| 【発明の名称】 |
グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤 |
| 【発明者】 |
【氏名】大志万 浩一
【氏名】光永 徹
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| 【要約】 |
【課題】口腔組成物、食品及び飼料等に配合して、歯垢の形成抑制、歯周病の予防、治療等に用いることができる安全なグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤の提供。
【解決手段】Cinnamomum sintok Bl.Sintok）、Eugenia polyantha Wight（Babakan salam）、Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（Kayu manis）、Eugenia cuminii Merr.（Babakan duwet）、Anacardium occidentale L.（Daun jambu mete）、Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（Kayu timur）、Mesua ferrea（Sari kurung）、Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（Bunga lawang）、Gendarussa vulgaris Nees（Gondoroso）、Gymnopetalum leucosticum Miq.（Duri kemarung）、以上（ ）内はインドネシア名及びPhylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）からなる群より選ばれる少なくとも一種以上の植物の溶媒抽出液。 |
【特許請求の範囲】
【請求項１】 学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）、学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）、学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）、学名：Eugenia cuminii Merr. (Eugenia jambolana Lam.)（インドネシア名：Babakan duwet）、学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）、学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）、学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）、学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）、学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）、学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）、及び学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）からなる群より選ばれる少なくとも一種以上の植物の溶媒抽出物あるいは炭酸ガスを使用する超臨界抽出法により抽出された抽出物を有効成分として含有することを特徴とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
【請求項２】 植物が、学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）の樹皮、学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）の樹皮、学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）の樹皮、学名：Eugenia cuminii Merr. （インドネシア名：Babakan duwet）の樹皮、学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）の葉、学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）の樹皮、学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）の花、学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）の実、学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）の葉(茎・葉)、学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）のとげ、及び学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）の枝・葉からなる群より選ばれる少なくとも一種以上である請求項１のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
【請求項３】 有効成分として植物の溶媒抽出物を含有する請求項１または２のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
【請求項４】 溶媒が水、クロロホルム、メタノール、エタノール、プロピレングリコール及び１,３−ブチレングリコールからなる群から選ばれる少なくとも１種である請求項１から３のいずれかのグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
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【発明の詳細な説明】【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、歯垢の形成を抑制して、う蝕及び歯周疾患を予防する、口腔用組成物や食品に有用な新規で且つ安全性の高いグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】う蝕とは一般に虫歯と呼ばれるものであり、歯が局所かつ進行的に破壊される疾患である。う蝕が起こる機序として、まず口腔内細菌連鎖球菌、ストレプトコッカス・ミュータンス、ストレプトコッカス・ソブライナス（以下、S. sobrinus と略す）に由来するグルコシルトランスフェラーゼが飲食物中のショ糖から不溶性でしかも粘着性であるグルカンを合成し、その合成されたグルカン中で、S.sobrinus をはじめ種々の細菌が繁殖し菌叢である歯垢が形成され、次いで歯垢中の細菌が糖醗酵により産生する酸によって歯の組織が脱灰してう蝕が進行することが知られている。更に、菌の死骸や菌によって産生された種々の物質、酵素が歯肉に対して悪影響を及ぼし、歯周病の原因となることが知られている。従って、グルコシルトランスフェラーゼを阻害することによって、歯垢の形成を抑制、阻止することが可能であり、さらにう蝕や歯周疾患の予防につながる。近年、う蝕やその他の口腔内疾患の羅患率は著しく増大し、それらの予防に関する研究が進む中で、種々のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤が提案されている。例えば、特開昭６０−２４８１３７号公報には微生物由来の化合物をチューインガム等に添加することが開示され、特開昭５９−１５２３１１号公報には縮合型タンニン、特開昭５９−１５２３１３合公報にはモクマオウ及びオオバヤシヤブシ等が抗う蝕剤として有用であることが開示されている。しかしながら、このようなグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を用いても、う蝕や歯周病を充分に予防し得ず、実際に利用し得る効果的なグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤は未だ見出されていないのが現状である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、グルコシルトランスフェラーゼを効果的に阻害し、且つ人体や動物に対して有害な作用を及ぼさない安全性の高いグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者等は上記の目的を達成するために鋭意研究を重ね、種々の植物をスクリーニングして、グルコシルトランスフェラーゼを効果的に阻害し且つ安全性の高い天然由来の物質を探索したところ、特定の植物からの抽出物がグルコシルトランスフェラーゼに対して強力な阻害作用を有し、う蝕、歯周疾患の予防に有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）、学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）、学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）、学名：Eugenia cuminii Merr.（インドネシア名：Babakan duwet）、学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）、学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）、学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）、学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）、学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）、学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）、及び学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）からなる群より選ばれる少なくとも一種以上の植物の溶媒抽出物あるいは炭酸ガスを使用する超臨界抽出法により抽出された抽出物を有効成分として含有することを特徴とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤である。また本発明は、植物が、学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）の樹皮、学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）の樹皮、学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）の樹皮、学名：Eugenia cuminii Merr. （インドネシア名：Babakan duwet）の樹皮、学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）の葉、学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）の樹皮、学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）の花、学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）の実、学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）の葉(茎・葉)、学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）のとげ、及び学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）の枝・葉からなる群より選ばれる少なくとも一種以上である上記のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤である。また本発明は、有効成分として上記植物の溶媒抽出物を含有する上記のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤である。更に本発明は、上記溶媒が水、クロロホルム、メタノール、エタノール、プロピレングリコール及び１,３−ブチレングリコールからなる群から選ばれる少なくとも１種である上記のいずれかのグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤である。
【０００５】
【発明の実施の形態】以下に本発明を詳細に説明する。
原材料本発明に用いられる植物は、好ましくは、学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）の樹皮、学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）の樹皮、学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）の樹皮、学名：Eugenia cuminii Merr.（インドネシア名：Babakan duwet）の樹皮、学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）の葉、学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）の樹皮、学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）の花、学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）の実、学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）の葉(茎・葉)、学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）のとげ、または学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）の枝・葉である。これらは通常乾燥したものが用いられる。これらの原材料は、インドネシアやペルーの市場をはじめ他国の市場でも入手できる。
【０００６】有効成分の抽出上記原材料からの有効成分の抽出方法として公知の方法が採用でき、例えば炭酸ガスを使用する超臨界抽出法や溶媒による抽出法が挙げられる。抽出操作の前に原材料を適度な大きさに分割してもよい。溶媒による抽出法としては、例えば、原材料に溶媒を添加して溶媒の還流温度下で加熱処理する方法が挙げられる。この加熱処理は一般に８０℃以下の温度で実施することが好ましく、公知の抽出装置を用いて還流下１〜６時間加熱処理することによって抽出液を得ることができる。また、溶媒中に前記原材料の乾燥粉末を温浸することによって抽出液を得ることもできる。超臨界抽出法と溶媒による抽出法を組み合わせて使用してもよい。これらの抽出操作は、１回目の抽出操作を終えた原料残留物で繰り返して実施することができる。抽出に使用する溶媒の量は、原材料１００重量部当たり１００〜１０,０００重量部が適当であり、さらに好ましくは３００〜５,０００重量部である。
【０００７】本発明において使用できる抽出溶媒としては、水、低級アルコールであるメタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、イソブタノール等、あるいはプロピレングリコール、１,３ブチレングリコール等の多価アルコール、アセトン、ジオキサン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、酢酸エチル、ブチルメチルケトン、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、キシレン、トリクロロエチレン、四塩化炭素、ベンゼン、クロロホルム及びトルエン等が挙げられる。特に、クロロホルム、メタノール、エタノール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコールが好ましい。上記の溶媒を単独で使用しても、２種以上を混合して使用してもよく、水と有機溶媒を併用してもよい。上記の低級アルコール及び多価アルコールを含水アルコールとして使用する場合は、水分含量５０％以下が好ましい。このようにして得られた抽出液を減圧濃縮して、次いで乾燥することによって抽出物を粉末として得ることができる。また、使用する溶媒によっては抽出液をそのままグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤の有効成分として使用することが可能であり、例えばエタノール、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール等による抽出液はそのまま溶媒を除去せずに使用してもよい。
【０００８】超臨界流体は、その溶解力を圧力，温度により容易にしかも広範囲に渡って連続的に制御できるため、この性質を利用した超臨界抽出法は、新たな分離法として期待されている。特に超臨界二酸化炭素（ＳＣ−ＣＯ2）は、臨界点（臨界温度３０４．２Ｋ，臨界圧力７２．８ａｔｍ）が比較的低いため、熱的に不安定な物質にも適用可能である。超臨界抽出法は、食品、化学、医薬、化粧品工業など幅広い分野で注目を集めている抽出技術である。特に、抽剤として二酸化炭素を用いた場合は、その臨界点（７５ｋｇ／ｃｍ2、３１℃）が比較的低く安全性が高いため、熱に対して不安定な成分や揮発性の高い成分等を効率よく抽出分離することができる。原料から目的の成分を抽出するためには、二酸化炭素の圧力・温度を臨界点以上に設定することにより達せられる。一般的には、同じ温度であれば圧力が高いほど超臨界二酸化炭素の溶解力は増す。目的成分の溶解性が高い場合、例えば植物の精油成分、非極性低分子有機化合物等の場合は、比較的臨界圧力に近い圧力で効率よく抽出することができる。一方、超臨界二酸化炭素に対する溶解性が低い成分、例えば一般食用油脂類等の場合は、およそ２００〜３５０ｋｇ／ｃｍ2の圧力にまで抽出圧力を上昇させれば、効率的に抽出することができる。抽出に際しての温度設定も超臨界二酸化炭素の溶解力を増すような条件にする必要があるが、熱に対して不安定な成分を抽出する場合や、抽出成分を除去した後の原料残留物が必要な場合等は、抽出温度を高く設定することは望ましくない。本発明における超臨界二酸化炭素抽出は、自体公知の方法で行うことができる。例えば、超臨界抽出装置を用い、高圧セル部の温度３３〜４０℃、好ましくは３５℃、圧力７５〜３００atm、好ましくは１５０atmとし、二酸化炭素の流量０.５〜５.０dm3／分、好ましくは４.０dm3／分の条件下で行うことができる。これにより、グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を含む抽出物が効率よく回収できる。
【０００９】本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤に、有効成分である上記原材料の抽出物の他に、該抽出物に有害でなく且つ該グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を利用する製品に不適当でない限り、適宜添加剤を常法に従って配合することが可能である。また、グリチルリチン酸、グリチルリチン酸ジカリウム、塩化リゾチーム、溶菌酵素、ムタナーゼ、クロルヘキシジン、ソルビン酸、アレキシジン、ヒノキチオール、セチルピリジニウムクロライド、アルキルグリシン、アルキルジアミノエチルグリシン塩、アラントイン、ε−アミノカプロン酸、アズレン、ビタミンＥ及びその誘導体、モノフルオロリン酸ナトリウム、フッ化ナトリウム、フッ化第１錫、水溶性第１若しくは第２リン酸塩、第４級アンモニウム化合物、塩化ナトリウム等の他の有効成分を配合することもできる。
【００１０】製品への応用本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤は、口腔用組成物、食品、飼料等へ常法に従って添加することができ、その添加量は製品の種類に応じて適宜選択することができるが、通常、製品の全重量に対して０.００１〜５重量％が適当であり、さらに０.００５〜２重量％とすることが好ましい。本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤の適用製品として、具体的には、練歯磨、粉歯磨、水歯磨等の歯磨類、マウスウォッシュ、トローチ、うがい用錠剤、塗布剤等の口腔用組成物、パスタ、チューインガム、チューイングゼリー、コーヒー飲料等の食品、ドッグフード、キャットフード等の飼料が挙げられる。
【００１１】これらの製品には本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤の他に、各種製品に応じて適宜添加剤が配合され、また他の有効成分が用いられてもよい。勿論、本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤そのものに、それらの添加剤を配合してもよい。例えば練歯磨の場合であれば、研磨剤として、ヒドロキシアパタイト、第１リン酸カルシウム、第２リン酸カルシウム（２水和物及び無水物）、第３リン酸カルシウム、炭酸カルシウム（軽質、重質のいずれでもよいが重質が好ましい）、ピロリン酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、第３リン酸マグネシウム、硫酸カルシウム、非晶質シリカ、結晶質シリカ、アルミノシリケート、ジルコシリケート、酸化アルミニウム、水酸化アルミニウム、レジン等；粘結剤として、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン酸塩、カラゲナン、アラビアガム、ポリビニルアルコール等；粘稠剤として、ポリエチレングリコール、ソルビトール、グリセリン、プロピレングリコール等；発泡剤として、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、水素添加ココナッツ脂肪酸モノグリセリドモノ硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、Ｎ−ラウロイルザルコシン酸ナトリウム、Ｎ−アシルグルタミン酸塩、ショ糖脂肪酸エステル等；香料としてペパーミント、スペアミント等の精油、１−メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール等；甘味料としてサッカリンナトリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、グリチルリチン、ペリラルチン、ｐ−メトキシシンナミックアルデヒド等；及び防腐剤等が挙げられる。これらの成分及び本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤あるいは該阻害剤の有効成分である抽出物を水と混和し、常法に従い製造する。また、マウスウォッシュ等の口腔洗浄剤その他においても、製品の性状に応じた成分が適宜配合される。
【００１２】以下、製造例、試験例及び応用例を挙げ、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
製造例１学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例２学名：Eugenia polyantha Wight（インドネシア名：Babakan salam）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例３学名：Cinnamomum burmani Nees ex Bl.（インドネシア名：Kayu manis）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例４学名：Eugenia cuminii Merr.（インドネシア名：Babakan duwet）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例５学名：Anacardium occidentale L.（インドネシア名：Daun jambu mete）の葉乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例６学名：Peltophorum pterocarpum (DC.) Bakh（インドネシア名：Kayu timur）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
【００１３】製造例７学名：Mesua ferrea（インドネシア名：Sari kurung）の花乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例８学名：Cinnamomum cassia Nees ex Bl.（インドネシア名：Bunga lawang）の実乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例９学名：Gendarussa vulgaris Nees（インドネシア名：Gondoroso）の葉乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例10学名：Gymnopetalum leucosticum Miq.（インドネシア名：Duri kemarung）のとげ乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例11学名：Phylanthus niruri Paraparami（ペルー名：Chanca piedra）の枝・葉乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ v/v％エタノール１，０００ｍｌを加え、室温暗所にて７日間攪拌抽出を行った。これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出液を得た。この抽出液と凍結乾燥し抽出物を得た。
製造例12学名：Cinnamomum sintok Bl.（インドネシア名：Sintok）の樹皮乾燥物の破砕物１００ｇを原料として抽出塔に仕込み、二酸化炭素の圧力２５０ｋｇ／ｃｍ2 ・温度５２℃の条件下で抽出を行ない、その後、二酸化炭素と抽出物との分離を行った。二酸化炭素を大気圧まで減圧し、得られた油を抽出物とした。
【００１４】試験例１グルコシルトランスフェラーゼ阻害活性の検定次のような方法で上記製造例１〜1１で得た抽出物の評価を行った。また、同様の方法で緑茶およびウーロン茶の抽出物を得て、対照として用いた。
i)グルコシルトランスフェラーゼの調製S. sobrinus ６７１５株をTodd-Hewitt broth (Difco)培地で２４時間、３７℃で培養し、菌体から８M尿素で室温で１時間抽出操作を行った。抽出液を、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６.０）で透析処理し、グルコシルトランスフェラーゼ酵素標品液とした。
ii)グルコシルトランスフェラーゼ阻害活性の測定１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６.０）、１％ショ糖、１mg/ml Dextran T１０、製造例１〜11の抽出物を１５および５μg/mlに調製した試料溶液、グルコシルトランスフェラーゼ酵素標品液を混合し、ガラス試験管中で３７℃、３時間酵素反応させた。この際、酵素量は３７℃、３時間の反応で550nmの吸光度が1.0を示す量を本実験に用いた。不溶性グルカンを超音波破砕し、５５０nmの吸光度を次のとおり測定した。試料溶液を用いた反応前の吸光度（Ａ）、試料溶液を用いた反応後の吸光度（Ｂ）、試料溶液の代りに水を用いたときの反応前（Ｃ）と反応後（Ｄ）の吸光度として、以下の計算式で阻害率（％）を求めた。
グルコシルトランスフェラーゼ阻害率（％）＝〔１-（B-Ａ）／(D-C)〕×１００また、阻害率（％）が５０％となる試料濃度（μg/ml）を求めIC50値とした。
iii)測定結果上記反応系を用いて製造例１〜11の抽出物を調製した試料溶液を用いた場合のグルコシルトランスフェラーゼ阻害率（％）およびＩＣ５０値を下表に示す。対照とした緑茶抽出物やウーロン茶抽出物より低い試料濃度で高い阻害率を示すことが明らかとなった。
【００１５】
【００１６】応用例１常法に従い、下記表２の処方により練歯磨きを製造した。尚、以下の応用例において、％は重量％を表す。
【００１７】
表２―――――――――――――――――――――――――――――――――成分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――第２リン酸カルシウム・２水和物 ４５.０カルボキシルメチルセルロースナトリウム １.０ソルビトール １０.０グリセリン １０.０ラウリル硫酸ナトリウム １.５香料 １.０サッカリンナトリウム ０.１５製造例１で得た抽出物 ０.１精製水 ３１.２５―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００１８】応用例２常法に従い、下記表３の処方によりうがい液を製造した。
【００１９】
表３―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――エタノール ２０.０サッカリンナトリウム ０.２香料 １.００グリセリン ５.０クロルヘキシジン ０.００５製造例２で得た抽出エキス １.０精製水 ７２.７９５―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００２０】応用例３常法に従い、下記表４の処方により歯肉マッサージクリームを製造した。
【００２１】
表４―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――白色ワセリン ２５.０ステアリルアルコール ２２.０プロピレングリコール １２.０ショ糖ステアリン酸エステル ０.６パラオキシ安息香酸エチル ０.０２５パラオキシ安息香酸プロピル ０.０１５製造例３で得た抽出物 ０.１精製水 ４０.２６―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００２２】応用例４下記表５の配合及び手順に従い、チューイングゼリーを製造した。
【００２３】
表５―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――グラニュー糖 ３１.０水飴 ２９.０ゼラチン ７.７ソルビトール ４.２クエン酸 ０.７製造例４で得た抽出物 ０.０５水（Ａ） １１.８水（Ｂ） １５.５５着色料 ０.００１―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００２４】グラニュー糖、水飴、ソルビトールを水（Ａ）で、１３０℃（糖度８５゜）まで煮詰めた後、１１５℃まで冷却した。更に水（Ｂ）で膨潤させたゼラチンを加えて溶解し、クエン酸、メタノール抽出物、着色料、着香料を合せて成形、冷却（２５℃、１８時間）した。
【００２５】応用例５常法に従い、下記表６の配合によりコーヒー飲料を製造した。
【００２６】
表６―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――インスタントコーヒー １.７グラニュー糖 ５.０製造例５で得た抽出物 ０.０５水（又は湯） ９３.２５―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００２７】応用例６常法に従い、下記表７の配合によりチューインガムを製造した。
【００２８】
表７―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――ガムベース ３１.６グラニュー糖 ６２.５グリセリン ０.８クエン酸 １.０ショ糖パルミテート １.０リン酸３カルシウム ２.０製造例６で得たエタノール抽出物 ０.１香料 １.０―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００２９】応用例７常法に従い、下記表８の配合及び手順によってドッグフードを製造した。
【００３０】
表８―――――――――――――――――――――――――――――――――成 分 分量（％）
―――――――――――――――――――――――――――――――――小麦粉 ３０.０コーンフラワー １５.０大豆粉 １５.０ミートミール ２０.０砂糖 ５.０牛脂 ５.０食塩 １.０リン酸カルシウム １.５ソルビン酸カリウム ０.３香料 ０.６製造例７で得た抽出物 ０.１プロピレングリコール ６.５―――――――――――――――――――――――――――――――――合計 １００.０―――――――――――――――――――――――――――――――――【００３１】上記配合物１００重量部に対し水４０重量部を加え１５０℃、スクリュー圧縮比１：３でエクストルダーにより押し出し成形した。
【００３２】
【発明の効果】本発明のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤は、人体及び動物に対し有害な作用を示さず、きわめて安全性が高い。口腔組成物、食品及び飼料等へ配合することにより、ストレプトコッカス・ソブライナス（S. sobrinus）由来のグルコシルトランスフェラーゼによる歯垢の形成を効果的に抑制し、う蝕の発生、歯周病をきわめて効果的に防止することができる。
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| 【出願人】 |
【識別番号】０００１８３４２８
【氏名又は名称】住友林業株式会社
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| 【出願日】 |
平成１２年１２月２０日（２０００．１２．２０） |
| 【代理人】 |
【識別番号】１０００６６６９２
【弁理士】
【氏名又は名称】浅村 皓 （外３名）
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| 【公開番号】 |
特開２００２−１８７８４３（Ｐ２００２−１８７８４３Ａ） |
| 【公開日】 |
平成１４年７月５日（２００２．７．５） |
| 【出願番号】 |
特願２０００−３８６６１８（Ｐ２０００−３８６６１８） |
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