
被験者２０名にＬＳ配合飲料水を1日５００ｍｌ（乳果オリゴ糖３ａとして３．０ｇ、A期）、２倍量の１，０００ml（乳果オリゴ糖３ａとして６．０g、C期）、３倍量の１，５００ml（乳果オリゴ糖３ａとして９．０ｇ、E期）と段階的に増量し、各々７日間摂取させた。
乳果オリゴ糖３ａの摂取影響を取り除くためA期及びC期終了後、７日間の休止期間（B期、Ｄ期）及びE期の翌週に観察期としてＦ期を設けた。
尚、試験期間中、オリゴ糖、食物繊維、糖アルコール等を強化した食品及び生菌を含む食品（納豆、乳酸菌製剤等）等の摂取並びに便秘薬や抗生物質の服用は極力避けるように指導した。
【００３４】
４．調査項目
試験１，２，３の排便状況・便性状及び腹部症状の調査は、アンケート方式で行った。
調査項目は、排便の有無及び排便時刻、排便量、便の色、便の形状、便の臭い、便の硬さ、排便後の感覚並びに腹部症状の発生について試験期間毎に色分けされた1日1ページの調査日誌を用意し、各被験者に記入させた。
排便量は、Lサイズの鶏卵の大きさ（直径３．５ｃｍ、長さ５ｃｍ、重量約５０ｇ）を1単位（個数）として記録させた。
便の色は、黄褐色及び褐色の「黄色系」と、茶褐色及び暗褐色の「褐色系」と、黒褐色の「黒色系」の３段階。
便の形状は、「カチカチ・コロコロ状」と「バナナ状・半練状」と「泥・水状」との３段階とし、色及び形はデックカラーガイド第２版をカラー印刷した「便性状指標カード」に対応させた。
便の硬さは、「軟らかい」と「普通」と「硬い」の３段階。
便の臭いは、「気にならない」と「普通」と「臭い」の３段階。
排便後の感覚は、「スッキリした」と「普通」と「残便感がある」の３段階を評価基準とした。
腹部症状は、「良好」と「腹痛がする」と「ゴロゴロとお腹が鳴った（腹鳴）」と「お腹が張った（膨満感）」と「おならが出た」と「便意があったが排便できず痛みを感じた（しぶり腹）」と「吐気がした」と「その他」の中から選択し、「その他」の場合には具体的な症状を記入させた。
更に備考欄に試験食の摂取残量、過飲過食、薬剤の服用及び体調不良等試験に影響すると考えられる事項を簡潔に記入させた。
【００３５】
５．糞便菌叢の分析
糞便は、被験者が排便後直ちに、試料ができる限り均質になるように混ぜながら、採便管（直径１５ｍｍ、栄研製）３本に各々約１ｇ採取させ、３０分〜2時間の内に研究室に届けさせた。その内1本は、嫌気性希釈液を無菌的に加えた後、ストマッカー８０Ｔ（オルガノ社製）で攪拌（２３０ｒｐｍ、３０秒）均一化した。
腸内細菌の分離は光岡らの方法を一部変更して行い、測定対象を総嫌気性菌、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）、レシチナーゼ陽性（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐ）及び大腸菌群（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）とした。ビフィズス菌検出用培地として、５０％（Ｖ／Ｖ）馬脱繊血加ＢＬ寒天培地、レシチナーゼ陽性の検出用培地としてＮＮ培地（日水製薬株式会社製）、大腸菌群の検出用培地として７０モカルトＥＳ培地（メルク株式会社製）を用いた。
尚、嫌気培養法はスチールウール法とアネロパックケンキシステム（三菱ガス化学株式会社）による方法（酸素吸収、炭酸ガス発生剤）を併用した。各試験期間のビフィズス菌検出用培地として用いたＢＬ培地上に出現したコロニーからビフィズス菌を分離、純培養し、光岡の方法に準拠して鑑別性状（グラム染色性、菌形態）と５０種類の糖類を含む簡易同定キット“アピ５０ＣＨＬ”（Ｂｉｏ Ｍｅｒｉｅｕｘ社製）による生物学的同定を行った。
【００３６】
６．糞便蒸留水希釈ｐＨ及びアンモニアの測定
採便管の1本から糞便試料を０．１〜０．５gの範囲で、正確に１５ｍｌ容のスクリュウ・キャップ付試験管に秤量した。糞便重量に対して１５倍量の蒸留水を加え、よく攪拌溶解した後、上清にｐＨ電極を差し込みｐＨメーター（７０４型、メトローム・シバタ株式会社製）でｐＨを測定した。
また、糞便溶液は３，０００ｒｐｍ、１０分間の遠心分離後、上清をアンモニア測定試料とした。糞便中のアンモニア量は、除タンパク質試薬付アンモニア測定キット“アンモニア テストワコー”（和光純薬工業株式会社製）を用い、比色定量（ＨＩＴＡＣＨＩ U―１，０００ ＳｐｅｃｔｒｏｐＨｏｔｏｍｅｔｅｒ）を行った。
【００３７】
７．糞便水分量の測定
残りの糞便の入った採便管の重量を正確に直示化学天秤で測定し、−８０℃で凍結後、凍結乾燥機（ＲＦＳ２０００Ｂ，ＵＳＡ製）を用いて４８時間以上乾燥させ粉末化した。その後、採便管ごとの重量を測定して、糞便粉末の重量を求め、水分重量（含水％、２５℃、６０〜７０％湿度下）を算出した。
【００３８】
８．統計処理
排便日数、排便回数及び排便量については、ウイルコクソン符号付順位和検定法を用いて、先ず全被験者に対し、各試験期間相互の有意差検定を行い、次いで前観察期の排便回数が週３回以下の常習性便秘者と4〜７回の便秘傾向者及び8回以上の非便秘者分けて層別解析を行った。
総嫌気性菌数に対するビフィズス菌の占有率はウイルコクソン符号付順位和検定法を用いて検定した。排便状況、便性状及び腹部症状については、試験期ごとの出現頻度をもとめ、その分布の独立性についてλ２検定を行った。
ビフィズス菌菌数、ｐＨ、アンモニア量、水分量（含有％）については、ウイルコクソン符号付順位和検定法で検定を行った。すべての統計処理は５％を有意水準とし、統計ソフトとしてスタットセルを使用した。
【００３９】
結果
排便日数、排便回数及び排便量に及ぼす影響
ＬＳ配合飲料水の排便に対する影響を被験者全員６０名について、前観察期（１週間）、プラセボ飲料水の摂取期（前・後期、各１週、計２週間）、休止期（前・後期、同）、及びＬＳ配合飲料水の摂取期（前・後期、同）を各試験期間同士比較した。
次いで、前観察期１週間当たりの排便回数が３回以下の常習性便秘者（平均２．４２回、１９名）と４〜７回の便秘傾向者（平均４．９７回、３０名）及び８回以上の非便秘者（平均９．００回、１１名）の３群の層別に分けデータを解析した。
これらの結果を表２に示す。
【００４０】
【表２】
【００４１】
全被験者の１週間における平均排便日数の比較では、前観察期が４．２２日、プラセボ飲料水の摂取期（前・後期）が４．２２日、４．２３日、休止期（前・後期）が４．１５日、４．１０日となり、これに対しＬＳ配合飲料水の摂取期（前・後期）が５．０２日・４．６８日と何れの試験期に対しも増加を示す日数を示し、ともにｐ＜０．０５〜０．００１の危険率で有意差が認められた。
一方常習性便秘者では、前観察期、プラセボ飲料水の摂取期（前・後期）、休止期（前・後期）に対して、ＬＳ配合飲料水の摂取期（前・後期）が３．７４日、３．４７日と増加し、全試験期間に対して有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）が認められた。
また便秘傾向者では、全試験期に対し、ＬＳ配合飲料水の摂取前期の５．２０日が何れの試験期にも有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）を示したが、ＬＳ配合飲料水の摂取後期（４．７７日）は、後休止期に対しのみ有意差（ｐ＜０．０５）を示した。一方非便秘者では、各試験期間との間に、何れも有意差が認められなかった。
次ぎに全被験者１週間における平均排便回数の比較では、前観察期が４．９０回に対し順に５．０２回、５．１８回、５．０２回、５．１２回で、ＬＳ配合飲料水の摂取期が６．１７回、５．７５回となり何れの試験期に対しても増加を示す排便回数を示し、ともに有意差（ｐ＜０．０５〜０．００１）が認められた。また常習性便秘者において、ＬＳ配合飲料水の摂取期は、４．１６回、４．００回と増加し、何れの試験期間に対しても有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）が認められた。
また便秘傾向者では、ＬＳ配合飲料水の摂取前期の６．００回が何れの試験期にも有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）を認めた。一方ＬＳ配合飲料水の摂取後期は、休止期（前・後期）に対しのみ有意差（ｐ＜０．０５）を認めた。一方非便秘者では、何れの試験期間との間にも有意差が認められなかった。
全被験者の１週間における平均排便量の比較では、Lサイズの鶏卵１個の大きさを目安として１単位（個）とした場合、前観察期が７．８５個に対し順に８．７４個、９．００個、８．５４個、９．１６個で、ＬＳ配合飲料水の摂取前期が１０．７３個となり何れの試験期に対しても排便量の増加を示し、ｐ＜０．０５〜０．００１の危険率で有意差が認められたが、ＬＳ配合飲料水の摂取後期（９．８６個）は、プラセボ飲料水の摂取前と後休止期に対し有意差が認められなかった。
また常習性便秘者において、ＬＳ配合飲料水の摂取期（前・後期）が７．８２個、７．５４個と増加し、プラセボ飲料水の摂取後期以外の、何れの試験期間に対しても強い有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）が認められた。また便秘傾向者では、ＬＳ配合飲料水の摂取前期の１０．９２個はプラセボ飲料水の摂取前期以外の試験期に有意差（ｐ＜０．０５〜０．００５）を認め、ＬＳ配合飲料水の摂取後期は、前観察期に対してのみ有意差（ｐ＜０．０５）を認めた。一方非便秘者では、各試験期間に対し有意差が認められなかった。
【００４２】
便性状に及ぼす影響
全試験期間中の総排便回数に占める便性状の出現頻度を求め、その分布の独立性についてλ２検定を行った。結果を図６に示した。
便の色については、ＬＳ配合飲料水の摂取期間に良好とされる「黄褐色」便の出現率がプラセボ飲料水の摂取期及び休止期と比較して増加傾向が見られ、「黒色系」も抑制傾向に見られたが統計的に有意差は認められなかった。便の形状については、前観察期における「コロコロ・カチカチ状」の出現率が３２％から１９％にまで減少し、一方「バナナ・半練り状」は１０％ほど増加したが有意差は認められなかった。また「泥・水状」便の出現率には、各試験期間相互に有意な変動は認められなかった。
便の硬さについては、何れも有意差は認められないが、「硬い」が前観察期よりもＬＳ配合飲料水の摂取期に増加の傾向にあった。「便の臭い」については、前観察期の「普通」がＬＳ配合飲料水の摂取期と前休止期に有意（ｐ＜０．０５）に増加し、プラセボ飲料水の摂取後期と後休止期に対して「普通」の出現率が有意（ｐ＜０．０１）に増加したが、「臭い」には変化が無かった。
排便後の感覚については、ＬＳ配合飲料水の摂取期間の「スッキリした」の出現率に他の試験期間と比較して増加傾向が見られたものの、統計的有意差は認められなかった。また「普通」及び「残便感がある」の出現率には、有意な変化は認められなかった。
【００４３】
腹部症状の発生
図７の如く「しぶり腹」「吐気」は前観察期に比べＬＳ配合飲料水の摂取期間に減少が見られた。
「腹鳴」「腹痛」及び「膨満感」は散見されたが、各試験期間相互の発生頻度にも有意差は認められなかった。
【００４４】
４）糞便細菌叢
試験期毎に糞便サンプルから分離したビフィズス菌の平均菌数を各表３に示した。
【００４５】
【表３】
ビフィズス菌の菌数は前観察期で９．３３±０．５８（Ｌｏｇ ｃｆｕ／ｇ）、プラセボ飲料水の摂取期が、９．２９±０．５６、休止期が９．２５±０．５８、ＬＳ配合飲料水の摂取期が１０．０１±０．２７であった。この結果の有意差検定を行ったところ、ＬＳ配合飲料水の摂取期の菌数は前観察期、休止期、プラセボ飲料水の摂取期に対して何れにも有意（ｐ＜０．０５）な増加が認められた。
【００４６】
一方、糞便中の総嫌気性菌数に対するビフィズス菌、レシチナーゼ陽性、大腸菌群の占有率と検出率を表４にまとめた。
【００４７】
【表４】
前観察期が１３．２０％、プラセボ飲料水の摂取期が１０．１６％、休止期が１１．１８％に対して、ＬＳ配合飲料水の摂取期が３８．０６％で有意（ｐ＜０．００５）な増加がみられた。
一方レシチナーゼ陽性、及び大腸菌群は、極少ない菌占有率を示し、有意差は認められなかった。また、図８に各試験期間の全被験者のビフィズス菌の占有率とその平均を示した。
ＬＳ配合飲料水の摂取期は他の試験期に比べ１２名全員の占有率は有意（ｐ＜０．００５）に上昇し、ＬＳ配合飲料水を摂取することで糞便中のビフィズス菌の菌数及び占有率に改善効果がみられた。
【００４８】
５）糞便中のｐＨ、アンモニア量及び水分量（含有％）
糞便中のｐＨ、アンモニア量及び水分量（含有％）の測定結果を表５に示した。
【００４９】
【表５】
被験者１２名の各試験期の各糞便サンプルのｐＨの比較において、プラセボ飲料水の摂取期が前観察期に対しｐＨ上昇の有意差（ｐ＜０．００５）が認められた。
糞便中のアンモニア量は湿重量１ｇ当たり実験開始前が１．８３ｍｇ、プラセボ飲料水の摂取期が１．８０ｍｇ、休止期が１．３９ｍｇとなり、これに対し、ＬＳ配合飲料水の摂取期の１．３０ｍｇは減少傾向があるものの、有意差は認められなかった。
糞便中の水分量（含有％）は前観察期とプラセボ飲料水の摂取期が各々７１．３７％及び７２．２８％、ＬＳ配合飲料水の摂取期が７２．９８％と変化がなかった。
【００５０】
６）ＬＳ配合飲料水の増量摂取の排便状況への影響及び腹部症状の発生頻度
被験者２０名を対象として、ＬＳ配合飲料水の増量摂取試験を行った時の各試験期間の総排便回数に対する「泥状」便及び「水状」便の排泄頻度を表６に示した。
【００５１】
【表６】
ＬＳ配合飲料水の常用量摂取Ａ期、２倍量摂取Ｃ期及び３倍量摂取Ｅ期の「泥状」便排泄頻度は各々１１．８％、6.6％及び７．５％と減少傾向があるものの、これらの摂取期間相互には有意差は見られず、用量依存性も認められなかった。また休止Ｂ期、休止Ｄ期においても１１．７％が８．１％に減少傾向にあった。
【００５２】
一方「水状」便排泄頻度において休止Ｂ期と休止Ｄ期との間に有意（ｐ＜０．０５）な増加が認められたが、一過性で翌週の試験には影響を与えなかった。
各試験期の延べ人数に対する腹部症状を訴えた人数の割合（発生頻度）は表７の通りであった。
【００５３】
【表７】
【００５４】
「腹痛」が常用量摂取Ａ期３１．６％に対し、２倍量摂取Ｃ期が２５．０％及び３倍量摂取Ｅ期が１６．９％と減少した。
「腹鳴」は平均１２．５〜１７．５％で散見し、「膨満感」は２９．６〜４３．１％内で変化したが各試験間相互に有意差は認められなかった。
「放屁」は１２．０〜２０．０％で散見し、「しぶり腹」は３．２〜７．７％内で変化したが、各試験間相互に有意差は認められなかった。「吐気」については、２倍量摂取Ｃ期に１．３％認められたがその他には認められなかった。
以上の知見から、ＬＳ配合飲料水の１倍量（乳果オリゴ糖３ａとして３．０ｇ／日）を２倍量（乳果オリゴ糖３ａとして６．０ｇ／日）及び３倍量（乳果オリゴ糖３ａとして９．０ｇ／日）と増量して各７日間摂取しても、３倍量摂取期の腹部症状や泥状／水状便排泄頻度にＬＳ配合飲料水の摂取による副作用を起因させる結果は認められなかった。
【００５５】
考察
乳果オリゴ糖３ａを単独で摂取することにより、ヒトの便通や便性状が改善されることが明らかにされ、食品素材として1日１．０〜２．０ｇの乳果オリゴ糖３ａの摂取でビフィズス菌が増加し、更に1日２．０〜６．０ｇの乳果オリゴ糖３ａの摂取で有意に便通の改善、糞便腐敗物質の減少及び短鎖脂肪酸の増加が起こることが報告されている。食品の形態に加工された場合でも、２．０〜５．０ｇの乳果オリゴ糖３ａを含むクッキー、乳酸菌飲料水、粉末清涼飲料水、クロワッサン、即席みそ、錠菓等を摂取することにより排便状況が有意に改善されることが証明され特定保健用食品として利用されている。
このような知見に基づいて、成人１日当たり乳果オリゴ糖３ａとして３．０ｇの摂取が妥当な常用量であると考えて、1日当たりの飲水を５００ｍｌ摂取することにより乳果オリゴ糖３ａを３．０ｇ摂取出来るようにペットボトルタイプのＬＳ配合飲料水（乳果オリゴ糖３ａとして３．０ｇ／５００ｍｌ／本）を試作した。
更に、対照として乳果オリゴ糖３ａを除いたプラセボ飲料水を調製した。本品は市場にある飲料水用ペットボトル容器と同じ形態なので、１日の必要本数（５００ｍｌ／本）がはっきりと訴求できると思われる。また食事と関係なく摂取が可能であることに加え、調理の必要が無く携帯に便利なので、夏場等に過剰摂取に陥りやすいことが想定できる。
【００５６】
本試験では、女子学生を対象とし、ＬＳ配合飲料水の１日５００ｍｌ（乳果オリゴ糖３ａとして３．０g）２週間の摂取が排便日数、排便回数、排便量、便性状及び腹部症状に及ぼす影響を観察すると共に、別群の女子学生を対象にして、１日５００ｍｌの常用量から１日２倍量（１，０００ml、乳果オリゴ糖３ａとして６．０ｇ）及び１日３倍量（１，５００ml、乳果オリゴ糖３ａとして９．０ｇ）に増量して各々７日間摂取した場合の泥状便／水状便排泄頻度及び腹部症状発生率に及ぼす影響を観察した。
ＬＳ配合飲料水の常用量摂取による排便状況に及ぼす影響に対する評価は、各試験期に得られた排便日数、排便回数及び排便量の有意差検定から求めた。
この結果、ＬＳ配合飲料水の摂取期（前・後期）は他の試験期の排便日数、排便回数及び排便量に対し有意な増加を示す効果が認められた。
【００５７】
飯野ら、岩井ら及び北尾ら報告によれば、乳果オリゴ糖３ａの排便状況に対する効果は、便秘傾向の強い被験者ほど顕著に発現することが報告されているが、今回の試験でも、常習性便秘者と便秘傾向者及び非便秘者に分けて層別解析を行った結果、ＬＳ配合飲料水の摂取は、１週間の排便回数が３回以下の常習性便秘者にもっとも強く排便の改善が認められた。また便秘傾向者（排便回数が週４〜７回）においてもＬＳ配合飲料水の摂取前期に改善がみられ翌週の後期まで持続した。
依って、便秘者と便秘傾向者の両方に有意な改善効果が認められた。しかし非便秘者（排便回数が週８回以上）においては、有意な差は認められなかった。
【００５８】
次にＬＳ配合飲料水の摂取は、「便の色」「便の形状」「便の硬さ」の一部の観察項目に有意な便性状の改善が見られたが、「便の臭い」については、前観察期に対し各試験期に、「気にならない」が減少し、「普通」が有意（ｐ＜０．０５）に増加した。一方「くさい」については変化が認められなかったので、ＬＳ配合飲料水の摂取による異常腸内発酵は考えにくいと思われた。
ＬＳ配合飲料水の２週間の摂取によりビフィズス菌の平均菌数が全試験期に対し有意（ｐ＜０．００５）に増加した。またＬＳ配合飲料水の摂取期のビフィズス菌の占有率もまた全試験期に対し１２名中全員に有意（ｐ＜０．００５）に増加し、ＬＳ配合飲料水の２週間の摂取による総嫌気性菌に対するビフィズス菌の占有率改善効果が認められた。
今回の試験において糞便のｐＨ値が全観察期よりも各試験期のほうが高い値となった。これは試験飲料及びプラセボ飲料ともｐＨが７．２と酸性側より高めにあるため、飲料水の影響を受けていることが考えられた。しかしながら、ＬＳ配合飲料水の摂取期はプラセボ飲料水の摂取期よりも低いｐＨとなっていることから、有機酸等の腸内産出は行われていると予測された。一方、糞便中水分量（含有％）においては、５００ｍｌの水分を毎日とり続けることで、各試験間に差が出にくいのではないかと考えられた。
【００５９】
ところで、今回の試験飲料水は、他の食品形態と比較して食事とは関係なく摂取でき、必要量の摂取を容易にすると同時に過剰摂取に陥り易い欠点もある。素材としての乳果オリゴ糖３ａを単味で摂取したときの下痢に対する最大無作用量は体重Ｋｇ当たり０．６gであり、体重５０Ｋｇのヒトでは1日に乳果オリゴ糖３ａとして３．０ｇを摂取しても下痢を誘発しないことが報告されている。また、Ｏｈｋｕｓａらによれば、１日量６・０ｇの乳果オリゴ糖３ａを素材として8週間摂取させ、乳果オリゴ糖３ａの長期摂取時における安全性を評価したヒト試験の結果では、8名中1名に鼓腸と下痢がみられたが、これらの副次作用は何れも一過性で持続しなかったと報告している。
本試験の過剰摂取試験では２０名の被験者に対し、1日常用量から増量し、２倍量及び最大無作用量の３分の１量である３倍量を摂取する試験を行った。ＬＳ配合飲料水の摂取には1日の摂取量のみを規定し、摂取時間や1回に摂取する量については規定しなかったが、調査表の記載によると３倍量の摂取については各被験者が独自の摂取スケジュールを設定し、飲みきれない場合は、コーヒーや料理にも利用し、規定量摂取完了に努力した跡が伺われた。
【００６０】
ＬＳ配合飲料水の３倍常用量摂取の泥状便排泄頻度に及ぼす影響は７．５％（排便回数１３５回中１０回）で常用量摂取期よりも少なかった。また泥状便が観測された被験者が連続して観察された例はなく、全て翌日には正常に戻る一過性の発現であった。また、「水状」便排泄頻度が、休止期（Ｂ及びＤ期）の間にのみ有意（ｐ＜０．０５）に認められたが他の試験期間と比較して有意差は認められなかった。
腹部症状の発生頻度では、λ２検定による解析結果でどの症状間においても有意な差は認められなかった。比較的重度な腹部症状である「腹痛」の愁訴については、常用量摂取期で３１．６％、２倍量摂取期で２５．０％、３倍量摂取量で１６．９％と減少する傾向が認められた。しかし３倍量摂取期の「腹痛」持続状況はその９０％が1日以内に正常に戻り、3日間以上持続した例は2例のみで、更に各試験期間と比較して相互に有意差は認められなかったことから３倍量摂取期の「腹痛」発生頻度は一過性のものであり、継続した症状ではなかったと考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】本発明の機能性付加水における原料組合わせ例を示すブロック線図である。
【図２】日本海固有冷水の多段式分離図である。
【図３】日本海固有冷水と、それより分離した淡水、ミネラル濃縮水、濃縮塩水のミネラル成分図である。
【図４】本発明の乳果オリゴ糖配合飲料水における原料の組合わせ例を示すブロック線図である。
【図５−１】試験サケジュウール図である。
【図５−２】試験１，２，３におけるサケジュウール図である。
【図６】便性状の発生頻度を示すグラフである。
【図７】腹部症状の発生頻度を示すグラフである。
【図８】ビフィズス菌占有率の変化を示すグラフである。
【符号の説明】
【００６２】
１ ミネラル含有水
２ 難消化性糖質、
３ オリゴ糖、３ａ 乳果オリゴ糖
４ 天然水、４ａ ミネラルウォータ
５ 海洋深層水（日本海固有冷水）、５ａ 脱塩深層水
６ 淡水
７ 濃縮深層水
８ ミネラル濃縮水
９ 濃縮塩水
１０ 第一処理装置、１１ イオン交換膜
２０ 第二処理装置、２１ イオン交換膜
|
| 【出願人】 |
【識別番号】５９２００８７５６
【氏名又は名称】五洲薬品株式会社
|
| 【出願日】 |
平成１６年３月３１日（２００４．３．３１） |
| 【代理人】 |
|
| 【公開番号】 |
特開２００５−２７６５８（Ｐ２００５−２７６５８Ａ） |
| 【公開日】 |
平成１７年２月３日（２００５．２．３） |
| 【出願番号】 |
特願２００４−１０３６４２（Ｐ２００４−１０３６４２） |
|