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【発明の名称】 白血球除去血液製剤の調製方法および血液セット
【発明者】 【氏名】澤本 二郎

【氏名】上林 將人

【氏名】本山 慎二
【要約】 【課題】白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる血圧降下等の副作用を回避することができ、安全性が高く、簡便な白血球除去血液製剤の調製方法の提供。

【解決手段】白血球除去フィルターに白血球含有液を導入し、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去し、該初流液の後に流出する流出液を白血球除去血液製剤として得る白血球除去血液製剤の調製方法。
【特許請求の範囲】
【請求項１】白血球除去フィルターに白血球含有液を導入し、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去し、該初流液の後に流出する流出液を白血球除去血液製剤として得る白血球除去血液製剤の調製方法。
【請求項２】白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルターと、該白血球除去フィルターから白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セットであって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段を具備する血液セット。
【請求項３】前記初流液を除去する手段が、筒状の外筒と、該外筒の上流側に設けられ、前記白血球除去フィルターから連通する流入口と、該外筒の下流側に設けられた流出口と、該外筒の内部に設けられ、一端が該外筒の該流出口に開口するように該外筒に液密に接合され、他端が該外筒の流入口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体であって、該外筒の内壁と該管体の外壁とにより形成される第二の空間に液体を貯留することができる管体とを具備する請求項２に記載の血液セット。
【請求項４】前記初流液を除去する手段が、筒状の外筒と、該外筒の上流側に設けられ、前記白血球除去フィルターから連通する流入口と、該外筒の下流側に設けられた流出口と、該外筒の内部に設けられ、一端が該外筒の該流入口に開口するように該外筒に液密に接合され、他端が該外筒の流出口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体であって、該外筒の内壁と該管体の外壁とにより形成される第二の空間に液体を貯留することができる管体と、該第二の空間に設けられた吸収材とを具備する請求項２に記載の血液セット。
【請求項５】前記初流液を除去する手段が、前記白血球除去フィルターから連通する入口管と、第一の分岐と、第二の分岐とを有する分岐管と、該第一の分岐の下流に配設されるクレンメとを具備する請求項２に記載の血液セット。
【請求項６】前記初流液を除去する手段が、前記白血球除去フィルターから連通する入口と、第一の出口と、第二の出口とを有する二方活栓を具備する請求項２に記載の血液セット。
【発明の詳細な説明】【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、白血球除去血液製剤の調製方法および血液セットに関する。
【０００２】
【従来の技術】濃厚赤血球、血小板製剤等の各種血液製剤の輸血に際し、製剤中に混在する白血球に起因して起こる副作用として、発熱、悪寒、頭痛、蕁麻疹、関節痛、血圧降下（血圧低下）、呼吸困難、アナフィラキシーショック症状等が知られている。これらのような輸血の弊害を防止する目的で、主にポリエステル、不織布、ポリウレタン等の多孔質フィルター膜材を用いた白血球除去フィルターが汎用されている。この白血球除去フィルターにおいては、フィルター膜材が改良されてきたにもかかわらず、使用した際の急激な血圧降下、ショック症状等の重篤な症例が報告されており（医薬品等安全性情報、Ｎｏ．１５０（１９９９年１０月）、厚生省医薬安全対策局、ｐ．２−５）、これらのような副作用の発生に対する原因究明と改善対策の確立が重要課題となっている。
【０００３】これに対し、従来、白血球除去フィルター使用時における副作用発生の原因として、ブラジキニン等の関与（伊藤彰師ら、日本麻酔学会誌、１９〔６〕（１９９９）ｐ．４１４−４１８）、血液中のキニン系物質の濃度上昇によるアナフィラキシー反応の誘発（濱口明彦、治療学、３３〔１〕（１９９９）ｐ．７４）、インターロイキン−４の大量生成（Ｎｏｇｕｃｈｉ，Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｐｈｅｒｅｓｉｓ，２〔２〕（１９９８），ｐ．１０９−１１４）等の指摘があった。
【０００４】しかし、白血球除去フィルター使用時に起きる血圧降下、ショック症状等の副作用は、強力にかつ急激に起きることがあるので、上記ブラジキニン等の関与等では十分に説明することができず、副作用を起こさないための安全対策も確立されていない。したがって、血圧降下等の副作用の原因解明と、副作用を起こさないための安全対策の確立とが切望されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる血圧降下等の副作用を回避することができ、安全性が高く、簡便な白血球除去血液製剤の調製方法を提供することを目的とする。また、本発明は、白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる血圧降下等の副作用を回避することができ、安全性が高く、簡便に使用することができる血液セットを提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の目的を達成するために鋭意研究した結果、白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる血圧降下等の副作用の主たる原因物質を見出し、更に、この原因物質を含有する血液成分を系外に除去することで輪血時の安全性の向上が図られることを見出し、本発明を完成したのである。
【０００７】本発明者は、白血球除去血液製剤（以下単に「血液製剤」ともいう。）が白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる副作用の原因を解明する目的で、一酸化窒素（以下「ＮＯ」ともいう。）電極（組織培養工学、２５（１９９９）村上栄一、ｐ．１６２−１６３）と酸素電極とを白血球除去フィルターの前後にそれぞれ設け、血液製剤中のガス成分について解析を行った。図１は、上記血液製剤中のガス成分についての解析のために用いた装置の概略図である。白血球除去フィルター１は、その上流側の血液バッグ１００と連結チューブ９により連通されている。また、白血球除去フィルター１は、その下流側の点滴筒４と連結チューブ８により連通され、連結チューブ８の末端部である点滴口５は、点滴筒４の内部に開放している。点滴筒４の下流側には、クレンメ６を備える連結チューブ７が連結されている。白血球除去フィルター１およびその上流側の連結チューブ９には、それぞれエアベント２および３が設けられている。上記装置において、白血球除去フィルター１の前後の流路に液体に接するように、ＮＯ電極１０および１２と、酸素電極１１および１３とを設け、それぞれ図示しない測定器に接続し、白血球含有液を導入して白血球除去フィルター１を通過する前後における液体中のＮＯ濃度と酸素分圧とを連続的に測定した。更に、白血球除去フィルター１を通過した後の血液成分を動物（ウサギ）に静脈内投与して、血圧に対する影響を観察した。
【０００８】その結果、前記白血球除去フィルター１でろ過した血液成分のうち、初流液（ろ過初期の流出液）は、ＮＯ濃度が著しく高く酸素分圧が低くなることがあり、また、血圧降下を引き起こすことがあることを見出した。
【０００９】本発明者は、上記知見に基づき、本発明を完成した。即ち、本発明は、白血球除去フィルターに白血球含有液を導入し、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去し、該初流液の後に流出する流出液を白血球除去血液製剤として得る白血球除去血液製剤の調製方法を提供する。
【００１０】また、本発明は、白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルターと、該白血球除去フィルターから白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セットであって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段を具備する血液セットを提供する。
【００１１】前記初流液を除去する手段が、筒状の外筒と、該外筒の上流側に設けられ、前記白血球除去フィルターから連通する流入口と、該外筒の下流側に設けられた流出口と、該外筒の内部に設けられ、一端が該外筒の該流出口に開口するように該外筒に液密に接合され、他端が該外筒の流入口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体であって、該外筒の内壁と該管体の外壁とにより形成される第二の空間に液体を貯留することができる管体とを具備し、好ましくは、更に、該第二の空間に設けられた吸収材を具備する血液セットは、本発明の好ましい態様の一つである。
【００１２】前記初流液を除去する手段が、筒状の外筒と、該外筒の上流側に設けられ、前記白血球除去フィルターから連通する流入口と、該外筒の下流側に設けられた流出口と、該外筒の内部に設けられ、一端が該外筒の該流入口に開口するように該外筒に液密に接合され、他端が該外筒の流出口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体であって、該外筒の内壁と該管体の外壁とにより形成される第二の空間に液体を貯留することができる管体と、該第二の空間に設けられた吸収材とを具備する血液セットは、本発明の好ましい態様の一つである。
【００１３】前記初流液を除去する手段が、前記白血球除去フィルターから連通する入口管と、第一の分岐と、第二の分岐とを有する分岐管と、該第一の分岐の下流に配設されるクレンメとを具備し、好ましくは、更に、該第二の分岐に連通する連結チューブと、該連結チューブに連通するバッグと、該連結チューブに配設されるクレンメとを具備する血液セットは、本発明の好ましい態様の一つである。
【００１４】前記初流液を除去する手段が、前記白血球除去フィルターから連通する入口と、第一の出口と、第二の出口とを有する二方活栓を具備し、好ましくは、更に、該第二の出口に連通する連結チューブと、該連結チューブに連通するバッグとを具備する血液セットは、本発明の好ましい態様の一つである。
【００１５】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の第一の態様は、白血球除去フィルターに白血球含有液を導入し、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去し、該初流液の後に流出する流出液を白血球除去血液製剤として得る白血球除去血液製剤の調製方法である。
【００１６】本発明の第一の態様に用いられる白血球除去フィルターは、特に限定されず、従来公知のものを用いることができる。白血球除去フィルターの形状は、特に限定されない。例えば、多孔質体、繊維、不織布、粒子、フィルム、シート、チューブ、中空糸、粉末とすることができる。中でも、多孔質体または不織布が好ましい。多孔質体の場合、パームポロシメーターで測定した平均孔径が１μｍ〜２０μｍであるのが好ましい。平均孔径が１μｍ未満であるとフィルターの目詰まりが起こりやすく、２０μｍを超えると後述する白血球の除去率が５０％以下に低下する場合がある。
【００１７】白血球除去フィルターの材質は、例えば、木綿、麻等の天然高分子；ナイロン、ポリエステル、ポリアクリロニトリル、ポリオレフィン、ハロゲン化ポリオレフィン、ポリエチレンテレフタレート、ポリウレタン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリ（メタ）アクリレート、エチレン−ポリビニルアルコール共重合体、ブタジエン−アクリロニトリル共重合体等の合成高分子；これらの混合物が挙げられる。中でも、白血球除去フィルターの形状を多孔質体とする場合においては、ポリウレタンが好ましく、不織布とする場合においては、ポリエチレンテレフタレートが好ましい。
【００１８】白血球含有液は、特に限定されず、例えば、全血、濃縮血小板血漿（ＰＣ）、多血小板血漿（ＰＲＰ）、濃厚赤血球液、血小板成分液等の血液製剤が挙げられる。これらの血液製剤には、抗凝固液、保存液等の薬剤が添加されていてもよい。
【００１９】本発明の第一の態様においては、上記白血球除去フィルターに上記白血球含有液を導入し、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する。上述したように、本発明者は、白血球除去フィルターから流出する流出液のうち初流液は、その後に流出する流出液に比べＮＯ濃度が高く、体内に投与すると、血圧降下等の副作用を引き起こすおそれが大きいことを知見し、本発明に至った。本発明の白血球除去血液製剤の調製方法においては、ＮＯ濃度が高くなるおそれが大きい初流液を除去し、その後に流出する流出液を白血球除去血液製剤とするので、輸血の際に血圧降下等の副作用を引き起こす危険を防止することができる。
【００２０】ここで、初流液とは、無色透明から濃厚な赤色へと変化する成分のうちの全部または一部をいう。本発明の第一の態様において、除去する初流液の量は、輸血を受ける患者やその病態によって任意に決定することができる。また、本発明の第一の態様においては、ウサギ、ラット、イヌ、ネコ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、サル、フェレット等の哺乳動物を用いて、除去する初流液の量を実験的に決定することもできる。
【００２１】本発明の第一の態様においては、少なくとも、白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、ろ過開始から、ＮＯ濃度が６μｍｏｌ／Ｌまで低下するまでの流出液を初流液として除去するのが好ましく、ろ過前の白血球含有液のＮＯ濃度まで低下するまでの流出液を初流液として除去するのがより好ましい。少なくともＮＯ濃度が６μｍｏｌ／Ｌまで低下するまでの流出液を初流液として除去し、初流液の後に流出する流出液を白血球除去血液製剤として得ることにより、ＮＯ濃度が高い流出液による血圧降下等の副作用を回避することができる。
【００２２】また、本発明の第一の態様においては、少なくとも、白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、ろ過開始から、酸素分圧がろ過前の白血球含有液の酸素分圧の７５％以上上昇するまでの流出液を初流液として除去するのが好ましい。
【００２３】本発明の第一の態様においては、ＮＯ濃度および／または酸素分圧を測定し、除去する初流液の量を決定するのが好ましい態様の一つである。ＮＯ濃度および／または酸素分圧を測定して除去する初流液の量を決定すると、白血球除去血液製剤の調製に用いる白血球含有液の損失を低く抑えることができる。
【００２４】ＮＯ濃度および酸素分圧の測定には、それぞれ従来公知のセンサーを用いることができる。センサーは、目的に応じて、種類、数、測定個所等を決定することができる。ＮＯ濃度の測定に用いられるセンサーは、液体中のＮＯ濃度を即時的にかつ連続的に測定できるものが好ましい。例えば、化学発光法または電極法による検出・測定機構を有するセンサーを用いることができる。酸素分圧の測定に用いられるセンサーは、液体中の酸素分圧を即時的にかつ連続的に測定できるものが好ましい。例えば、インターメディカル社製のＰＯ2 −１００ＤＷを用いることができる。本発明の第一の態様においては、上記のほかに、ｐＨセンサー等の各種センサーを用いることもできる。これらも、従来公知のセンサーを用いることができ、即時的にかつ連続的に測定できるものであるのが好ましい。
【００２５】また、本発明の第一の態様においては、白血球除去フィルターのろ材によっても異なるが、除去する初流液の量を、例えば、用いられる白血球除去フィルターの容量の１／５０〜１／１０倍として決定することもできる。
【００２６】初流液を除去する方法は、特に限定されない。例えば、初流液を吸収材に吸収させる方法、初流液とその後の流出液とを分画する方法が挙げられる。具体的には、後述する本発明の第二の態様の血液セットの具体例における、初流液を除去する手段２１０、３１０、４１０および５１０のいずれかを用いる方法が挙げられる。
【００２７】本発明の第一の態様により得られる白血球除去血液製剤は、ＮＯ濃度が６μｍｏｌ／Ｌ以下であるのが好ましく、ろ過前のＮＯ濃度以下であるのがより好ましい。白血球除去血液製剤のＮＯ濃度が６μｍｏｌ／Ｌ以下であると、副作用を引き起こしにくい。即ち、ＮＯ濃度が６μｍｏｌ／Ｌ以下である白血球除去血液製剤は、本発明の一態様である。
【００２８】本発明の第一の態様の白血球除去血液製剤の調製方法に用いられる装置は、特に限定されないが、以下の本発明の第二の態様の血液セットを用いるのが好ましい。本発明の第二の態様は、白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルターと、該白血球除去フィルターから白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セットであって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段を具備する血液セットである。本発明の第二の態様の血液セットによれば初流液の除去を容易にかつ安全に行うことができるので、本発明の第二の態様の血液セットは極めて有用である。以下、図を用いて本発明の第二の態様について詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２９】図２の模式図に例示した血液セットは、白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルター１と、該白血球除去フィルター１から白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セット２００であって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段２１０を具備する血液セット２００である。白血球除去フィルター１は、その上流側の血液バッグ（図示せず）と連結チューブ９により連通されている。また、白血球除去フィルター１は、その下流側の初流液を除去する手段２１０と連結チューブ８により連通されている。初流液を除去する手段２１０の下流側には、クレンメ６を備える連結チューブ７が連結されている。白血球除去フィルター１およびその上流側の連結チューブ９には、それぞれエアベント２および３が設けられている。
【００３０】本発明の血液セットの好ましい態様の一つとしては、図２に示されるような、初流液を除去する手段２１０が、筒状の外筒１４と、外筒１４の上流側に設けられ、白血球除去フィルター１から連通する流入口と、外筒１４の下流側に設けられた流出口と、外筒１４の内部に設けられ、一端が外筒１４の該流出口に開口するように外筒１４に液密に接合され、他端が外筒１４の該流入口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体１５であって、外筒１４の内壁と管体１５の外壁とにより形成される第二の空間１８に液体を貯留することができる管体１５とを具備し、好ましくは、更に、第二の空間１８に吸収材を具備する血液セット２００が挙げられる。
【００３１】図２の（２Ａ）に示されるように、初流液を除去する手段２１０は、目盛り１７を備える点滴筒１４と、点滴筒１４の内部に開放する連結チューブ８の末端部である点滴口５と、点滴筒１４の内部に長軸に沿って設けられた管１５とからなる。目盛り１７は、点滴筒１４を上下逆転させた状態（連結チューブ７側が上、連結チューブ８側が下の状態、図２の（２Ｂ））における液溜限界を示し、これにより最大貯液量が定められる。また、最大貯液量の液を溜めた後に、点滴筒１４を上下正常な状態（連結チューブ７側が下、連結チューブ８側が上の状態、図２の（２Ｃ））に戻したときに、点滴筒１４の内壁と管１５の外壁とにより形成される液体貯留用空間１８に溜められた液の液面より管１５の管先端部１６が突出した状態になるように、管１５の長さが設定されている。
【００３２】液体貯留用空間１８には、所望により、吸収材を設けることができる。これにより初流液を吸収保持することが可能となり、白血球除去血液製剤からの初流液の除去が容易となる。本発明の第一の態様に用いられる吸収材は、血液製剤を吸収するものであれば特に限定されないが、例えば、セルロース（例えば、パルプ、吸収紙）、ゼラチン、トロンビン、酸化セルロース、アルギン酸ナトリウム、トラネキサム酸、ε−アミノカプロン酸、メシル酸アドレノクロムモノアミノグアニジン、カルバゾクロムスルホン酸ナトリウム、オレイン酸モノエタノールアミン、ポリビニルアルコール／ポリアクリル酸系重合体（例えば、架橋ポリアクリル酸重合体）、ポリエチレンオキシド系重合体、ポリアクリルアミド系重合体、ポバール系重合体、デンプン系重合体（例えば、デンプン／ポリアクリル酸グラフト系重合体、カルボキシメチル化デンプン系重合体）、セルロース系重合体（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、カルボキシメチル化セルロース（ＣＭＣ−Ｎａ））、アミノ酸系吸水性重合体（例えば、架橋ポリアスパラギン酸重合体等の架橋アスパラギン酸系重合体；納豆樹脂）が挙げられる。これらは、単独で用いることもでき、２種以上を併用することもできる。
【００３３】吸収材は、水分吸収量が、常温から体温程度の温度において、自重の２〜１０００倍であるものが好ましい。吸収材の使用量は、吸収材の種類により異なるが、一般に初流液５ｍＬあたり０．０１〜２ｇであるのが好ましい。
【００３４】これらの吸収材は、混合、練合、含浸、接合、蒸着焼結、塗布、蒸留などの手段を必要に応じて選択して用いられる。具体的には、例えば、吸収材を粉末状、粒子状、結晶状、繊維状、フィルム状、不織布状、スポンジ状、綿状、円筒状、ろ紙状等の担体（例えば、多孔質体、焼結多孔質体）に担持させて液体貯留用空間１８に設けることができる。担体として、焼結多孔質体を用いる場合、吸収材を焼結多孔質体に担持させるには、焼結多孔質体の構成成分と混合して吸収用多孔質体および／またはフィルターを形成すればよい。具体的には、成形前の熱可塑性樹脂等に水膨潤性高分子材料などの吸収材を均一に分散混合し、これを成形型に入れて加熱加工等を施すことにより所望の形状に成形すればよい。このようにして得られた吸収材として、架橋ポリアクリル酸重合体が添加された円筒状等の多孔性ポリエチレン焼結体が好適に例示される。また、吸水性高分子、多孔性吸着体等の立体的形状を自ら構成しうる吸収材であれば、液体貯留用空間１８に直接設けることができる。
【００３５】吸収材は、単独でまたは担体に担持された状態で、液体貯留用空間１８に挿入する方法、液体貯留用空間１８の内壁に塗布する方法等により、設けることができる。また、液体貯留用空間１８に限らず、白血球除去フィルター１からの流出液が接触する連結チューブ８に塗布して設けることもできる。
【００３６】吸収材を液体貯留用空間１８に設ける場合、点滴筒１４の目盛り１７の位置またはその近傍に、吸収材の脱落、移動等を防止するために、図示しない連続もしくは非連続の突出構造のストッパー、または液体の通過が容易なストッパーを設けることができる。
【００３７】図２に示した血液セット２００の使用方法を以下に示す。まず、（２Ａ）に示されるように、点滴筒１４を上下逆転させた状態で、常法に従いクレンメ６を開いて白血球含有液を白血球除去フィルター１に導入する。（２Ｂ）に示されるように、白血球除去フィルター１からの流出液を目盛り１７の位置を超えないように液溜した後、クレンメ６を閉じる。ついで、（２Ｃ）に示されるように、点滴筒１４を上下正常な状態に戻し、流出液を液体貯留用空間１８に貯留する。このようにして、プライミング操作の際に、初流液が除去される。その後、クレンメ６を開き、輪血を開始する。この方法は、輸血に際して貯留して除去した初流液が若干混入する可能性があるが、輸血による副作用の発生を抑制することができるので有用である。
【００３８】また、液体貯留用空間１８に吸収材が設けられている場合には、上記操作において、点滴筒１４を上下正常な状態に戻し、流出液を液体貯留用空間１８に貯留すると、流出液が吸収材に吸収する。この方法は、初流液をほぼ確実に捕捉して除去することができ、輸血による副作用の発生を抑制することができるので有用である。
【００３９】図３の模式図に例示した血液セットは、白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルター１と、該白血球除去フィルター１から白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セット３００であって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段３１０を具備する血液セット３００である。白血球除去フィルター１は、その上流側の血液バッグ（図示せず）と連結チューブ９により連通されている。また、白血球除去フィルター１は、その下流側の初流液を除去する手段３１０と連結チューブ８により連通されている。初流液を除去する手段３１０の下流側には、クレンメ６を備える連結チューブ７が連結されている。白血球除去フィルター１およびその上流側の連結チューブ９には、それぞれエアベント２および３が設けられている。
【００４０】本発明の血液セットの好ましい態様の一つとしては、図３に示されるような、初流液を除去する手段３１０が、筒状の外筒１９と、外筒１９の上流側に設けられ、白血球除去フィルター１から連通する流入口と、外筒１９の下流側に設けられた流出口と、外筒１９の内部に設けられ、一端が外筒１９の該流入口に開口するように外筒１９に液密に接合され、他端が外筒１９の該流出口に対向して第一の空間を置いて所定の位置まで伸長する管体２０であって、外筒１９の内壁と管体２０の外壁とにより形成される第二の空間２３に液体を貯留することができる管体２０とを具備する血液セット３００が挙げられる。
【００４１】図３の（３Ａ）に示されるように、初流液を除去する手段３１０は、目盛り２２を備える点滴筒１９と、連結チューブ８から連通し、点滴筒１９の内部に長紬方向に点滴筒１９の長軸に沿って設けられ、点滴筒１９の内部に開放する先端部である点滴口２１を備える管２０とからなる。目盛り２２は、点滴筒１９を上下逆転させた状態（連結チューブ７側が上、連結チューブ８側が下の状態、図３の（３Ｂ））における液溜限界を示し、これにより最大貯液量が定められる。また、最大貯液量の液を溜めたときに、点滴筒１９の内壁と管２０の外壁とにより形成される液体貯留用空間２３に溜められた液の液面より管２０の管先端部２１が突出した状態になるように管２０の長さが設定されている。
【００４２】液体貯留用空間２３には、吸収材が設けられている。吸収材の種類、使用方法等については、図２の血液セット２００の場合と同様である。
【００４３】図３に示した血液セット３００の使用方法を以下に示す。まず、（３Ａ）に示されるように、点滴筒１４を上下逆転させた状態で、常法に従いクレンメ６を開いて白血球含有液を白血球除去フィルター１に導入する。（３Ｂ）に示されるように、白血球除去フィルター１からの流出液を液体貯留用空間２３に溜めて、液体貯留用空間２３に設けられた吸収材に吸収させる。白血球除去フィルター１からの流出液を目盛り２２の位置を超えないように液溜し、吸収が終了した後、クレンメ６を閉じる。ついで、（３Ｃ）に示されるように、点滴筒１９を上下正常な状態に戻す。このようにして、プライミング操作の際に、初流液が除去される。その後、クレンメ６を開き、輪血を開始する。この方法は、初流液の大部分を捕捉して除去することにより、輸血による急激な副作用の発生を著明に抑制することができるので有用である。
【００４４】図４の模式図に例示した血液セットは、白血球含有液を導入する流入口を有し、該白血球含有液から白血球を分離する白血球除去フィルター１と、該白血球除去フィルター１から白血球除去血液製剤を流出する流路とを具備する血液セット４００であって、該流路が、該白血球除去フィルターから流出する流出液のうち、初流液を除去する手段４１０を具備する血液セット４００である。白血球除去フィルター１は、その上流側の血液バッグ（図示せず）と連結チューブ９により連通されている。また、白血球除去フィルター１は、その下流側の点滴筒４と連結チューブ８により連通されている。点滴筒４の下流側には、クレンメ６を備える連結チューブ７が連結されている。白血球除去フィルター１およびその上流側の連結チューブ９には、それぞれエアベント２および３が設けられている。
【００４５】本発明の血液セットの好ましい態様の一つとしては、図４に示されるような、初流液を除去する手段４１０が、白血球除去フィルター１から連通する入口管と、第一の分岐と、第二の分岐とを有する分岐管２４と、該第一の分岐の下流に配設されるクレンメ２６とを具備し、好ましくは、更に、該第二の分岐に連通する連結チューブ２７と、連結チューブ２７に連通するバッグ２５と、連結チューブ２７に配設されるクレンメ２８とを具備する血液セット４００が挙げられる。
【００４６】連結チューブ８は上流部分と下流部分の二つの部分からなり、その中間部には分岐管２４が挿入され、分岐管２４の連結チューブ８の下流部分に連通しない方の分岐は、連結チューブ２７に連通され、バッグ２５に連結されている。連結チューブ２７には、分岐管２４との接続部の直後の位置にワンタッチクレンメ２８が配設されている。連結チューブ８の下流部分には、分岐管２４との接続部の直後の位置にワンタッチクレンメ２６が配設されている。分岐管２４およびワンタッチクレンメ２６（更に連結チューブ２７、ワンタッチクレンメ２８およびバッグ２５を含めてもよい。）は、初流液を除去する手段４１０を構成する。バッグ２５の内部には、吸収材、血液確固剤等を配置することができる。吸収材としては、図２の血液セット２００の場合と同様のものを用いることができる。バッグ２５を構成する材料の組成、特性等は特に限定されない。
【００４７】図４に示した血液セット４００の使用方法を以下に示す。まず、ワンタッチクレンメ２６を閉じた状態、ワンタッチクレンメ２８を開いた状態で、白血球含有液を白血球除去フィルター１に導入する。白血球除去フィルター１からの流出液をバッグ２５に溜める。バッグ２５に吸収材が配置されている場合には、流出液を吸収材に吸収させる。初流液の流出が終了した後、ワンタッチクレンメ２８を閉じて、ワンタッチクレンメ２６を開き、更にクレンメ６を開いて、輪血を開始する。この方法は、初流液の大部分を分離して除去することにより、輸血による急激な副作用の発生を著明に抑制することができるので有用である。また、初流液と一緒にエアーもバッグ２５内に除去されるため、プライミング操作を省略することができる。
【００４８】なお、図４に示した血液セット４００においては、分岐管２４、連結チューブ２７およびバッグ２５が点滴筒４の上流側の連結チューブ８に設けられているが、これらを点滴筒４の下流側の連結チューブ７に設けてもよい。この場合には、点滴筒４を反転させてプライミング操作を行った後に、バッグ２５に初流液を流入させる。点滴筒４がエアー抜き針が設けられた点滴筒であるときには、点滴筒４を反転しなくても、そのまま血液を点滴筒４内に流入させればプライミング操作を行うことができる。
【００４９】図５の模式図に例示した血液セットは、図４の血液セット４００において、分岐管２４およびワンタッチクレンメ２６に代えて、流路変更用の二方活栓２９を用いたものである。二方活栓２９は、初流液を除去する手段５１０を構成する。図５の血液セット５００は、上記以外は、図４の血液セット４００と全く同様の構成である。
【００５０】本発明の血液セットの好ましい態様の一つとしては、図５に示されるような、初流液を除去する手段５１０が、白血球除去フィルター１から連通する入口と、第一の出口と、第二の出口とを有する二方活栓２９を具備し、好ましくは、更に、該第二の出口に連通する連結チューブ２７と、連結チューブ２７に連通するバッグ２５とを具備する血液セット５００が挙げられる。
【００５１】初流液を除去する手段としては、目的に応じて、図４に示される分岐管およびワンタッチクレンメを選択してもよく、図５に示される二方活栓を選択してもよい。
【００５２】図５に示した血液セット５００の使用方法を以下に示す。まず、二方活栓２９を連結チューブ２７に通じる状態で、白血球含有液を白血球除去フィルター１に導入する。白血球除去フィルター１からの流出液をバッグ２５に溜める。バッグ２５に吸収材が配置されている場合には、流出液を吸収材に吸収させる。初流液の流出が終了した後、二方活栓２９を連結チューブ８に通じる状態とし、更にクレンメ６を開いて、輪血を開始する。この方法は、初流液の大部分を分離して除去することにより、輸血による急激な副作用の発生を著明に抑制することができるので有用である。また、初流液と一緒にエアーもバッグ２５内に除去されるため、プライミング操作を省略することができる。
【００５３】なお、図５に示した血液セット５００においては、二方活栓２９、連結チューブ２７およびバッグ２５が点滴筒４の上流側の連結チューブ８に設けられているが、これらを点滴筒４の下流側の連結チューブ７に設けてもよい。この場合には、点滴筒４を反転させてプライミング操作を行った後に、バッグ２５に初流液を流入させる。点滴筒４がエアー抜き針が設けられた点滴筒であるときには、点滴筒４を反転しなくても、そのまま血液を点滴筒４内に流入させればプライミング操作を行うことができる。
【００５４】
【実施例】以下に実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限られるものではない。以下の比較例１および実施例１〜５のように、図１に示される装置および図２〜図５に示される本発明の血液セットを用いて、白血球除去フィルターによる白血球含有液のろ過を行い、白血球除去フィルターを通過する前後における血液成分中のＮＯ濃度と酸素分圧とを連続的に測定し、更に、白血球除去フィルターを通過した後の血液成分を動物に静脈内投与して、血圧に対する影響を観察した。
【００５５】（比較例１）図１の装置において、血液バッグ１００に入れたウサギの静脈血（ＮＯ濃度：２μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧：８３ｍｍＨｇ（１．１１×１０4 Ｐａ）、実施例１〜４においても同様）をＱＢ２０ｍＬ／ｍｉｎの条件で、白血球除去フィルター１（白血球除去膜材が主としてポリウレタン多孔体からなるもの。実施例１〜４においても同様）に導入し、白血球除去フィルター１から流出液を流出させ、以下のようにしてＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。
【００５６】＜ＮＯ濃度および酸素分圧の測定＞図１に示すように白血球除去フィルター１の前後の流路に液体に接するように、ＮＯ電極１０および１２を設け、それぞれ図示しない配線により、図示しない計測モニターに組み込まれたＮＯ測定装置（ＮＯ−５０１、インターメディカル社製）に接続して、白血球除去フィルター１を通過する前後における液体中のＮＯ濃度を連続的に測定し、結果を図示しない外部レコーダーに記録した。また、図１に示すように白血球除去フィルター１の前後の流路に液体に接するように、酸素電極１１および１３を設け、それぞれ図示しない配線により、図示しない計測モニターに組み込まれた酸素分圧測定装置（ＰＯ2 −１００ＤＷ、インターメディカル社製）に接続して、白血球除去フィルター１を通過する前後における液体中の酸素分圧を連続的に測定し、結果を図示しない外部レコーダーに記録した。
【００５７】＜動物投与後の血圧の測定＞非麻酔下に北島式固定台上に背面固定したウサギ（メス、体重２．１ｋｇ、流出液の調製に用いたウサギとは別の個体）の大腿動脈に、内径１．６５ｍｍの留置用カテーテルを挿入し結紮した後に、圧力トランスジューサー（ＴＰ−００Ｔ、日本光電社製）に接続し、上記流出液をウサギの耳介静脈に留置した留置針から静脈内に注入し、血圧を測定し、圧力モニターにより記録した。なお、本実施例においては、動物としてウサギを用いたが、ラット、イヌ、ネコ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、サル、フェレット等の他の哺乳動物を用いてもよい。
【００５８】比較例１においては、初流液は、目視によって赤血球の混入がなく、無色透明であった。ろ過開始から５ｍＬ流出するまでの初流液において、ＮＯ濃度は２０ｍｏｌ／Ｌ（最大値）であった。動物投与実験においては、この初流液の作用によって最大３０ｍｍＨｇの血圧降下を生じた。ろ過液に赤血球の混入が始まった段階からＮＯ濃度の低下および酸素分圧の上昇が起き、赤血球が濃厚な状態になるとＮＯ濃度は約２μｍｏｌ／Ｌまで回復し、酸素分圧は８０Ｐａとなった。動物投与実験においては、血圧が回復した。
【００５９】（実施例１）図２の模式図に示す初流液を除去する手段２１０が組み込まれた本発明の血液セット２００を使用した。白血球除去フィルター１の容量は５０ｍＬであり、液体貯留用空間１８の容積は５ｍＬであった。（２Ａ）に示されるように、点滴筒１４を上下逆転させた状態で、常法に従いクレンメ６を開いてウサギ静脈血を白血球除去フィルター１に導入した。（２Ｂ）に示されるように、白血球除去フィルター１からの流出液を目盛り１７（液体貯留用空間１８の最大貯液量５ｍＬを示す。）の位置を超えないように５ｍＬ液溜した後、クレンメ６を閉じた。ついで、（２Ｃ）に示されるように、点滴筒１４を上下正常な状態に戻し、流出液を液体貯留用空間１８に貯留した。その後、クレンメ６を開き、白血球除去フィルター１から点滴口５および管１５を通じて流出液を流出させ、比較例１と同様の方法により、ＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。流出液のＮＯ濃度は２．４μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧は８２Ｐａであり、ろ過前の血液と比べて両者に変化は見られなかった。即ち、得られた流出液は、本発明の白血球除去血液製剤であった。また、動物投与実験において血圧の変化は見られなかった。
【００６０】（実施例２）図３の模式図に示す初流液を除去する手段３１０が組み込まれた本発明の血液セット３００を使用した。白血球除去フィルター１の容量は５０ｍＬであり、液体貯留用空間２３の容積は５ｍＬであった。液体貯留用空間２３には、架橋ポリアクリル酸重合体０．１ｇが添加された円筒状の多孔性ポリエチレン焼結体を設けた。また、図示していないが、点滴筒１９の内壁には格子状のストッパーを設け、点滴筒１９を上下正常な状態（３Ｃ）に戻したときに吸収材の落下を防止する構造とした。（３Ａ）に示されるように、点滴筒１９を上下逆転させた状態で、常法に従いクレンメ６を開いてウサギ静脈血を白血球除去フィルター１に導入した。（３Ｂ）に示されるように、白血球除去フィルター１からの流出液を液体貯留用空間２３に溜めて、液体貯留用空間２３に設けられた吸収材に吸収させた。白血球除去フィルター１からの流出液を目盛り２２（液体貯留用空間２３の最大貯液量５ｍＬを示す。）の位置を超えないように５ｍＬ液溜し、吸収が終了した後、クレンメ６を閉じた。ついで、（３Ｃ）に示されるように、点滴筒１９を上下正常な状態に戻した。その後、クレンメ６を開き、白血球除去フィルター１から流出液を流出させ、比較例１と同様の方法により、ＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。流出液のＮＯ濃度は２．２μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧は８４Ｐａであり、ろ過前の血液と比べて両者に変化は見られなかった。即ち、得られた流出液は、本発明の白血球除去血液製剤であった。また、動物投与実験において血圧の変化は見られなかった。
【００６１】（実施例３）図４の模式図に示す初流液を除去する手段４１０が組み込まれた本発明の血液セット４００を使用した。白血球除去フィルター１の容量は５０ｍＬであり、バッグ２５の内容積は１５ｍＬであった。ワンタッチクレンメ２６を閉じた状態で、ウサギ静脈血を白血球除去フィルター１に導入した。白血球除去フィルター１からの流出液約１０ｍＬをバッグ２５に溜めた。初流液の流出が終了した後、ワンタッチクレンメ２６を開き、更にクレンメ６を開いて、白血球除去フィルター１から流出液を流出させ、比較例１と同様の方法により、ＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。流出液のＮＯ濃度は２．４μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧は８３Ｐａであり、ろ過前の血液と比べて両者に変化は見られなかった。即ち、得られた流出液は、本発明の白血球除去血液製剤であった。また、動物投与実験において血圧の変化は見られなかった。
【００６２】（実施例４）図５の模式図に示す初流液を除去する手段５１０が組み込まれた本発明の血液セット５００を使用した。白血球除去フィルター１の容量は５０ｍＬであり、バッグ２５の内容積は１５ｍＬであった。二方活栓２９を連結チューブ２７に通じる状態で、ウサギ静脈血を白血球除去フィルター１に導入した。白血球除去フィルター１からの流出液約１０ｍＬをバッグ２５をバッグ２５に溜めた。初流液の流出が終了した後、二方活栓２９を連結チューブ８に通じる状態とし、更にクレンメ６を開いて、白血球除去フィルター１から流出液を流出させ、比較例１と同様の方法により、ＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。流出液のＮＯ濃度は２．１μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧は８０Ｐａであり、ろ過前の血液と比べて両者に変化は見られなかった。即ち、得られた流出液は、本発明の白血球除去血液製剤であった。また、動物投与実験において血圧の変化は見られなかった。
【００６３】（実施例５）図２の模式図に示す初流液を除去する手段２１０が組み込まれた本発明の血液セット２００を使用した。白血球除去フィルター１の容量は５０ｍＬであり、液体貯留用空間１８の容積は５ｍＬであった。液体貯留用空間１８には、架橋ポリアスパラギン酸重合体０．３ｇを不織布に塗布したものを円筒状に丸めて点滴筒１４の内壁に沿うように挿入した。（２Ａ）に示されるように、点滴筒１４を上下逆転させた状態で、常法に従いクレンメ６を開いてウサギ静脈血を白血球除去フィルター１に導入した。（２Ｂ）に示されるように、白血球除去フィルター１からの流出液を目盛り１７（液体貯留用空間１８の最大貯液量５ｍＬを示す。）の位置を超えないように５ｍＬ液溜した後、クレンメ６を閉じた。ついで、（２Ｃ）に示されるように、点滴筒１４を上下正常な状態に戻し、流出液を液体貯留用空間１８に貯留し、液体貯留用空間１８に設けられた吸収材に吸収させた。その後、クレンメ６を開き、白血球除去フィルター１から点滴口５および管１５を通じて流出液を流出させ、比較例１と同様の方法により、ＮＯ濃度および酸素分圧の測定ならびに動物投与後の血圧の測定を行った。流出液のＮＯ濃度は２．１μｍｏｌ／Ｌ、酸素分圧は８５Ｐａであり、ろ過前の血液と比べて両者に変化は見られなかった。即ち、得られた流出液は、本発明の白血球除去血液製剤であった。また、動物投与実験において血圧の変化は見られなかった。
【００６４】
【発明の効果】本発明の白血球除去血液製剤の調製方法によれば、白血球除去フィルターを用いて輸血する際に起きる血圧降下等の副作用を回避することができ、安全性が高い。また、本発明の白血球除去血液製剤の調製方法は、簡便である。したがって、本発明の白血球除去血液製剤の調製方法は、極めて有用である。本発明の血液セットは、本発明の白血球除去血液製剤の調製方法に好適に用いることができる。また、本発明の血液セットは、簡便に使用することができる。したがって、本発明の血液セットは、極めて有用である。
【出願人】 【識別番号】０００１０９５４３
【氏名又は名称】テルモ株式会社
【出願日】 平成１２年１２月４日（２０００．１２．４）
【代理人】 【識別番号】１０００８０１５９
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 望稔 （外１名）
【公開番号】 特開２００２−１７３４３３（Ｐ２００２−１７３４３３Ａ）
【公開日】 平成１４年６月２１日（２００２．６．２１）
【出願番号】 特願２０００−３６８０９５（Ｐ２０００−３６８０９５）